이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.

방법 논문

심근 미세 구조의 초음파 평가

5.3K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/50850

⸱

2014년 1월 14일

 ,  ,  ,  ,  , 

이 논문에서

요약

에코카르디오그래피는 일반적으로 비침습적으로 심장 구조와 기능의 변화를 특성화하고 정량화하는 데 사용됩니다. 당사는 심근 미세 구조의 향상된 대리 측정을 제공하고 오픈 액세스 이미지 분석 소프트웨어를 사용하여 수행 할 수있는 초음파 기반 이미징 알고리즘을 설명합니다.

초록

에코카르디오그래피는 일반적으로 비침습적으로 심장 구조와 기능의 변화를 특성화하고 정량화하는 데 사용되는 널리 접근 가능한 이미징 양식입니다. 심장 조직의 초음파 평가는 관심의 주어진 지역 내에서 백스캐터 신호 강도의 분석을 포함 할 수 있습니다. 이전에 확립된 기술은 주로 백스캐터 신호 강도의 통합 또는 평균 값에 의존해 왔으며, 이는 순환 변동에 기초한 알고리즘에 대한 낮은 프레임 속도 및 시간 지연에서 별칭 데이터로부터 가변성에 취약할 수 있습니다. 본 명세서에서, 우리는 이전 방법으로부터 확장되는 초음파 기반 이미징 알고리즘을 설명하고, 단일 이미지 프레임에 적용될 수 있으며 주어진 심근 샘플로부터 유래된 신호 강도 값의 전체 분포를 설명한다. 대표적인 마우스 및 인간 이미징 데이터에 적용하면 알고리즘은 만성 후하중 저항에 노출되지 않고 피사체를 구별합니다. 이 알고리즘은 심근 미세 구조의 향상된 대리 측정을 제공하며 개방형 이미지 분석 소프트웨어를 사용하여 수행할 수 있습니다.

서론

에코카르디오그래피는 일반적으로 비침습적으로 심장 구조와 기능의 변화를 특성화하고 정량화하는 데 사용되는 널리 접근 가능한 이미징 양식입니다. 심장 조직의 초음파 평가는 한 번에 관심의 주어진 영역 내에서 백스캐터 신호 강도의 분석을 포함 할 수 있습니다, 뿐만 아니라 심장 주기의 과정을 통해. 이전 연구는 초음파 신호 강도의 측정이 심근 섬유 혼란의 근본적인 존재를 식별 할 수 있음을 제안했다, 생존 대 실행 가능한 심근 조직, 및 간질 섬유증1-3. 우리는 심근 '미세 구조'를 총 크기와 형태학의 선형 측정을 넘어 초음파 분석을 사용하여 특성화 할 수있는 조직 아키텍처로 지칭합니다. 이에 따라, 초음파 신호 강도의 분석은 비대및 확장된 심근병증4,5,만성 관상동맥질환6,7,고혈압 심장질환8,9의설정에서 심근 조직의 미세구조적 변화를 평가하는 데 사용되어 왔다. 그러나, 이전에 확립된 기술은 백스캐터 신호 강도의 통합 또는 평균 값에 주로 의존해 왔으며, 이는 랜덤 노이즈5,낮은 프레임속도(10)의별칭 데이터, 순환변동(11)에기초한 알고리즘에 대한 시간 지연으로부터의 가변성에 취약할 수 있다.

본명, 이전 방법으로부터 확장되는 초음파 기반 이미지 분석 알고리즘을 사용하는 방법을 설명한다. 이 알고리즘은 이미지 분석을 위한 단일 종횡확장프레임에 중점을 두고 주어진 심근 샘플에서 파생된 신호 강도 값의 전체 분포를 설명합니다. 심낭을 인프레임 참조12,13으로사용하여, 알고리즘은 초음파 신호 강도 분포의 변동을 재재현하고 심근 미세 구조의 향상된 대리 측정을 제공한다. 단계별 프로토콜에서는 사용하기 위한 이미지 준비, 관심 영역 샘플링 및 관심 있는 영역 내에서 데이터를 처리하는 방법을 설명합니다. 우리는 또한 좌심실에 후부하 응력에 가변 노출을 가진 마우스와 인간에게서 취득한 심초음파 심초음파 심상에 알고리즘을 적용에서 대표적인 결과를 보여줍니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

