우리는 대식 세포 MR 영상이 허용 정화조 관절염의 초소형 초상 자성 조영제 (USPIO)를 사용하여 수행하는 방법을 보여주는 초기 및 종 생체 내 비 침습 평가.
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이 논문에서
요약
초록
대식 세포 개시, 개발 및 세균 감염에 대한 염증 반응의 조절에 중요한 세포입니다. 대식 세포가 집중적으로 점점 감염의 초기 단계에서 패혈증 관절 모집 및 침투는 병원체의 효율적인 제거가 얻어지면 퇴보 할 예정이다. 치료 급성 활막염 및 모니터링의 조기 발견 : 감염된 관절의 생체 내 대 식세포의 활동에 식별하는 능력은 따라서 두 가지 애플리케이션을 제공 할 수 있습니다.
생체 내에서 대 식세포의 비 침습적 검출 등의 초소형 초상 자성 산화철 (USPIO) 등의 철 나노 입자를 사용하여 자기 공명 영상을 수행 할 수 있습니다. 혈관이나 관절 투여 후, USPIO는 특히 자신의 자기 적 특성에 의해 활성화 된 대 식세포, 그리고에 의해 phagocytized하는, 대식 세포 침투를 제시 조직의 신호 변화를 유도. quantitativ입자 분사 조직 내 철의 양의 상관 관계가 있으므로 USPIO로드 셀의 수를 반영 한 후 신호 손실 영역 (어두운 픽셀 수)가 경사 에코 자기 공명 영상에서 관찰로 침투의 전자 평가는 가능합니다.
우리는 수, 패혈증 성 관절염의 동물 모델에서 USPIO 강화 MR 영상을 사용하여 대식 세포 이미징을 수행하기 위해 여기 프로토콜을 제시한다 대식 세포 침투 및 치료 활동의 평가의 생체 내 비침 평가에서 초기 및 종.
서론
자기 공명 영상 (MRI)은 높은 공간 해상도와 부드러운 조직 대조에 의한 감염성 활막염의 데모에 대한 선택의 이미징 양상으로 간주됩니다. 혈관 확장 및 혈관 신생 1 증가 혈류의 때문에의 조직 학적 연구 결과와 일치 관절염 낮은 T1과 세포 외 수분 함량의 증가 존재를 반영하는 높은 T2 신호 및 가돌리늄 기반 대비 에이전트 투여 후 표시된 충실 MRI에서 관찰 된 신호 변화. 그럼에도 불구하고, MRI는 종종 지속적인 개선이 확대 세포 공간의 지속성 (육아 조직, 섬유 성 흉터) 2에 의한 임상 적 및 생물학적 치유 혈성 관절염 환자의 관절에서 관찰 할 수있는 항생제 치료시 감염의 해상도를 입증 할 수 없습니다. 세포 변화 외에, 대 식세포의 강렬한 모집 등의 염증 세포가 대량으로 침투관절 활액을 fected. 대식 세포가 세균 감염 3의 급성 및 만성 단계 모두에서 중요한 역할을한다. 대식 세포에 의한 염증이 4 시작 복구를 방지만큼 괴사 조직을 제거하지 않기 때문에 지속으로 그들은 병원성 미생물을 근절하는 데 필요한 염증 반응을 유도하고 염증 해상도를 조정. 따라서, 효율적인 치료 후 감염된 관절 활액 내의 대 식세포 침윤의 감소는 감염의 해상도의 신뢰할 수있는 지표가 될 수 있습니다. 세포 이미징 병리 ....
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프로토콜
동물 주제와 관련된 모든 절차는 대학 병원 기관 동물 관리위원회에 의해 승인되었습니다.
1. 관절 세균 접종
- 주입하기 전에, 건설자 Spinae 근육 내 xylazine (4 ㎎ / ㎏)와 혼합 마취제의 근육 주사 (30 ㎎ / 체중 kg)에 의해 토끼를 마취. 동물들이 발 핀치에 응답하지 않는 것을 확인하여 완전히 마취되어 있는지 확인합니다. 이 프로토콜은 무릎 관절의 관절 주사에 대한 충분한 마취를 제공합니다. 마취 중에 산소 마스크에서 동물을 놓습니다.
