작은 창자 이식은 되돌릴 장 실패 환자에 대한 인정 치료 옵션이되었습니다. 쥐의 orthotopic 작은 창자 이식 우리의 실험 모델은 장 이식을 복잡하게 기본 immunologic과 염증 프로세스를 처리 할 수있는 신뢰할 수있는 도구로 제공하고 있습니다.
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방법 논문
쥐 Orthotopic 작은 창자 이식
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
작은 창자 이식은 비경 영양 짧은 창자 증후군과 실패 (돌이킬 수없는 장 실패) 환자에 대한 임상 승인 옵션이되고 있습니다. 전문 센터에서 수술을 향상과 생활 1,3의 높은 품질을 제공하는 동시에 관리 전략은 우수한 단기 및 중간 기간 환자와 이식 생존으로 이어 왔습니다. 다른 고체 기관의보다 일반적인 이식과 달리 (예 : 심장, 간) 장 이식에 의해 유도 그라프 트 기능과 immunologic의 변경의 여러 기본 메커니즘은 완전히 알려져 6,7 없습니다. 급성 거부, 패혈증 및 만성 이식 실패의 에피소드는 아직 덜 유리한 장기 성과에 기여하고 잠재적으로 이러한 이식의 혜택을받을 수 집 비경 영양에 대한 환자의 증가에도 불구하고 절차의보다 광범위한 고용을 방해 주요 장애물입니다. 소장을 포함여객 leucocytes의 큰 숫자가 일반적으로 내장 관련된 림프 시스템 (갈트) 장 이식의 높은 immunogenity 이유의이되는 부분의 일부라고. 이식 점막 무결성 (거절의 예를 들어) 손상되면 존재 속에서 많은 commensals과 병원균의 근접 패혈증 에피소드의 심각도를 설명합니다. 안정적이고 실현 가능한 동물 모델에서 생성 된 더 많은 장 및 multiorgan 이식 데이터의 필드를 이동하는 것은 필요합니다. 모델은 여기에 한 번 표준화 된 방식으로 설립 신뢰성과 타당성을 모두 결합하여 장 이식에 의해 실행되는 기본 복잡한 분자, 세포 및 기능 메커니즘에 중요한 통찰력을 제시 할 수 있습니다 제공됩니다. 우리는 성공적으로 우리의 실험실 8-11에서 5 년 이상 동안 사용 설명 절차를 수정했습니다. 주피터 동영상 기반 형식은 복잡한 proce을 설명 할 때 특히 유용합니다dure 및 장 이식을 조사 orthotopic 쥐 모델을 구축 할 계획 그룹에 대한 초기 함정을 피하십시오.
프로토콜
1. 기부자 운영
- 기증 쥐 24 시간 (물 / 혈당 솔루션을 무료로 이용하실 수)에 금식 보관해야합니다.
- Isoflurane 흡입 마취를 유도하기 위해 표준 분무기에 2 %로 시작하고 개복술을 수행 한 후 1 % 줄일 수 있습니다. 진정 작용을 확인 발가락 핀치을 수행합니다.
- 복부를 면도하고 피부 시험을 치루 3 회 (Kodan)로 청소하십시오. 그런 다음 진통제의 피하 투여 후 중간 절개를 수행합니다.
- 이식은 생리 불린 거즈에 싸서되면 췌장 및 Q-팁 (6x 확대와 함께 수술 현미경)을 부드럽게 오름 콜론 사이의 생리 adhesions를 구분합니다.
- Ligate와 7-0 실크를 사용하여 ileocecal & 중간 & 오른쪽 복통 혈관을 나눕니다. 오름 콜론은 장간막 정맥의 오른쪽 (SMV)에 퍼져 후, ileocecal 오른쪽 중간 잘록 창자 선박은 7-0 관계를 사용하여 결합 및 분할에 대한 식별 할 수 있습니다.
- 전체 SMV는 정리와 노출되어 있도록 위쪽으로 배를 철회. 철회를위한 모기 겸자를 사용하십시오. 클램프는 필요에 따라 모양으로 형성 plasticine 질량에 의해 개최됩니다.
