Journal of Visualized Experiments(JoVE) 3월호는 초파리의 운동 행동을 측정하기 위해 근본적으로 중요한 세 가지 분석법에 초점을 맞춘 기사로 시작합니다. 구체적으로, 이러한 분석에는 유충 크롤링 분석(유충 운동 기능), RING 분석(성체 운동 기능) 및 구애 분석(조정 및 감각 능력 평가)이 포함됩니다.
유충 크롤링 분석은 유충을 수집하고 어린 파리를 관심 있는 실험용 약물에 노출시키는 것을 포함합니다. 그런 다음 동물을 그래프 종이 위에 놓인 페트리 접시로 옮기고 분당 교차하는 격자선의 수를 계산할 수 있습니다.
RING(Rapid Iterative Negative Geotaxis) 프로토콜은 성충 파리를 특수 바이알에 넣고 부드럽게 두드려 바닥으로 밀어 넣는 것입니다. 초파리는 본능적으로 중력을 거슬러 위로 기어 올라갑니다. 이미지 분석을 통해 파리가 짧은 시간에 얼마나 위로 올라갈 수 있는지 측정하여 성인 운동 능력의 정도를 결정할 수 있습니다.
좀 더 복잡한 감각 유도 행동을 평가하기 위해, 구애 분석법이 사용되며, 성적으로 순진한 수컷과 암컷을 짝짓기 바퀴로 알려진 특수 장치에 넣는 것으로 시작합니다. 실험 세션 동안 조사관은 수컷 파리가 몇 가지 특징적인 구애 행동을 보이는 시간을 기록합니다. 인상적이게도, 수컷 파리는 몇 분 안에 암컷을 향해 방향을 잡고, 암컷의 복부를 두드리고, 날개로 노래를 부르고, 암컷을 핥고, 결국 교미를 할 것입니다.
종합하면, 이러한 분석은 초파리 행동에 기여하는 유전적 및 환경적 요인을 밝히는 데 도움이 될 수 있는 일련의 강력한 행동 테스트를 나타냅니다.
그 달 말, JoVE는 운동 생리학으로 초점을 옮겨 상파울루 대학의 연구자들이 스포츠와 같은 복잡한 운동에 대한 다양한 에너지 시스템의 기여도를 밝히기 위해 고안된 방법을 제시합니다. 예를 들어, 우리 저자는 시연을 위해 유도를 선택했습니다. 조심스럽게 배치된 휴대용 가스 분석기를 사용하여 통제된 조건에서 유도 운동 중 산소 소비량을 측정할 수 있습니다. 운동 전, 운동 중, 운동 후의 산소 소비량을 비교하여 유산소 및 알칼리성 무산소 대사의 에너지 기여도를 결정할 수 있습니다. 운동 전후에 채혈한 후 전기화학적 분석을 통해 유도 스포츠에 대한 젖산 혐기성 대사의 에너지 기여도를 결정합니다. 산소 소비량과 혈장 젖산 농도 데이터를 결합하면 좋아하는 유도 던지기와 같은 복잡한 운동의 특정 측면에 대한 다양한 에너지 시스템의 상대적 기여도를 결정하는 데 사용할 수 있습니다.
또한 3월에 JoVE는 제브라피시의 알코올 노출과 관련된 발달 연구를 발표할 계획입니다. 배아가 원하는 시점으로 발달하면 알코올 노출이 유전자 발현에 미치는 영향은 mRNA를 정제하고 qPCR을 수행하며 전체 마운트 현장 교잡화를 통해 평가할 수 있습니다. 광학 현미경을 사용하여 솜뚱 모양과 같은 형태학적 변화도 평가할 수 있습니다. 관심 유전자가 에탄올 노출에 의해 감소하거나 증가하는 것이 관찰되는 경우, 알코올 유도 표현형을 구하기 위해 capped mRNA 또는 morpholino를 2세포 단계 부근의 배아에 주입할 수 있습니다. 저자들은 발달 중인 제브라피시의 알코올 노출이 포유류에서 관찰된 것과 유사한 형태학적 표현형 및 유전자 발현 프로파일을 생성한다는 것을 보여주며, mRNA 주입이 발달 이상에 대한 알코올의 영향을 역전시킬 수 있음을 보여줍니다.
에서 JoVE는 UC 리버사이드의 식물 기생충학 실험을 제시합니다. 특히, 우리 저자는 뿌리혹 선충 - 젖은 토양을 통해 자유롭게 이동하여 식물의 뿌리를 감염시키고 먹이를 먹는 절대 식물 기생충입니다. 먼저, 감염된 식물을 처리하고 뿌리혹 선충을 채취하는 방법을 설명합니다. 어린 기생충이 감염력이 높은 단계로 발달하면 토양에 접종할 수 있습니다. 나중에, 뿌리를 염색하고 이러한 기생충에 의해 생성된 특징적인 뿌리 매듭의 존재 여부를 평가할 수 있습니다. 화분에 심은 식물에 대한 실험 외에도, 저자들은 투명한 주머니에서 자란 식물로 뿌리혹 분석을 수행하여 뿌리를 쉽게 볼 수 있도록 하고, 매년 전 세계 작물 손실의 5%를 차지하는 이 파괴적인 감염의 존재에 대한 높은 처리량 스크리닝을 용이하게 하는 방법을 보여줍니다.
3월 JoVE의 콘텐츠에 대한 이 요약은 해당 달에 출시 예정인 50개 이상의 기사 중 4개를 강조합니다. 다른 주목할 만한 실험으로는 초파리의 안테나에서 냄새를 유발하는 반응을 영상화하는 방법, 전자 코를 사용하여 과일의 휘발성 화합물을 분석하는 방법, 거대분자를 살아 있는 세포로 전달하기 위해 일반 사무 장비를 용도 변경하는 방법 등이 있습니다.