투과 전자 현미경을 사용한 마우스 뇌 절편의 초구조 분석

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

출처: Lutz, D., et.al. 발달 중인 마우스 뇌 및 척수의 자궁 내 전달 후 초구조적 신경 가소성 매개변수의 평가. J. Vis. 특급 (2019).

이 비디오는 새끼 쥐의 뇌 절편에 대한 준비 및 투과 전자 현미경(TEM) 분석을 보여줍니다. 이 프로토콜은 수지에 내장된 오스뮴 테트록사이드 고정 조직으로 시작하여 관심 영역을 분리하기 위한 정밀한 트리밍과 초박형 절개술을 통해 각각 광학 현미경 및 TEM을 사용하여 시각화된 반박형 및 초박형 절편을 생성합니다.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

동물 샘플과 관련된 모든 절차는 해당 동물 윤리 검토 위원회에서 검토되고 승인되었습니다.

1. 정량 분석을 위한 초구조적 신경가소성 매개변수 선택

관심 영역 매핑
1. 관심 영역(예: 해마 또는 소뇌)을 선택하고 이 영역을 포함하는 아틀라스에서 이미지를 선택하여 섹션 아틀라스에서 영역을 지역화합니다.
2. 관심 영역의 경계를 단면 이미지에 스케치하고 이러한 영역 경계를 수지 표본에 찾거나 겹칩니다.

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Materials

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number	Comments
광학 현미경 Basic DM E	Leica	-	4x(해당 없음 0.1 ∞/-), 10x(해당 없음 0.) 22 ∞/0.17), 40x (N.A. 0.65 ∞/0.17), 100x (N.A. 1.25 ∞/0.17) objectives
모기 지혈 겸자 (12.5cm, 곡선)	FST	13010-12
Nickel grids, 200 mesh	Ted Pella	1GC200
면도날	Schick	87-10489
Technovit 4004 두 구성 요소 glue	Kulzer
얇은 진동 면도날 장치	Krup	-	with Szabo thin blades
Toluidine blue	Sigma-Aldrich	89640
투과 전자 현미경 C20	Phillips	-	최대 200kV
울트라컷 E	Reichert-Jung	-	초박<
CIBA-GEIGY	23857.9	조직 매립용 수지
오스뮴(VIII)-산화	Degussa	73219

td 스타일='높이:15.75pt;너비:189pt;'>Araldite

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