생체 내에서 신경의 전도 특성의 측정은 신경 근육 질환의 다양한 동물 모델을 특성화 할 수있는 강력한 도구를 예시. 여기서, 우리는 마취 된 쥐의 좌골 신경의 전기 생리 분석이 수행 될 수있는 간단하고 신뢰성있는 프로토콜을 제시한다.
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이 논문에서
요약
초록
전기 생리학 연구는 기본 병태 생리 (1)의 이해, 함께 신경 병리학 기술과, 다양한 신경 근육 질환의 합리적인 분류를 허용하고 도움이됩니다. 여기에서 우리는 생체 내에서 마우스 좌골 신경에 전기 생리학 연구를 수행하는 방법을 설명합니다.
동물 실험군에 진통을 보장하기 위해 이소 플루 란으로 마취 약 30 분 / 동물을 측정하는 동안 작업 환경을 방해받지 않습니다. 37 ° C의 일정한 체온은 가열 플레이트에 의해 유지되고 지속적으로 직장 열 프로브 (2)에 의해 측정된다. 또한, 심전도 (ECG)를 정기적으로 계속해서 조사 동물의 생리 학적 상태를 모니터링하기 위해 측정 중에 기록된다.
전기 생리학 기록은 좌골 신경, 일의 가장 큰 신경에서 수행됩니다행등과 감각 모두 섬유 책자와 마우스의 뒷다리를 공급하는 전자 말초 신경계 (PNS). 우리의 프로토콜에서, 좌골 신경은 현장에 남아 있으므로 추출 또는 노출 할 필요가 없습니다, 실제 녹음과 함께 어떤 불리한 신경 자극없이 측정이 가능. 적절한 바늘 전극 3을 사용하여 우리는 비복근 근육에서 감지 전극과 함께 전송 된 잠재력을 등록, 근위 및 말초 신경 자극을 모두 수행합니다. 데이터 처리, 신뢰성과 신경 전도 속도 (NCV) 및 복합 모터 활동 전위 (CMAP) 고도로 일관된 값, 총 말초 신경 기능의 정량화를위한 주요 파라미터가 달성 될 수 후.
서론
전기 생리학 측정은 임상 및 실험실 환경 모두에서 말초 신경의 기능 무결성을 조사를위한 필수 도구입니다. 인간에서는, 신경근 장애 및 신경 병증의 다수 진단 학적 측정 전기 생리에 의존한다. 전도 속도 또는 신호의 전위 진폭 같이 신경 특성을 측정함으로써, 말초 신경 질환의 거친 원점을 특성화 할 수있다.
신경 전도 속도는 수초에 의해 활성화 빠른 신호 전달에 매우 의존적이다. 따라서 탈수 초성 프로세스는 일반적으로 전도 속도 4 감소합니다. 복합 운동 활동 전위 (CMAP) - 기능 축삭의 수와의 상관 관계는 - 크게 5 감소 축삭 손상에 대한 지표이다.
따라서, 전기 생리 방법에 의한 말초 신경 손상의 병인이러한 유전성 신경 병증 6,7, 당뇨병 성 신경 병증 8,9, 만성 염증성 탈수 초성 다발성 신경 병증 (CIDP) 10, 또는 신진 대사 신경 병증 11로 구별 할 수 있습니다.
일반적으로 인간의 응용 프로그램에서 수랄 또는 척골 신경에 비 침습적 녹음이 바람직하다. 및 행등 및 감각계의 소 구경 축삭 - 생쥐에....
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프로토콜
본 연구는 독일 연방 공화국 (Tierschutzgesetz 데르 Bundesrepublik Deutschland의)의 동물 보호법에 따라 수행하고, 식품 안전과 소비자 보호 (링거 Landesamt FÜR Lebensmittelsicherheit 싶게 Verbraucherschutz)의 튀 링겐 주 사무소에 의해 승인되었습니다.
