내피 콜로니 형성 세포 (ECFCs) 본질을 표시하는 강력한 clonal proliferative 잠재력과 내피 세포를 순환하고 있습니다 생체내에서 함선 능력을 형성. CB에서 파생된 가지 내피 세포의 Phenotypic 및 기능적 특성 식별하고 격리하는 데 중요 어딘가에서 손상된 조직을 복구에서 잠재적인 임상 응용을위한 ECFCs.
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이 논문에서
요약
초록
angiogenesis, vasculogenesis 및 arteriogenesis 통해 새로운 혈관 형성의 오랜 전망은 최근 1을 검토하고있다. 내피 전구 세포 (EPCs)를 순환의 존재가 처음 Asahara 외 의해 성인이 인간의 말초 혈액에서 발견되었다. 1,997 2가 혈관 재생 및 수리에 대한 새로운 가설과 전략의 주입을 가져 인치 EPCs은 혈액 순환의 드물지만, 일반적인 구성 요소입니다 그 혈관 형성이나 혈관 리모델링의 사이트에 대한 가정, 그리고 세포 3 파생 기존 선박 벽 paracrine 자극을 통해 주로 중 출생 후의 vasculogenesis, angiogenesis, 또는 arteriogenesis을 용이하게합니다. EPC를 식별하기위한 특별한 표지가 식별하지 않으며, 필드의 현재 상태는 proangiogenic 조혈 줄기 및 전구 세포를 포함한 그 많은 세포 유형을 이해하고, angiogenic 세포, Tie2 + monocytes, 골수양 전구 cel을 순환되었습니다혹시, 종양 관련 macrophages, 그리고 M2 활성화 macrophages는 잠복기 동물 모델 시스템의 다양한 수많은 질병 상태 4, 5의 인간 과목 angiogenic 과정을 자극에 참여합니다. 내피 콜로니 형성 세포 (ECFCs) 강력한 clonal proliferative 가능성 replating시 능력을 형성 보조와 차 식민지, 그리고 immunodeficient 생쥐 6-8로 이식시 생체내 혈관 형성에서 본질적인 능력을 특징으로 희귀 순환 가능한 내피 세포 수 있습니다. ECFCs이 성공적으로 건강한 성인 과목, 건강한 신생아 유아의 탯줄 혈액 (CB), 그리고 수많은 인간의 동맥과 정맥 혈관 6-9의 혈관 벽의 말초 혈액으로부터 격리되어 있지만, CB는 ECFCs 7의 높은 주파수를 보유하고 그 표시 가장 강력한 clonal proliferative 잠재력과 생체내 8, 10-13의 형태로 내구성과 기능성 혈관을. 동안의 유도성인 말초 혈액에서 ECFC 여기서 우리가 파생을위한 방법론을 설명하는, 14, 15를 발표되었으며, 복제, 확장, 그리고 체외에서뿐만 아니라 인간의 탯줄 CB에서 ECFCs의 생체내 특성에 있습니다.
프로토콜
시약 및 솔루션
EMG-2 미디어 (Lonza, 고양이. 번호 CC-3162 EBM-2 기초 미디엄과 EGM-2 SingleQuot 키트 보충, 및 성장 요인을 포함)
EBM-2 (Lonza, 고양이. 번호 CC-3156)는 전체 SingleQuot 키트 보충 및 성장 요인과 보충 (Lonza, 고양이. 번호 CC-4176), 10 % (V / V) 태아 소 혈청 (FBS) 및 1% (V / V) 페니실린 (10,000 U / ml) 쇼핑 / 스트렙토 마이신 (10,000 μg / ml) 쇼핑 / amphotericin (25 μg / ml) 쇼핑. 4 ° C.에서 1 달에 최대 저장 않는 ECFC 문화를 위해 사용하는 것이 좋습니다 EGM-2 볼륨이 500 μl / 잘 24 - 잘 접시를위한 2 개 ML / 음 6 잘 번호판, 5ml/25-cm이 flasks, 10 ml/75-cm이 flasks입니다 달리 프로토콜에 지정.