1. 분석을 위한 이미지 준비

  1. 무두질 긴 축 보기에서 뮤린 또는 인간 심초음파 B 모드 이미지를 가져옵니다. 전송 초점의 시간 이득 보상 설정 및 배치를 조정하여 일반적인 연습에 따라 PARAsternal 보기에서 LV 및 기타 심장 구조의 시각화를 최적화합니다. 모든 이미지가 DICOM 파일 형식으로 저장되었는지 확인합니다. 표준화된 이미지 뷰는 프레임 의 베이스에 열성 좌심실 벽을 배치합니다. 프레임은 왼쪽 심실 심근과 심낭의 전체를 표시해야합니다. 해상도는 왼쪽 심실의 심근 테두리, 심근 벽 및 내내심 테두리를 해비할 만큼 충분히 높아야 합니다. 과도한 중퇴 또는 이미지 아티팩트가 있는 이미지를 삭제합니다.
  2. 이미지를 분석하기 위한 이미지 파일을 이미지J 소프트웨어 플랫폼 v1.46으로 DICOM 파일로 가져옵니다. 파일을 8비트 이미지 파일로 변환합니다.
  3. 적절한 품질 최종 확장기 프레임에 도달 할 때까지 심장 주기의 연속 프레임을 스크롤합니다. 또는 심초음파 보기 프로그램에서 최종 확장기 프레임을 선택한 다음 ImageJ에서 사용할 고해상도 .jpg 파일 형식으로 내보냅니다. 심전도 추적의 R 파를 사용하여 엔드 디아스톨에 가장 가까운 프레임을 식별한 다음 최대 내부 차원으로 LV를 캡처하는 단일 최상의 프레임을 식별합니다. 이 단일 프레임을 최종 확장기 프레임을 고려하십시오.
  4. 관심 있는 지역을 선택할 때 사용자가 피사체 ID에 눈이 멀어질 것을 권장합니다.

2. ROI 샘플링

  1. 심근 참조 선택. 관심의 심근 영역을 선택할 때 (ROI), 심근 조직의 이질성을 캡처하는 것을 목표로. 필요에 따라 분석 결과에 영향을 주지 않으면서 이미지 밝기와 콘트라스트가 필요에 따라 ROI 선택을 위해 조정할 수 있습니다.
    1. ImageJ의 직사각형 드로잉 도구를 사용하여 기저 비열성 심근 벽의 중간 3분의 1을 근사화하는 길이의 사각형을 선택합니다.
    2. 직사각형 ROI의 크기를 조정하여 ROI 크기 조정 도구를 사용하여 심낭의 폭을 가로지르게 합니다.
    3. IMAGEJ의 회전 도구를 사용하여 ROI를 회전하여 심근 영역 내에 놓습니다.
    4. 심근 ROI의 모서리에 필요한 조정을 합니다. 심근 벽의 중간 3분의 1 내에 있는 최종 심근 영역을 캡처하고 심근 또는 심장 외영역으로 확장하지 않고 심근벽의 폭을 포함한다. 주어진 연구에서 이루어진 모든 조치에 대해 동일한 상대 적 위치와 총 심근 영역의 비율을 캡처하는 것을 목표로합니다.
    5. ImageJ 분석 도구를 통해 선택 영역에 알고리즘을 적용합니다(섹션 3 참조).
  2. 심근 선택. 다시 한번, 기저 비열성 심근벽의 중간 3분의 1 내에서 심근 조직의 이질성을 포착하는 것을 목표로 한다. 필요에 따라 분석 결과에 영향을 주지 않으면서 이미지 밝기와 콘트라스트가 필요에 따라 ROI 선택을 위해 조정할 수 있습니다.
    1. 심근 벽의 너비에 걸쳐 있는 사각형을 선택합니다., 심근 및 에피카르듐을 제외. 심근 선택이 심근 선택과 동일한 테타 각도에 인접한지 확인합니다. 선택 영역 내에 유두 근육 영역을 포함하지 마십시오.
    2. 심근 ROI를 회전하여 심근 선택과 평행하게 놓습니다.
    3. 심근 ROI의 모서리에 필요한 조정을 합니다. 심근벽의 3분의 1 에 속하는 최종 심근 영역을 분리하고 심근 또는 내루마 영역으로 확장하지 않고 벽의 폭을 포착합니다.
    4. ImageJ 매크로를 통해 선택 영역에 알고리즘을 적용합니다.

