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동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리위원회와 JoVE 수의사에 의해 검토되었습니다. 검토 위원회.
1. 시신경염 및 뇌 염증의 생물 발광 영상
- 이미징 시스템 설정
- 생물 발광 및 근적외선 신호를 분석할 수 있는 모든 장비로 생체 내 이미징을 수행합니다.
- 모든 이미징 절차 동안 마우스를 2 - 2.5% 이소플루란 마취 미만으로 유지하십시오.
- 중간 가스 공급 장치를 사용하는 장치에 하나 또는 두 개의 마우스를 나란히 놓습니다. 위쪽 척추를 중앙에 배치합니다.
- 약물 효과를 평가하려면 그룹당 하나씩 동시에 두 마리의 마우스를 사용하여 마우스 쌍을 비교하십시오. 이는 생물 발광 이미징에 중요합니다.
- 검은 천으로 예방 접종 부위를 가리고 사진과 기본 이미지를 촬영하여 마우스/마우스의 올바른 위치를 평가합니다. 모든 이미지의 경우 카메라에서 6.5cm 거리에서 B 초점을 사용합니다.
- 생물 발광 염증 프로브의 주입 및 이미징
- <span style='font-family:Arial,sans-serif;font-size:12pt;font-variant:normal;font-weight:400;text-decoration:none;vertical-align:baseline;white-space:pre-wrap;'>in vivo 이미징 시스템 설정: Epi-BLI, Em filter open, Ex filter block, fstop 1, binning 8, focus B = 6.5 cm, ad exposure 120 s; 기준선 이미지를 촬영합니다.
- 즉시 사용 가능한 화학발광 시약(40mg/mL) 100μL i.p.를 주입합니다. 주사기를 채우기 전에 잘 섞으십시오.
- 주입 후 5분, 10분, 15분 후에 생물 발광 이미지를 캡처합니다. 생물 발광 피크의 시간 경로는 동물마다 다릅니다.
참고: Peak는 주입 후에 5 - 10 분 일어날 것입니다; 15분에서 감소하면 더 이상 이미지가 필요하지 않음을 나타냅니다. 대조군과 치료군의 마우스 쌍을 사용하여 서로 다른 시간 경과로 인한 사소한 편향을 제거합니다. - 실험과 관련된 설명을 입력합니다. 대화 상자가 자동으로 팝업되는 것을 관찰하십시오. 여기에는 마우스 변형, 성별, 시점, 프로브 주입 시간, 그룹, etc. 파일을 모두 하나의 폴더에 저장하십시오. 그들은 시간 태그와 모든 설명을 가질 것입니다.