의 연결 응답 Electrophysiological 특성은 뇌의 기능을 이해와 경로 추적을위한 염료의 위치를지도 중요합니다. 그러나 많은 연구 anesthetized 동물에서 수행됩니다. anesthetics없이 뇌 기능을 이해하기 위해서, 우리의 연결 응답 특성을 기록하고 깨어있는 마우스에 염료를 주입하는 방법을 개발했습니다.
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이 논문에서
요약
초록
그것은 잘 마취가 두뇌의 여러 지역에서 신경 반응 속성을 바꿀지도 모르겠어 것으로 알려져 있습니다. 13. 청각 시스템에서 임계값, 주파수 특이성 및 억제 sidebands 포함한 brainstem의 뉴런의 근본적인 응답 특성 1-2 마취하에 상당한 방법으로 변경됩니다. 이러한 관찰 physiologists은 마취의 오염 영향없이 하나의 뉴런에서 녹화할 수있는 방법을 모색하라는 메시지가 나타납니다. 한 결과는 brainstem 완전히 midbrain 4의 수준에서 그었습니다 decerebrate 준비했습니다. 이 준비의 단점 무서운 수술, forebrain의 전망을 내림차순의 철폐, 그리고 midbrain 위의 구조를 조사하는 감각 자극을 사용하는 무능력이다. 다른 전략은 동물이 깨어 및 / 또는 5,6를 행동 중에 하나의 뉴런과 multiunit 클러스터에서 녹음 만성 전극 배열을 이식해왔다 10-12로 박쥐 7-9에서 사용 헤드 구속 기법을 적응했습니다. 이 방법을 사용하여, 우리는 unanesthetized 마우스에서 며칠 동안 electrophysiological 레코딩을 수행할 수 있습니다. 레코딩 세션의 끝에, 우리는 다음 전극 위치 및 녹음 사이트를 재구성하거나 및 녹화 loci의 경로가 결정 수 있도록 추적기 주입하는 염료를 주입하실 수 있습니다. 이 방법은 사용 anesthetics없이 여러 일 동안 잘 격리 단일 신경 세포 녹음을 허용합니다.
프로토콜
1. 헤드 - 구속 개요
- 맞춤식 헤드 게시물을 조립하기 위해 십자가를 형성 스테인레스 스틸 막대 "32분의 3 년 뚫고 구멍에 수직 스테인레스 스틸은 롤 핀"1 / 16 삽입합니다. 헤드 게시물의 수직 조각 약 20 mm와 15mm에 대한 수평 십자가 조각이어야합니다. # 1-72 나사를 받아들이도록 수직 막대의 한쪽 끝을 누릅니다. (그림 1).
- 수술 및 녹음 중에는 헤드 게시물 # 1-72 나사 (그림 2)의 맞춤식 황동 또는 알루미늄 장착 표시줄에 보안이됩니다. 장착 막대의 긴 조각 약 90 mm 길고 폭이 5-10밀리미터 있어야합니다. 헤드 게시물 45 있길에 직각되는 긴 막대 해제 15mm 연장에 홈 인하로 힘드 네요. 장착 막대의 아래쪽에 작은 홈에 머리 회전, 헤드 게시물 nestles의 가로대을 방지합니다.
- 에 장착 막대 후 맞춤 알루미늄 마운팅 블록에 부착된K (그림 3). 마운트 블록은 약 30mm X 30mm X 25mm입니다. 이 마운트 블록은 정면 게시물의 위치가 정확하게 중간선을 따라와 Bregma에 배치할 수 있도록 micro....
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토론
마우스의 electrophysiological 및 neuroanatomical 실험을위한 헤드 게시물 구속 시스템의 장점은 실험 마취 약물로 인한 잠재적인 응답 오염을 제거, unanesthetized, 깨어있는 생쥐로 수행할 수있다는 것입니다. 또한, 세트까지보다 효율적인 동물 사용할 수 있도록 여러 일 동안 사용할 수 있습니다.
헤드 게시물에 대한 대부분의 구성 요소는 재고품이 가능합니다. 만이 헤드 게시물과 장착 기기는 맞춤이며, 건설 비교적 간단하고 재사용이다 둘 다. 기계 공장은 기관에서 사용할 수없는 경우, 연구자는 가능성이 사용할 수 http://www.emachineshop.com/ 필요한 구성 요소를 조작하는 걸.
능숙 수술 기술이 필요합니다. 외과 의사가 최선의 현미경 아래에서 수행하고 일부는 미세 수술.......
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공개 사항
우리는 공개 할게 없다.
감사의 글
NSF 교부금 0,920,060, NIH 교부금 DC004395, NHMRC 교부금 1,009,482, 과학 및 의학 연구의 NSW Office 및 가넷 예스 러운와 로드니 윌리엄스 기념 재단 지원.
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재료
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참고문헌
- Evans, E. F., Nelson, P. G. The responses of single neurones in the cochlear nucleus of the cat as a function of their location and the anaesthetic state. Exp. Brain Res. 17, 402-427 (1973).
- Joris, P. X.
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