Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy를 사용한 조직 절편의 아밀로이드 구조 분석

Abstract

출처: Nyström, S., et al., 초분광 컨포칼 현미경 및 형광 수명 이미징에 의한 발광 복합 올리고티오펜으로 염색된 아밀로이드 조직 이미징. J. Vis. 특급 (2017).

이 동영상은 hFTAA 염료를 사용하여 아밀로이드 조직을 반영하는 색상으로 구분된 이미지에서 소형 코어를 파란색/녹색으로, 불안정한 주변부를 빨간색/노란색으로 표시하여 형광 수명 이미징 현미경 또는 FLIM으로 아밀로이드 구조를 분석하는 방법을 보여줍니다.

Protocol

1. 조직 샘플의 준비

참고: heptamer-formyl thiophene acetic acid (hFTAA)를 아밀로이드 마커로 사용하여 많은 조직 유형을 이미지화할 수 있습니다. hFTAA는 응집체 형태에 민감합니다. 따라서 염색은 항원결정기에 노출되지 않은 중단되지 않은 응집체에서 수행되는 것이 바람직합니다. 최적의 스펙트럼 품질은 조직 고정이 최소로 유지되는 경우 달성됩니다. 따라서 염색 시 에탄올에 부드럽게 고정된 신선한 냉동 재료가 선호됩니다. 그러나 , 예를 들어 , 포르말린으로 고정된 조직에서도 아밀로이드 침착을 검출할 수 있습니다. hFTAA는 일반적으로 조직을 잘 관통합니다. 의도한 이미징 기술과 호환되는 표본 두께를 선택합니다.

1. 포르말린이 고정되고 파라핀이 함유된 절편을 사용하는 경우, 밤새 자일렌에서 파라핀을 제거해야 합니....

Materials