호흡 장애는 경추 척수 손상 후 사망의 주요 원인이다. 부분 자궁 경부 손상에 의해 유도 된 호흡의, 재생 가능한 정량화하고, 신뢰할 수있는 전임상 동물 모델을 갖는 것은 이후 호흡 및 비 호흡 신경 가소성을 이해하는 데 도움이 및 추정 복구 전략을 테스트 할 수 있습니다.
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이 논문에서
요약
초록
자궁 경부 척수 손상은 영구적 인 마비를 유도하고, 종종 호흡 곤란에 이르게한다. 지금까지, 더 효율적인 치료제가 높은 자궁 경부 척수 손상 (SCI) 다음 호흡 부전을 개선 / 향상을 위해 개발되지 않았습니다. 여기에서 우리는 다양한 사후 병변 호흡 신경 가소성을 연구하는 자궁 경부 2 (C2) metameric 수준 높은 SCI의 쥐의 전 임상 모델을 제안한다. 이 기술로 인해 뇌간에있는 호흡 센터에서 횡격막 운동 신경원의 deafferentation에 다이어프램의 hemiparalysis을 유도 할 것이다 C2 수준의 수술 부분 부상으로 구성되어 있습니다. 부상의 반대쪽은 그대로 유지하고 동물 복구를 할 수 있습니다. (흉추 및 요추 수준에서) 전위의 기능에 영향을 미치는 다른 SCIS는 달리, 호흡 기능 동물 동기 부여를 필요로하지 않고, 적자 / 복구의 정량화 쉽게 (다이어프램 횡격막 신경 녹음을 수행 할 수 있습니다의, 몸 전체 환기). 이 전 임상 C2 SCI 모델은 서로 다른 수준 (생리학 분자)에서 다양한 호흡 및 비 호흡 신경 가소성 이벤트를 공부하고있는 호흡을 향상시킬 다양한 상상 속 치료 전략을 테스트하기 위해 강력하고 유용하고 신뢰할 수있는 전임상 모델 SCI 환자.
서론
척수 외상은 영구적 인 마비와 같은 극적인 발생률과 인구에서 관찰 된 일반적인 부상입니다. 그러나 부상의 심각성은 초기 외상의 수준과 정도에 따라 달라집니다. 호흡 부전은 상부 경추 척수 손상 (SCI) 1 다음과 사망의 주요 원인이다. 현재 유일한 치료 치료는 인공 호흡기의 도움하에 환자를 배치하는 것입니다. 소수의 환자로 인해 포스트 병변 지연 발생 자발적 회복, 환기 지원 2를 투약 할 수 있기 때문에, 새로운 혁신적인 비 침습 치료를 개발할 필요가 긴급 3입니다. , 상상 속 치료 전략의 응용 프로그램을 공부하고, 따라서 호흡 부전에 자궁 SCI의 효과를 조사하는 것이 표준화 된 전 임상 모델을 갖는 것은 필수적이다.
이 기술 문서에서는, 우리는 특정 전임상 쥐 모델 (을)를 설명F 호흡 장애는 C2 수준에서 부분 자궁 SCI에 의해 유도. 이 모델은 현재 (: 4-13 후기) 세계의 여러 실험실에서 사용됩니다. 그러나, 수술 과정에서 약간의 차이가 특정 경추 부상 뮤린 모델을 생성하기 위해 다른 연구자간에 관찰 될 수있다. 호흡 출력에 C2 SCI의 효과는 첫 번째 포터 (14)에 의해 1895 년에 설명했다. 자궁 hemisecti....
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프로토콜
이 프로토콜은 우수 (파리 수드, 보조금 협정 제 246556 대학)와 Université 드 베르사유 생 캉탱 앙 이블린의 RBUCE-UP 의자의 윤리위원회의 승인을 받았다.
살균 수술 도구의 1. 준비
- 실험실 세제로 수술 도구를 청소합니다.
- 수술 전에 악기를 압력솥.
- 수술 세션에서,이 수술 사이에 180 ° C에서 10 분 동안 뜨거운 구슬 살균기에 팁을 배치하여 도구를 소독.
약의 2. 준비
- 사전 마취제 칵테일 및 수술 후 약물 x 1 2 ㎖ 주사기를 준비합니다.
- Carprofen (5 ㎎ / ㎏), 부 프레 놀핀 (50 ㎍ / kg), Baytril (5 ㎎ / ㎏)과 Dexmedetomidine (0.5 ㎎ / ㎏) : 쥐의 무게에 따라, 사전 마취제와 주사기를 준비합니다. 락 테이트 화 링거 1 ML에 볼륨을 완료합니다.
