방사선 표지된 항체를 사용하여 쥐 모델에서 종양을 감지하는 In Vivo PET 이미징 기술

초록

출처: Zeglis, B. M., et al. ⁸⁹Zr-DFO 표지 항체의 생체 접합 및 방사선 합성. J. Vis. 특급 (2015).

이 비디오는 마우스 모델에서 종양의 생체 내 이미징을 위한 방사성 면역접합체와 관련된 기술을 보여줍니다. 방사성 면역접합체를 주입하면 접합체의 항체는 암세포의 특정 막 항원에 결합합니다. 접합체의 방사성 추적자는 주변 전자와 상호 작용하여 에너지를 생성하는 양전자를 방출하며, 이는 양전자 방출 단층 촬영(PET) 스캐너에 의해 감지되어 종양의 이미지를 생성합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. ⁸⁹Zr-DFO-J591을 사용한 생체 내 PET 이미징

주의: 프로토콜의 이 단계에는 방사능의 처리 및 조작이 포함됩니다. 이러한 단계를 수행하기 전에 연구자는 소속 기관의 방사선 안전 부서와 상의해야 합니다. 전리 방사선에 대한 노출을 최소화하기 위해 가능한 모든 조치를 취해야 합니다.

1. 수컷 흉선 누드 마우스에서 전립선 암종(LNCaP) 암세포의 5 x 10⁶ 림프절 암종을 피하에 이식하고 이들이 100-150mm³ 이종이식(접종 후 3-4주)으로 성장하도록 합니다.
2. ⁸⁹Zr-DFO-J591 방사성 면역접합체를 0.9% 멸균 식염수 중 1.0mCi/ml의 농도로 희석합니다.
3. ⁸⁹Zr-DFO-J591(DFO = 데스페리옥사민, J591 = 전립선 특이적 막 항원[PSMA] 표적 항체) 용액 200μl(200μCi, 7.4MBq)를 이종이식 마우스의 측면 꼬리 정맥에 주입합니다.
4. 원하는 이미징 시점(예: 주입 후 12, 24, 48, 72, 96 또는 120시간)에서 2% 이소플루란: 산소 가스 혼합물로 마우스를 마취합니다.
5. 마우스를 작은 동물 PET 스캐너의 침대에 놓고 1% 이소플루란: 산소 가스 혼합물을 사용하여 스캔하는 동안 마취를 유지합니다. 동물을 스캐너 침대에 눕히기 전에 발가락 꼬집음 방법을 사용하여 마취를 확인하고 마취 중 건조를 방지하기 위해 마우스의 눈에 안과 연고를 바르십시오.
6. 350-700keV의 에너지 창과 6nsec의 우연 타이밍 창을 사용하여 최소 4천만 개의 동시 이벤트가 있는 정적 스캔을 통해 마우스에 대한 PET 데이터를 획득합니다.
7. 이미지 획득을 완료한 후 마우스를 방치하지 말고 마우스가 의식을 되찾을 때까지 다른 마우스와 함께 케이지에 넣지 마십시오.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
p-SCN-Bn-DFO	매크로사이클릭(Macrocyclics)	나-705	-80 °C에서 보관하십시오
[89Zr]Zr-옥살레이트	Perkin-Elmer를 포함한 다양한	-	주의: 방사성 물질