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방법 논문

비주얼 결함의 특성을 만성 안구 고혈압의 레이저 유도 마우스 모델

12.8K 조회수

DOI:

10.3791/50440

2013년 8월 14일

이 논문에서

요약

만성 안구 고혈압 쥐의 눈 섬유주 레이저 광응고술을 사용하여 유도된다. 안압 (IOP)는 레이저 치료 후 몇 개월 동안 상승합니다. 시력 실험 동물의 대비 감도의 감소는 optomotor 테스트를 사용하여 모니터링 할 수 있습니다.

초록

자주 높은 안압 (IOP)와 관련된 녹내장은 실명의 주요 원인 중 하나입니다. 우리는 인간의 높은 안압 녹내장을 모방하는 안구 고혈압의 마우스 모델을 구축하기 위해 노력했다. 여기에 레이저 조명은 각 폐쇄를 유도 수성 유출 photocoagulate하기 위해 각막 윤부에 적용됩니다. IOP의 변화는 레이저 치료 전후 리바운드 안압계를 사용하여 모니터링 할 수 있습니다. optomotor 행동 테스트는 Visual 용량의 해당 변화를 측정하는 데 사용됩니다. 레이저 조명 후 지속적인 안압 상승을 개발 한 마우스에서 대표적인 결과가 표시됩니다. 시력 저하 및 대비 감도는이 안구 고혈압 쥐에서 관찰된다. 함께, 우리의 연구는 녹내장 쥐에서 신경 세포의 변성 및 기본 분자 메커니즘을 조사하기 위해 중요한 모델 시스템을 소개합니다.

프로토콜

절차

C57BL/6J 마우스 (잭슨 연구소, 바 하버, 메인)은 노스 웨스턴 대학교의 동물 관리 시설에서 발생합니다. 모든 동물은 노스 웨스턴 대학 기관 애니멀 케어 및 사용위원회와 NIH에서 신경 과학 연구에서 동물의 사용에 대한 지침을 따른다 승인 프로토콜에 따라 사용됩니다.

1. 레이저 광응고술

레이저 광응고술의 절차는 5-7 이전에 발행 된 프로토콜에서 수정됩니다.

  1. 케타민 (100 ㎎ / ㎏, 버틀러 Schein의 동물 건강, OH)과 xylazine (아이오와, 셰넌 도어의 10 ㎎ / ㎏, 로이드 주식, IA)의 복강 주사로 40 ~ 60 일 이전 마우스를 마취.
  2. 1 % 아트로핀 황산염 솔루션의 하나 또는 두 방울 (알콘 연구소, 주식 회사, 포트 워스, 텍사스)와 국소 치료로 실험 동물의 오른쪽 눈의 동공을 팽창.
  3. 산동 후, 평평하게nterior 챔버 레이저 유도는 6 강화한다. 전방 액을 배출 슬릿 램프 아래 전방 공간 (SL-3E, 탑콘, 오클랜드, NJ)에 예리한 끝 (세계 정밀 계측기 Inc의 새러 소타, 플로리다)와 유리 마이크....

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결과

절차에서 설명한대로, 레이저 조명은 폐쇄 각 (그림 1)을 유도, 수성 유출 photocoagulate하는 각막 윤부 지역에서 섬유주위한 것입니다. 대부분의 레이저로 눈 앞의 연구 결과 6 일치 유의 물리적 손상, 색소 분리 또는 감염을 전시하지 않습니다. 쥐의 작은 그룹 (모든 레이저로 동물의 5 % 미만)은 수축 눈 공, 심한 백내장, 중요한 색소 분리, 또는 출혈 등 심각한 손상의 물리적 흔적을 전시 할 때, 우리는 즉시 그들에게 안락사. 레이저로 눈의 약 30 %는 사소한 각막 흉터를 개발, 대부분는 1-2 주 레이저 치료 후 내 회복.

우리는 이상의 백 쥐에서 거의 모든 레이저 치료 눈 높은 안압을 발견했다. 실험 동물의 IOP는 리바운드 안압계 (그림 2)를 사용하여 모니터링합니다. 그림 2B는 I의 변화의 한 예를 보여줍니다레이저 치료 전후 OP. 15........

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토론

우리가 지속적인 안압 위의 보고서는 마우스 눈에서 레이저 조명에 의해 유도 될 수있다. 식염수 주입 모델 18 정맥 소작 모델 광범위한 미세 기술을 필요로 둘 다 11에 비해, 레이저 조명 수행 할 비교적 간단하고 쉽습니다. 보통 우리는 2-3 시간에서 4-6 생쥐 레이저 조명을 수행 할 수 있습니다. 지속적인 안압 상승을 달성하기 위해 중요한 단계 레이저 조명 레이저 매개 변수 앞에 납작 전방이다. 섬유주 영역에 레이저를 대상으로 근처 모양체 혈관 6 부상을 최소화하기 위해 촉진 전방 액을 배출. 레이저의 종류도보고되고있다, 예를 들어, 일부 연구는 각막 등록에 섬유주 및 상공 막 정맥을 대상으로 810 nm의 에너지 펄스 7를 사용하여 532 nm의 5,6과 다른 파장의 다이오드 레이저를 사용하여이온. 각 피해를 극대화하기 위해, 우리는 5-7 이전에보고 된 레이저 모델에 비해 레이저 반점의 수를 증가하고있.......

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공개 사항

저자는 그들이 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

저자는 노스 웨스턴 대학의 풀 타임 직원입니다.

저자는이 문서에 사용 된 시약 및 장비를 생산하는 업체가 제공 한 어떠한 자금을받지 않았다.

감사의 글

이 문서에 포함 된 작품은 미국의 건강 보조 재단 (XL), 실명을 방지하기 위해 연구에서 윌리엄 & 메리 그레베 특별 장학생 수상 (XL)에서 녹내장 연구 박사 더글러스 H. 존슨 수상에 의해 지원되었다 실명 예방 일리노이 학회 (HC)와 NIH 부여 R01EY019034 (XL).

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
시약
moxifloxacinAlcon Labs, Inc.NDC 0065-4013-030.5 %, Rx 전용
Proparacaine HydrochlorideBausch LombNDC 24208-730-060.5 %, Rx 전용
안과 용액 USPBausch LombNDC 24208-730-06.5%, Rx 전용
케타민Butler Schein Animal HealthNDC 11695-0550-1100 mg / kg
NADA 139-23610 mg / kg
의 자일라진 LLOYD Inc.아트로핀 황산염 솔루션Alcon Labs, Inc.NDC 61314-303-021 %, Rx 전용
장비
Slit Lamp, TOPCON Visual Systems IncSL-3Epowered by PS-30A
OptoMotry 1.8.0 virtualCerebralMechanics Inc.
광역학 테스트 시스템CerebralMechanics Inc.
Tonometer, TonoLab, 마우스 용Colonial Medical Supply
Heating padSunbeam Products Inc722-810
Argon laser Coherent IncUltima 2000SE
DECAPICONE 플라스틱 콘 홀더 Braintree Sci Inc.마우스용MDC-200
아이오와

참고문헌

  1. Gupta, N., Yucel, Y. H. Glaucoma as a neurodegenerative disease. Curr. Opin. Ophthalmol. 18, 110-114 (2007).
  2. Quigley, H. A. Neuronal death in glaucoma. Prog. Retin. Eye Res. 18, 39-57 (1999).
  3. McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W.

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재인쇄 및 허가

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