3. 데이터 분석 및 처리

  1. "getTogramValue.txt"라는 ImageJ 매크로를 설치합니다.
  2. ImageJ 히스토그램 분석 도구를 사용하여 ROI 내에서 신호 강도 값의 분포를 미리 봅니다(심근 선택 및 심근 선택에 대해 이 단계를 수행하십시오).
  3. ImageJ 매크로를 사용하여 ROI에 대한 이러한 신호 밀도 값을 기록합니다(심근 선택 및 심근 선택에 대해 이 단계를 수행).
    1. 강도 값을 0(가장 어둡게)에서 255(가장 밝은) 단위로 선택 영역 내의 각 픽셀에 할당합니다.
    2. 강도 값을 강도 증가 순서로 계층적으로 정렬하여 신호 강도의 분포를 생성합니다.
    3. 분포에 대한 다음 백분위수 값을 선택하고 보고합니다: 20번째 백분위수, 50번째 백분위수(중앙값), 및 80번째 백분위수.
  4. 심근 참조를 사용하여 심근 강도를 정규화합니다.
    1. 강도의 심근 백분위수 값을 강도12의해당 심근 백분위수 값으로 나누거나강도(13)의심근 백분위수 값으로부터 강도의 심근 백분위수 값을 공제하여 정규화한다.
    2. 4가지 분석 방법에 대한 값을 보고합니다:20번째 백분위수,50번째 백분위수(중앙값) 및80번째 백분위수 값에 대한 심근-심근-심근 값의 정규화.

4. 주기적 가변성 정량화

  1. DICOM 파일의 연속 프레임을 통해 심근 선택에 알고리즘을 적용하여 심장 주기를 통과합니다. 프레임 간의 강도 분포의 차이를 최종 수축기 및 끝 확장기 프레임에 주의를 기울입니다.
    위에서 설명한 모든 이미지 분석은 이전에 획득하고 디지털 방식으로 DICOM 형식으로 저장되었던 비침습적 심초음파 이미지에서 오프라인으로 수행됩니다. 모든 연구 프로토콜은 브리검 과 여성의 기관 검토 위원회와 하버드 의료 지역 서 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인되었다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

신호 강도 분석은 4개의 주요 단계(도 1)에서 수행된다(그림1)포함: 1) 이미지 선택 및 서식, 2) 샘플링 ROI 및 기준 영역, 3) 알고리즘 응용 프로그램, 및 4) 심근-심근 강도 비율을 산출하기 위해 최종 값을 처리한다. ROI의 선택 및 크기는 인터사용자뿐만 아니라 인트라우더가 변성을 제한하도록 표준화된다(그림2). 각 ROI의 위치는 또한 각 피사체의 해부학 적 구조와 관련하여 표준화되어 주제 간뿐만 아니라 주제 가변성을 제한합니다.

심근 밀도의 척도로서, 알고리즘은 심장 주기 전반에 걸쳐 신호 강도의 변화를 드러낼 것으로 예상되며, 이는 디아스톨에 비해 시스톨의 심근 밀도의 예상 증가에 해당한다. 도 3에도시된 바와 같이, 신호 강도의 높은 백분위수 값은 후하저항에 7주간의 노출없이 마우스의 주기적 가변성을 강조한다(즉, 가짜 수술을 받은 차량 제어 마우스에 비해 상승대동...

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

초음파 신호 강도 분포를 정량화하는 이미지 분석 알고리즘의 프로토콜을 설명하고, 차례로 심근 미세 구조의 대리 측정을 제공합니다. ROI 및 참조 영역의 선택, 크기 조정 및 위치 지정을 포함한 프로토콜의 표준화된 기능은 사용자 및 주체 기반 가변성을 최소화합니다. 우리는 최종 확장기 단일 프레임 심초음파 이미지에 적용 할 때 알고리즘이 적당히 후부하 스트레스에 노출 된 심근과 정상적인 심근을 구별 할 수 있음을 보여줍니다.

이 프로토콜은 오픈 소스 ImageJ 소프트웨어 패키지를 사용하여 알고리즘을 사용하는 방법을 자세히 설명합니다. 이러한 이미지 분석 환경 내에서 알고리즘을 사용하여 주어진 심근 조직 샘플에서 신호 강도 값의 분포에 대한 데이터를 생성할 수 있다. 결과 신호 강도 분포는 히스토그램의 형태로 표시될 수 있다. 심근 선택 내의 강도 값의 히스토그램은 병에 걸린 심근 조직이 비병성 심근에 비해 분포의 올바른 변화와 더 큰 범위의 값을 나타낸다는 것을 보여줍니다. 이...

