이 비디오는 FRET(Fluorescence Resonance Energy Transfer) 기반 센서를 사용하여 유기형 마우스 해마 절편에서 세포 내 ATP 수준을 측정하여 생리학적 및 실험적 조건에서 뉴런 및 성상세포의 ATP 역학을 실시간으로 시각화할 수 있도록 하는 방법을 보여줍니다.
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방법 논문
Imaging intracellular ATP Dynamics Using FRET-based sensors in an organotypic mouse hippocampal slice(유기형 마우스 해마 절편에서 FRET 기반 센서를 사용한 세포 내 ATP 역학 이미징)
734 조회수
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2025년 4월 28일
이 논문에서
초록
프로토콜
동물 샘플과 관련된 모든 절차는 해당 동물 윤리 검토 위원회에 의해 검토되고 승인되었습니다.
1. FRET 기반 ATP 이미징 (그림 1)
- 실험 전에 E-ACSF를 준비하고 95% O2/5% CO2로 최소 30분 동안 버블링하여 pH 7.4를 얻습니다. 모노크로메이터의 형광등(크세논 램프)을 켭니다(그림 1). 인큐베이터에서 슬라이스를 꺼내기 직전에 관류를 시작하십시오.
참고: 전체 실험 동안 95% O2 및 5% CO2로 식염수를 거품이 일게 합....
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결과
그림 1: FRET 이미징 설정 구성. (A) FRET 이미징 설정에 필요한 다양한 구성 요소와 공간 배열에 대한 개략도. 장치는 광원으로 크세논 램프가 있는 모노크로메이터, 정립 고정 스테이지 현미경(1), 이미지 스플리터 시스템(2), 타임랩스 녹화를 위한 디지털 CCD 또는 CMOS 카메라(3), 안정적인 정수 .......
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