- 동물의 무릎을 면도. 포비돈 - 요오드 용액의 응용 프로그램에서 다음 포비돈 - 요오드 스크럽과 알코올 3 교대 잎사귀에 의해 무균 주입 무릎을 준비합니다.
- 수동과 같이 멸균 바늘 모자 또는 멸균 프로브를 사용하여 무릎의 전방 측면에서 탄성 구조로 슬개골 건을 식별합니다. 시각적 컨트롤을하고 전방 접근법을 사용하여, 슬개골 건을 통해 12 토끼의 각각의 오른쪽 무릎에 경피적 25 G 바늘을 배치합니다.
- 10 6의 농도 UFC / ㎖에서 황색 포도상 구균의 세균 현탁액 (노이만 변형) 1 ㎖와 각 무릎을 주입. 저항없이 주사 바늘의 끝의 관절 위치를 확인합니다.
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결과
unenhanced 이미지에 감염된 무릎의 활막은 대퇴골과 슬개골이 낮은 신호 구조 (그림 1)로 표시하면서 부드러운 조직을 둘러싼 구별 비입니다 중간 신호의 확산 붓기를 제공합니다.
USPIO 향상된 이미지에서 조영제 투여 후 24 시간, USPIO로드 대식 세포를 포함하는 활액 영역 신호 손실 (그림 1 및 2)를 보여줍니다.
활막 내 대 식세포의 침윤는 특정 면역 염색 (그림 3)를 사용하여 설명 할 수 있습니다. 얼룩 Perls '러시안 블루는 파란색 점 (그림 4)로 표시 철 입자를 감지 할 수 있습니다.
| GRE T2는 가중치 |
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토론
특이 가돌리늄 기반 대비 요원은 세포 공간의 볼륨과 관류에 대한 정보를 제공하는 반면, USPIO 강화 된 MR에 의해 대식 세포 이미징은 조직 표본 9의 필요없이 정확한 해부학 적 지역화 및 감염 활막 내 대 식세포의 침윤의 질적 평가를 할 수 있습니다. 자신의 높은 감도 때문에, USPIO도 미묘한 세포는 감염의 초기 단계에 존재 침투 입증 할 수 있습니다. 병원균이 점진적으로 제거 할 때 성공적으로 항생제 치료에서이 침투은 활막 내 USPIO 섭취의 감소로 이어지는, 감소하는 것으로 간주됩니다. 어두운 신호의 영역이 tissular 철분 상관 관계되기 때문에, USPIO 투여 후 활액 신호 바이오 마커, 세로 평가 10 할 수 세포 침윤의 정량적 인 표현으로 간주 될 수 있습니다. 또한, 그리고 OPT와 같은 다른 영상 기법과 달리iCal의 영상이나 동위 원소 이미징, 세포 MR 영상은 세포 관련 신호 변화의 정확한 현지화를 허용 고해상도 해부학 적 이미지를 생성 할 수있는 능력을 .......
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공개 사항
저자는 공개 아무것도 없어.
감사의 글
우리는 진심으로 비디오 제작 및 편집에 도움 F. Bierry 감사합니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 시약/재료 | 회사 | 카탈로그 번호 | 코멘트 |
| P904 | Guerbet | 용량: 150 μ mol Fe / kg | |
| 케타민 (500 mg / ml 케타민) | Virbac | 용량 : 30 mg / kg | |
| Rompun (20 mg / ml 자일라진) | Axience | 용량 : 4 mg / kg | |
| 부프레노르핀 | 베토퀴놀 | 용량 : 0.1 mg / kg / 8 hr | |
| BD 22 G, 1 인치 | BD Biosciences | 381423 | |
| BD 25 G, 5/8 인치 | BD Biosciences | 305122 |
참고문헌
- Madri, J. Inflammation and healing. Anderson's Pathology. Kissane, J. , 67-110 (1990).
- Sephel, G., Woodward, S. Repair, regeneration, and fibrosis. Rubin's Pathology. Rubin, R., Strayer, D. , 5th ed, Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia, PA. 71-98 (2008).
- Verdrengh, M., Tarkowski, A.
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재인쇄 및 허가