- Ligate와 SMV에서 오는 pancreatico - 십이지장 정맥을 나....
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결과
일반 수술 과정
이식 동물은 약 1 시간에 대한 열 램프 아래의 절차에서 신속하게 복구해야합니다. 저체온은 수술 사망률의 주요 원인이며, 신중하게 내부 및 postoperatively 피해야한다. Intraoperative 유체 손실 2.5 ML 정상적인 생리의 SC 주입 플러스 2.5 ML 포도당 5퍼센트 첫 24 시간마다 8 시간으로 대체해야합니다. 쥐도 postoperatively 첫 24 시간에 포도당 용액 (또는 겔 다이어트)와 물 PO를 무료로 이용하실 수 있습니다해야합니다. 이 기간 후에는 표준 쥐 수유와 물 광고 libitum에 무료로 액세스 할 수있는 정상적인 먹이 동작을 다시해야합니다. 통증은 마취 유도에서 관리 할 첫 번째 샷과 함께 3 일 동안 carprofen 5 밀리그램 / kg SC 매일의 관리에 의해 제어됩니다. Perioperative 항생제 예방은 allogenic 설정에 필요한 있으며, 5~7일 (암피실린 15 밀리그램 / kg SC, .......
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토론
쥐의 장 이식 모델 1970ies 5로 일찍 설명되어 있지만 최근 고용 모델의 대부분은 다른 기술이 13을 사용하여 heterotopic 장 이식을 포함한다. 일반적으로 heterotopic 절차를 쉽게 microsurgical 기법과 평가를위한 이식을보다 쉽게 접근 할 수있는 장점을 가지고 있지만, heterotopic 장 이식이 계정에 이식 된 작은 창자의 여러 상호 작용과 수축 활동 등의 기능 측면을 복용하지의 가장 큰 단점을 가지고 있으며 commensals과 병원균의 광대 한 호스트의 맥락에서 orthotopic 이식을 특징 점막 장벽 기능. 우리 그룹이 여기에 설명 orthotopic 모델 및 결과를 갖춘 넓은 경험을 쌓았습니다하면 염증과 적응 면역 반응에 의해 발생하는 특정 변경의 많은 기능 프로와 함께 맥락에서 평가되어야하는 것이 좋습니다수축성 및 점막 무결성과 같은 이식 작은 변의 perties. 참고 여기 사용 된 anastomotic 기술은 절차를 촉진하고 특히 m.......
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공개 사항
관심 없음 충돌이 선언 없습니다.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 시약의 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 코멘트 (선택 사항) |
| 위스콘신 대학 (UW) 솔루션 (ViaSpan) | 브리스톨 - 마이어스 Squibb | ||
| Uro-Nebacetin N 솔루션 | Nycomed | 6967855 | |
| 암피실린 | Ratiopharm | ||
| Carprofen (Rimadyl) | 화이자 | ||
| Prolene 10-0 unresorbable 봉합 | Ethicon | ||
| Monocryl 6-0 resorbable 봉합 | Ethicon | ||
| Vicryl 3-0 resorbable 봉합 | Ethicon | ||
| IV 카테터 G 20 1.1x33 mm | 브라운 | ||
| IV 카테터 G 22 0.9x25 mm | 브라운 | ||
| Kodan 피부 준비 | Schülke | ||
| NaCl 0.9 % 주입 솔루션 | 브라운 | ||
| 구부러진 집게 작은 | FineScienceTools | 11009-13 | |
| 마이크로 포셉가 휘어 | AESCULAP | BD 333 | |
| 마이크로 포셉가 휘어 | AESCULAP | FD281R | |
| 마이크로는 곧바로 1 포셉 | WPI | 5 | |
| 마이크로는 곧바로 두 집게 | WPI | 이 | |
| 마이크로 니들 홀더 | WPI | 14,081 | |
| 마이크로 가위 | FineScienceTools | 15006-09 | |
| 마이크로 메스 | 마니 | 안과 칼 | |
| 마이크로 클램프 | AESCULAP | FB329R |
참고문헌
- Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
- Berney, T., et al.
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재인쇄 및 허가
