Visualizing Astrocyte Morphology Using Fluorescent Dye Iontophoresis in a Fixed Mouse Brain Slice

초록

출처: Moye, S. L., et.al. Lucifer Yellow Iontophoresis를 사용한 성상세포 형태 시각화. J. Vis. Exp. (2019).

이 비디오는 고정된 뇌 절편에서 성상세포 형태를 연구하기 위해 형광 염료 이온 영동을 사용하는 방법을 보여줍니다. 이 연구는 저전압 전류 하에서 음이온성, 친수성 염료를 세포질로 전달하기 위해 전극으로 성상세포체(astrocyte soma)를 뚫는 방법을 자세히 설명하여 염료가 체세포(soma)와 가지를 확산시키고 표지할 수 있도록 합니다. 그런 다음 컨포칼 현미경을 사용하여 표지된 성상세포를 시각화하여 형태학적 통찰력을 제공합니다.

프로토콜

동물 샘플과 관련된 모든 절차는 해당 동물 윤리 검토 위원회에서 검토되고 승인되었습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
필라멘트가 있는 붕규산 유리 피펫	세계 정밀 기기	1B150F-4
컨포칼 레이저 스캐닝 현미경	올림푸스	FV1000MPE	유사한 대안을 사용할 수 있습니다
Imaris 소프트웨어 (버전 7.6.5)	Bitplane Inc.		유사한 대안을 사용할 수 있습니다.
루시퍼 옐로우 CH 디리튬 염	시그마	L0259
루시퍼 옐로우 CH 디칼륨염	시그마	L0144
대물렌즈(40x)	올림푸스	LUMPLFLN 40XW	유사한 대안을 사용할 수 있습니다
대물렌즈(60x)	올림푸스	PlanAPO 60X	유사한 대안을 사용할 수 있습니다
PBS 정제, 100 mL	VWR	VWRVE404	동일한 대안을 사용할 수 있습니다.
피펫 미세 조작기- 모델 ROE-200	셔터	MP-285 / ROE-200 / MPC-200	유사한 대안을 사용할 수 있습니다.
염화칼륨	시그마	P3911	동일한 대안을 사용할 수 있습니다.
Stimulator- Model Omnical 2010	세계 정밀 기기	Omnical 2010	유사한 대안을 사용할 수 있습니다.