1. 측정 설정
- 이소 플루 란 / O 2 흡입 쥐를 마취 - 마취 3 %의 개시를 위해, 100 % 산소의 유지 보수 2 % 이소 플루 란 (그림 1)를 참조하십시오. 이러한 운동 반사와 낮은 수준의 통증에 대한 민감도 테스트와 같은 간단한 반사 신경을 테스트하여 충분한 마취를 확인합니다. 절차는 일반적으로 총 약 30 분 / 동물 걸리기 때문에 마취 동안 건조를 방지하기 위해 눈에 연고의 사용을 권장하지만 필수되지 않습니다. 생존 실험의 경우, 수술 후 통증 관리를 위해 적시 이상 작용하는 진통제를 투여.
- 전기 면도기로 두 다리를 덮고있는 털을 면도하고 동물이 마취에서 이미 동안 시중에서 판매하는 제모 크림으로 제모를 수행합니다. 절차를 통해 무균 상태를 유지하기 위해, 무균 장갑을 착용하고 항상 조심스럽게 70 % 에탄올로....
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결과
각 성별의 6 동물 : 우리는이 연구를 위해 총 12 쥐의 좌골 신경에 생체 전기 생리학 일련의 측정을 실시했다. 측정은 제시된 프로토콜을 수행하고 다음과 같은 결과를 제공 하였다 :
둘 다 남성과 여성 마우스는 약 20 M / sec의 평균 좌골 신경의 전도 속도 (그림 5)를 표시합니다. 이 문헌의 다른 측정과 일치한다. 또한, 남성과 여성 사이의 신경 전도 속도에 중요한 차이가 우리의 자료에 따르면이 있는지 보여줍니다.
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토론
설명 프로토콜은 관심의 신경을 노출 할 필요없이 마취 된 쥐의 좌골 신경의 전도 특성을 측정 할 수있는 쉽고 신뢰할 수있는 방법을 제공합니다. 그럼에도 불구하고,이 실험 과정은 바늘 구멍에 의해 조직 손상의 원인이됩니다. 따라서 녹음을 마친 후 동물을 희생 할 수있는 합리적인 선택이 될 것입니다. 그러나, 이전에 녹음 신경의 노출을 필요로하는 다른 추가 침습 절차에 비해 조직 손상은 3,14 비교적 작다. 따라서, 반복 측정이 가능하며, 각각의 연구의 디자인에 따라 달라집니다. 그러나 특정 지점은 일관된 결과를 보장하기 위해 고려되어야한다.
최적 기록 조건을 수행하기 위해서는, 완전한 제모 광범위한 피부 세정에 의해 MEA 중에 적절 저소음 / 오염 허용 모두에게 젤을 사용하여 피부 저항을 감소하는 것이 중요숏.
도 3b에 도시 된 바와 같이 또한, 검출 된 신호의 최적의 이.......
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공개 사항
저자가 공개하는 게 없다.
감사의 글
이 작품은 SFB (604), DFG MO 1421/2-1 및 Krebshilfe 107089 (HM까지)에 의해 지원되었다. 아이들의 종양 재단 (뉴욕, 미국)에서 젊은 연구자 상을받는 사람이 때문이다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 동심 바늘 전극 (자극) | Natus Medical Incorporated, San Carlos, CA, USA | 9013S0901 | |
| 디지털 링 전극 (녹음) | Natus Medical Incorporated, San Carlos, CA, USA | 9013S0302 | |
| ToM - Tower of Measurement (A/D converter) | GJB Datentechnik GmbH, Langewiesen, Germany | ||
| AtisaPro, 데이터 수집 및 분석 소프트웨어 | GJB Datentechnik GmbH, Langewiesen, 독일 | ||
| HSE-Stimulator T | Hugo Sachs Elektronik, Hugstetten, Germany |
참고문헌
- Kimura, J. 3rd ed. Electrodiagnosis in Diseases of Nerve and Muscle. , Oxford University Press. (2001).
- Rutkove, S. B. Effects of temperature on neuromuscular electrophysiology. Muscle Nerve. 24, 867-882 (2001).
- Xia, R. H., Yosef, N., Ubogu, E. E.
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