Method Article

Methicillin 내성의 실험 심내막염 모델 황색 포도상 구균 (MRSA) 쥐에서

DOI:

10.3791/3863

June 4th, 2012

In This Article

Summary

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methicillin - 내성으로 인해 실험 쥐의 심내막염 모델 S. 구균.

Abstract

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심내막염을 포함한 Endovascular 감염은 생명을 위협하는 전염성 syndromes 있습니다 1-3. 포도상 구균은 unacceptably 높은 병적 상태, 심지어 적절한 항균 대리인 트리 트먼트 4-6과 사망률과 같은 syndromes의 가장 일반적인 전세계 원인입니다. 인해 methicillin - 내성 S.로 감염의 증가 구균 (MRSA)은 vancomycin 임상 치료 실패 및 linezolid와 daptomycin 저항의 증가 문제의 높은 가격은 같은 감염 환자의 더 복잡한 관리 기능을 가지고 있고, 높은 의료 비용 7, 8로 이끌었다. 또한, 그것은 항생제 치료 결과와 최근의 연구는 임상 설정에 기반되어, 따라서 잘 환자 대 환자에서 다양한 호스트 요인에 의해 영향을받을 수 있다고 강조한다. 따라서, 호스트 요인 동물 대 동물에서 유사한있는 endovascular 감염의 관련 동물 모델은 더미생물 pathogenesis뿐만 아니라, 소설 항균 대리인의 효능을 조사하는 것이 매우 중요합니다. 쥐의 심내막염은 밀접하게 인간의 기본 밸브 심내막염을 대략 잘 확립된 실험 동물 모델입니다. 이 모델은 특히 포도상 구균 독성 요인의 역할과 포도상 구균 심내막염에 대한 항생제 치료 regimens의 효능을 검사하기 위해 사용되었습니다. 이 보고서에서는 세균 pathogenesis 및 항생제 치료에 반응을 조사하는 데 사용할 수있는 MRSA에 의한 실험 심내막염 모델을 설명합니다.

Protocol

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1. 감염 MRSA 변종 준비

  1. 소이 한천 배지 (TSA) 플레이트 Trypticase 양의 혈액 (특정 시약 및 장비의 표 참조) -80에서 재고 관에서 MRSA 문화의 loopful ° C를 접종하고, 37 ° C에서 하룻밤 동안 품어.
  2. 전혀 오염이없는 있는지 확인하기 위해 혈액 한천 플레이트 (유사 식민지의 ph​​enotypes)에서 문화의 순도를 확인합니다.
  3. 양의 혈액 TSA 플레이트에서 한 식민지를 선택하고 15 ML 스냅인 뒤덮인 튜​​브에 5 ML Trypticase 간장 국물 (TSB)에 식민지의 예방.
  4. 37 품어 ° C에서 200 rpm으로 떨고있는 하룻밤.

2. 수술 카테터를 준비

10cm 길이로하고, 멸균 포셉와 팁을 눌러 한쪽 끝을 녹여, 폴리에틸렌 튜브 (Becton 디킨슨, 순서없이 427,401. PE10)을 잘라. 카테터의 한쪽 끝을 씰링의 목적은 catheterization 동안 출혈을 방지하는 것입니다.

3. 사전의urgery 준비 및 아나스타샤

  1. isofluorane - 산소 가스 혼합물 (50 % : 50....

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Discussion

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쥐 심내막염은 세균 감염 9-11의 치료 pathogenesis 및 항균 대리인의 생체내 연구에 대한 중요하고 잘 특징 동물 모델입니다. 또한, 쥐의 심내막염 모델은 급성과 하위 급성 감염의 합성을 대표하고, 밀접하게 인간의 대응과 인간의 원시 밸브 심내막염을 모방한 것이었 지요. 또한,의 주거 카테터와 함께, 그것은 고전 biofilm - 연관된 감염, 임상 설정 12 일반적이고 어려운 문제를 나타냅니다. 가장 중요한 것은 쥐 심내막염 모델로 생성된 결과는 매우 재현할 수 있습니다.

S.의 pathogenicity 쥐 심내막염 모델에서 구균은 다른 동물 모델로, inoculum 선량, 박테리아의 성장 단계 (로그 대 고정), 동물의 나이, 그리고 동물의 유전적 배경 9, 13을 포함하여 매개 변수의 수에 따라 달라질 수 있습니다. 외과의 성공 요금은 H입니다연구원의 기.......

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Disclosures

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관심의 어떠한 충돌 선언 없습니다.

Acknowledgements

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이 작품은 건강의 미국 국립 연구소에 의해 지원되었다 [부여 ASB에 R01AI-39108]와 미국 심장 협회 [보조금 SDG 0630219N 및 YQX에 대한 지원 09GRNT2180065].

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
시약의 이름 회사 카탈로그 번호 댓글
Trypticase의 콩 한천의 혈액 한천 플레이트, 5 %의 양을 혈액 (TSA) 하디 진단 A10BX
Trypticase 간장 국물 (TSB) Becton 디킨슨 211,825
배양기를 흔들어봐 Labnet I5311-DS
폴리에틸렌 튜브 Becton 디킨슨 427,401
카테 테르 introducer Becton 디킨슨 6999
Isofluorance 서양 의학 SuppY, INC 2147 안전 및 취급 정보를 따라
외과 용구 파인 과학 도구 및 바이오 메디컬 리서치 인 스트 루먼트 주식 회사에게 사용자의 요구에 두 회사로부터 악기를 찾기

References

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  1. Petti, C. A., Fowler, V. G. Staphylococcus aureus bacteremia and endocarditis. Cardiol. Clin. 21, 219-233 (2003).
  2. Bashore, T. M., Cabell, C., Fowler, V. Update on infective endocarditis. Curr. Probl. Cardiol. 31, 274-352 (2006).
  3. Fowler, V. G. Jr, Justice, A., Moore, C.

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MRSA EndocarditisRat ModelSurgical ProcedureCatheter InsertionTail Vein InjectionQuantitative CultureIn Vivo ImagingAntibiotic EfficacyVirulence FactorsEndovascular Infection

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