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Dye-Labeled Magnetic Microspheres를 사용한 Multiplexed Quantitative Bacterial Detection

December 23rd, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 비디오는 별개의 세트로 염색된 카르복실화 자성 폴리스티렌 미세구를 사용하여 다중화된 정량적 박테리아 검출을 보여줍니다. 이 절차는 비드-박테리아 복합체의 형성, 자기 분리 및 흐름 기반 분석을 포함하여 동일한 반응 웰에서 여러 박테리아를 정확하고 동시에 정량화할 수 있습니다.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. MagPlex 마이크로스피어에 대한 포획 항체의 공유 결합

각 포획 항체는 아래 설명된 2단계 절차를 사용하여 특정 카르복실화된 자기 마이크로스피어 세트에 접합됩니다.

참고: 마이크로스피어 커플링에 필요한 모든 시약, 완충액 및 재료가 포함된 커플링 키트도 사용할 수 있습니다(재료 표 참조).

  1. microspheres와 함께 제공된 제품 정보 시트에 설명된 지침에 따라 stock uncoupled microsphere suspension을 재현탁합니다.
    메모: 재현탁 지침은 재고 마이크로스피어 바이알의 크기와 부피에 따라 달라집니다.
  2. 2.5 x 106의 스톡 마이크로스피어를 권장 마이크로원심분리기 튜브로 옮깁니다(재료 표 참조).
  3. 튜브를 자기 분리기에 넣고 60초 동안 분리되도록 합니다.
  4. 튜브를 자기 분리기에 여전히 위치시킨 상태에서 상층액을 제거합니다.
    메모: 미세구를 방해하지 않도록 주....

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Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
그림 1: Multiplexed capture sandwich immunoassay workflow. 항체 결합 미세구의 다중화된 혼합물을 각 웰에 분배하고 샘플을 추가합니다. 1시간 동안 배양한 후 반응을 세척하고 비오틴화된 검출 항체를 첨가합니다. 1 시간 배양 후 반응을 다시 세척하고 SAPE 리포터를 추가합니다. 반응을 30분 동안 배양하고 세척한 후 xMAP 흐름 분석기에서 결과를 읽습니다.

....

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
선언된 이해 상충이 없습니다.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
MagPlex® 마이크로스피어루미넥스®MC100xx-YY개별 카탈로그 번호는 웹 사이트 참조(https://www.luminexcorp.com/magplex-microspheres/#order)
1.5mL 마이크로 원심분리기 튜브 에펜도르프™22431081단백질 LoBind®
0.1 M 일염기성 인산나트륨 (NaH2PO4 ), pH 6.2밀리포어시그마 S3139 (영어활성화 버퍼
1-에틸-3-[3-디메틸아미노프로필]카르보디이미드 염산염(EDC)써모 사이언티픽(Thermo Scientific™피어싱™ 77149
N-하이드록시설포숙신이미드(Sulfo-NHS)써모 사이언티픽(Thermo Scientific ™피어싱™ 24510
인산염 완충 식염수(PBS), pH 7.4밀리포어시그마P3813커플링 버퍼
xMAP® 항체 커플링 키트루미넥스®제40-50016마이크로스피어 커플링에 사용할 수 있는 옵션 키트.
Anti-Escherichia coli O157:H7 항체세라케어5310-0326Polyclonal, 포획 및 검출 모두에 사용
Anti-Salmonella CSA-Plus 항체세라케어5310-0321Polyclonal, 포획 및 검출 모두에 사용
Anti-Campylobacter spp. 항체세라케어5310-0324Polyclonal, 포획 및 검출 모두에 사용
항리스테리아 항체세라케어5310-0319Polyclonal, 속 특이적, 포획 및 검출 모두에 사용
PBS, pH 7.4 함유 0.02% Tween-20, 0.1% BSA, 0.05% 아지드화나트륨(PBS–TBN) 밀리포어시그마P3563
A7888
S8032 (영어		최대 1%의 BSA를 사용할 수 있습니다.
Anti-Escherichia coli O157:H7 항체세라케어5310-0326다클론성
(EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin) (피어스).써모 사이언티픽(Thermo Scientific™A39257
대장균 O157:H7세라케어5370-0013열 사멸
살모넬라균
혈청형 Typhimurium		세라케어5370-0002열 사멸
캄필로박터 제주니세라케어5370-0011열 사멸
리스테리아 모노사이토제네스세라케어5370-0010열 사멸
스트렙타비딘, R-피코에리트린 접합체(SAPE)써모 사이언티픽(Thermo Scientific™S866
) ) ) (영문) 호 ) ) 의 대답 ) (영어)

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Magnetic MicrospheresBacterial DetectionFlow Based AnalysisAntibody ConjugationMagnetic SeparationMultiplexed QuantificationFluorescent ReporterStreptavidin BindingBead Bacteria ComplexesSpectral Signatures

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