Multispectral Diffuse Reflectance Imaging of Rat Cerebral Blood Flow and Tissue Structure

초록

출처: Nishidate, I., et al. 다중 스펙트럼 확산 반사 이미징을 사용하여 In vivo 쥐 뇌의 대뇌 혈류역학 및 광 산란 특성을 동시에 평가합니다. J. Vis. Exp. (2017)

이 비디오는 다중 스펙트럼 확산 반사 이미징을 사용하여 마취된 쥐의 뇌 혈류, 산소 수치 및 조직 구조 변화를 분석하여 다양한 조건에서 뇌 혈류역학 및 형태에 대한 통찰력을 제공하는 방법을 보여줍니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 샘플 이미지 획득
   참고: 9개의 파장에서 노출된 쥐 뇌의 확산 반사광 강도 이미지는 동일한 획득 조건을 사용하여 캡처되어 개인용 컴퓨터의 하드 드라이브에 저장됩니다.
   1. 쥐를 무대에 부드럽게 놓고 무대 높이를 천천히 조정하여 카메라가 쥐의 뇌 표면에 초점을 맞출 수 있도록 합니다.
   2. 파일 메뉴에서 "저장" 명령을 선택하여 이미지를 파일에 저장합니다.
   3. 필터 휠을 회전하여 필터 위치를 변경합니다.
   4. 위에서 설명한 과정에 따라 다른 파장에 이미지를 저장합니다. 파일 이름은 샘플과 파장을 식별해야 합니다(예: R500, R520, R540 ... R760).
2. 어두운 이미지 획득
   참고: CCD(충전 결합 장치) 카메라는 전기 신호에 대한 응답으로 광도를 생성할 수 있습니다. 그러나 빛이 감지기에 들어가지 않더라도 전기 회로 및 감지기의 잡음으로 인해 약간의 출력이 있습니다. 이를 암전류 잡음이라고 합니다. 빛의 스펙트럼 강도를 정확하게 측정하려면 암전류 성분을 어두운 이미지로 기록한 다음 측정된 신호에서 빼야 합니다. 어두운 이미지는 빛의 경로를 차단한 상태에서 촬영한 이미지입니다.
   1. 할로겐 램프 광원을 끕니다.
   2. 차폐판을 사용하여 CCD 카메라 시스템으로 가는 광 경로를 차단합니다.
   3. 파일 메뉴에서 "저장" 명령을 선택하여 이미지를 파일에 저장합니다. 파일 이름은 샘플을 식별해야 합니다(예: Dark).

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
150-W 할로겐 램프 광원	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan	LA-150SAE
Light guide	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan	LGC1-5L1000
수집 렌즈	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan	SH-F16
간섭 필터 l@500nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65088
간섭 필터 l@520nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65093
간섭 필터 l@540nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65096
간섭 필터 l@560nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#67766
간섭 필터 l@570nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#67767
간섭 필터 l@580nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65646
간섭 필터	l@600nm Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65102
간섭 필터 l@730nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65115
간섭 필터 l@760nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#67777
전동 필터 휠	Andover Corporation, NH, USA	FW-MOT-12.5
16비트 냉각 CCD 카메라	Bitran, 일본	BS-40
비디오 줌 렌즈	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	VZMTM300i
Spectralon white standard with 99% diffuse reflectance	Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA	SRS-99-020