콜라겐 전 용액
멸균 증류수의 495 ML (0.02 N 최종 농도)에 빙초산 (17.4N)의 0.575 ML을 희석. 0.22-μm의 V....
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토론
putative 내피 전구 세포의 Phenotypic 및 기능적 특성은 clonally하고 순차적으로 다시 도금 문화에 능력이있다 타고난 ECFCs를 파악하고 생체내의 내구성과 기능성 implantable 혈관을 야기할 것이 중요합니다. 인간의 탯줄 혈액은 ECFCs 및 노화 또는 질병 10 이러한 순환 세포 감소의 농도로 풍부합니다. 최근 연구 ECFC은 혈관 상해, 심근 경색, 또는 망막 병증 17-19의 상황에서 혈관 수리 또는 재생에 중요한 역할을 수도하는 것이 좋습니다.
여기서 우리가 파생을위한 간단하고 효율적인 방법을 설명했습니다 복제, 확장, 그리고 체외에서뿐만 아니라 인간의 탯줄 CB에서 ECFCs의 생체내 특성에 있습니다. 이러한 접근법은 연구자들이 clonal proliferative 잠재력과을 갖춘 CB로부터 타고난 EPCs를 식별하고 분리 수 있도록 <.......
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공개 사항
관심의 어떠한 충돌 선언 없습니다.
감사의 글
박사 Yoder는 EndGenitor 기술 주식 회사에 컨설턴트와 Rimedion 테크놀로지 주식 회사의 이사회의 구성원입니다
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 시약의 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | |
| 헤파린 나트륨 주입, USP | APP 제약 | 504,031 | |
| Ficoll-Pague | Amersham Biosciences | 17-1440-03 | |
| 혼합 정맥 | Maersk 의료 | 500.11.012 | |
| EGM-2 | Lonza | CC-3162 | |
| 정의 FBS | Hyclone | SH30070.03 | |
| TrypLE 급행 | Gibco | 12,605 | |
| 쥐 종류 나 콜라겐 | BD Biosciences | 354,236 | |
| Matrigel | BD Biosciences | 356,234 | |
| FcR 블록 | Miltenyi 생명 공학 | 130-059-901 | |
| hCD31, FITC conjuga널어서 말리다 | BD Pharmingen | 555,445 | |
| hCD45, FITC 복합 | BD Pharmingen | 555,482 | |
| 복합 hCD14, FITC | BD Pharmingen | 555,397 | |
| hCD144, PE 복합 | eBioscience | 12-1449-80 | |
| hCD146, PE 복합 | BD Pharmingen | 550,315 | |
| hCD105, PE 복합 | Invitrogen | MHCD10504 | |
| MS IgG 1, K 항체, 복합 FITC | BD Pharmingen | 555,748 | |
| MS IgG 1, K 항체, 복합 체육 | BD Pharmingen | 559,320 | |
| MS IgG 2A, K 항체, 복합 FITC | BD Pharmingen | 555,573 | |
| 안티 인간 CD31 | Dako | 클론 JC70 / | |
| 안티 mous전자 CD31 | BD Pharmingen | 553,370 | |
| 0.22-μm의 진공 여과 시스템 | Millipore | SCGPU05RE | |
| 빙초산, 17.4N | 어부 | A38-500 | |
| 항생제 - Antimycotic | Invitrogen | 15240-062 | |
| 태아 소 혈청 (FBS) | Hyclone | SH30070.03 | |
| IHC 아연 정착액 | BD Biosciences | 550,523 | |
| Sytox 녹색 시약 | Invitrogen | S33025 | |
| 멸균 복제 실린더, | 피셔 과학 | 07-907-10 |
참고문헌
- Carmeliet, P., Jain, R. K. Molecular mechanisms and clinical applications of angiogenesis. Nature. 473, 298-307 (2011).
- Asahara, T. Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis. Science. 275, 964-967 (1997).
- Urbich, C., Dimmeler, S.
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