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

이해 상충이 선언되지 않았습니다.

감사의 글

우리는 하버드 의과 대학 / 브리검 및 여성 병원 심장 혈관 생리학 핵심 연구소에서 제공하는 자원에 감사드립니다. 이 작품은 국립 보건원 보조금 HL088533, HL071775, HL093148 및 HL099073 (RL)의 자금 조달에 의해 부분적으로 지원되었다. MB는 미국 심장협회 창립자 계열사 인후친교상을 수상했다. KU는 미국 심장 협회 설립자 제휴 박사 후 펠로우십 어워드의 수상자입니다. SC는 엘리슨 재단의 상을 받았습니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
ImageJ v 1.46NIH (Bethesda, MD)오픈 액세스 소프트웨어
Power ShowCaseTrillium Technology (Ann Arbor, MI)상용 소프트웨어

참고문헌

  1. Yamada, S., Komuro, K. Integrated backscatter for the assessment of myocardial viability. Curr. Opin. Cardiol. 21, 433-437 (2006).
  2. Mimbs, J. W., O'Donnell, M., Bauwens, D., Miller, J. W., Sobel, B. E. The dependence of ultrasonic attenuation and backscatter on collagen content in dog and rabbit hearts. Circ. Res. 47, 49-58 (1980).
  3. Picano, E., et al. In vivo quantitative ultrasonic evaluation of myocardial fibrosis in humans. Circulation. 81, 58-64 (1990).
  4. Mizuno, R., et al. Myocardial ultrasonic tissue characterization for estimating histological abnormalities in hypertrophic cardiomyopathy: comparison with endomyocardial biopsy findings. Cardiology. 96, 16-23 (2001).
  5. Mizuno, R., Fujimoto, S., Saito, Y., Nakamura, S. Non-invasive quantitation of myocardial fibrosis using combined tissue harmonic imaging and integrated backscatter analysis in dilated cardiomyopathy. Cardiology. 108, 11-17 (2007).
  6. Marini, C., et al. Cyclic variation in myocardial gray level as a marker of viability in man. A videodensitometric study. Eur. Heart. J. 17, 472-479 (1996).
  7. Komuro, K., et al. Sensitive detection of myocardial viability in chronic coronary artery disease by ultrasonic integrated backscatter analysis. J. Am. Soc. Echocardiogr. 18, 26-31 (2005).
  8. Ciulla, M., et al. Echocardiographic patterns of myocardial fibrosis in hypertensive patients: endomyocardial biopsy versus ultrasonic tissue characterization. J. Am. Soc. Echocardiogr. 10, 657-664 (1997).
  9. Maceira, A. M., Barba, J., Varo, N., Beloqui, O., Diez, J. Ultrasonic backscatter and serum marker of cardiac fibrosis in hypertensives. Hypertension. 39, 923-928 (2002).
  10. D'Hooge, J., et al. High frame rate myocardial integrated backscatter. Does this change our understanding of this acoustic parameter. Eur. J. Echocardiogr. 1, 32-41 (2000).
  11. Finch-Johnston, A. E., et al. Cyclic variation of integrated backscatter: dependence of time delay on the echocardiographic view used and the myocardial segment analyzed. J. Am. Soc. Echocardiogr. 13, 9-17 (2000).
  12. Di Bello, V., et al. Increased echodensity of myocardial wall in the diabetic heart: an ultrasound tissue characterization study. J. Am. Coll. Cardiol. 25, 1408-1415 (1995).
  13. Takiuchi, S., et al. Quantitative ultrasonic tissue characterization can identify high-risk atherosclerotic alteration in human carotid arteries. Circulation. 102, 766-770 (2000).
  14. Querejeta, R., et al. Serum carboxy-terminal propeptide of procollagen type I is a marker of myocardial fibrosis in hypertensive heart disease. Circulation. 101, 1729-1735 (2000).

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

더 많은 논문 탐색

심장초음파 분석Image J 소프트웨어신호 강도 분포심근-심낭 비율주기적 변동성 평가만성 후부하 스트레스오픈 액세스 소프트웨어히스토그램 매크로 분석