- 의 준비다른 주사기 사전 마취제의 반전 : Atipamezole (500 ㎍ / kg).
쥐 3. 마취
- 동물에 2.2 단계에서 설명한 사전 마취 약물의 용액을....
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결과
부상의 정도
성공이 특정 실험 모델의 재현성 각 조작 / 외과 의사의 경험에 따라 달라집니다. 나머지 ventrolateral는 흰색 물질 21을 아끼지과 C2 부상 다음 호흡 복구 (횡격막 신경 활동과 다이어프램 활동)의 연속적인 양의 상관 관계가있다. 부상은 "핸드 메이드"이고 외과에서 연습을 필요로하기 때문에, 각 부상의 정도는 정확한 크기를 결정하기 위해 조직 학적 기술 (파라 포름 알데히드와 조직 4 %, 냉동 조직 슬라이스, 크레 실 바이올렛 염색 고정)에 의해 확인되어야한다 의 손상된 조직 (그림 2B).
전기 생리학 녹음
C2 SCI 후, 동측의 횡격막 신경의 활동이 폐지된다 (그림 3A, VINIT <.......
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토론
C2 상해 모델을 만들기의 기술적 인 문제
C2 손상 쥐 모델은 호흡 후 병변 신경 가소성을 연구하는 재미있는 도구입니다. 그러나, 재현성 및 신뢰성있는 모델을 생성하기 위해 필요한 단계는 다수이고 각 하나 연구의 결과에 영향을 미칠 수있다. 예를 들어, 삽관 과정에서 극도의주의가 orotracheal 튜브 등으로 인해 부상 자체 초기 호흡 부전 이외에 폐쇄성 호흡기 장애 등 다양한 합병증을 초래할 수있는 기관지의 염증을 생산할 수 있기 때문에 수행 될 . 또한, 수술 절차 동안 척수에 대한 액세스는 동물의 복구를 위해 중요 할 수있다. 모든 단계 (근육의 해부 / 후퇴, 지느러미 후궁 절제술, durotomy, 부상 자체) 때문에 수술 사이트 주위 척추에 다양한 동맥의 존재에 매우주의 수행해야코드. 광범위한 출혈은 수술 후 회복이 혈액 손실에 의해 방해 될 수 있고, 척수 허혈 손상 외에 발생할 수 있기 때문에 피해야한다.
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공개 사항
저자는 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.
감사의 글
이 작품은 부여 계약 번호 246556 (유럽 프로젝트 RBUCE-UP)에서 유럽 연합의 일곱 번째 프레임 워크 프로그램 (FP7/2007-2013)에서 자금이 지원되고, HandiMedEx 프랑스의 공공 투자위원회에 의해 할당. 마르셀 Bonay는 Chancellerie 데 Universités 드 파리 (다리 Poix), 상테 Respiratoire EN 퐁 드 Dotation 공들인 및 센터 디부 지원 Respiratoire à 소재지 일드 프랑스 (CARDIF)에 의해 지원되었다
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Animal | |||
| Male Sprague Dawley Rat | Janvier | 225-250 g | |
| Surgical Instruments | |||
| Student Dumont #5 펜치 | 파인 사이언스 도구 | 91150-20 | |
| 학생 표준 패턴 펜치 | 파인 사이언스 도구 | 91100-12 | |
| Mayo-Stille 가위 | Fine Science Tool | 14013-15 | 곡선 |
| 학생 Vannas Spring Scissors | Fine Science Tool | 91500-09 | 스트레이트 |
| 스프링 가위 - 8mm 블레이드 | Fine Science Tool | 15025-10 | 스트레이트 블런트/블런트 |
| Friedman Pearson Rongeur | Fine Science Tool | 16121-14 | 곡선 |
| 해부 칼 - 파인 팁 | 파인 사이언스 도구 | 10055-12 | 스트레이트 |
| Olsen-Hegar 바늘 홀더 | 파인 사이언스 도구 | 12002-14 | 톱니 모양 |
| Weitlaner-Locktite 견인기 | 파인 사이언스 도구 | 17012-11 | 2x3 무딘 |
| 흡수성 수술용 봉합사 | Centravet | BYO001 | 봉합사 크기 4-0 |
| Equipment | |||
| Hot Bead Steriliser | Fine Science 도구 | 18000-45 | |
| 카테터 | Centravet | CAT188 | 16 G |
| 후두경 | |||
| 가이드 와이어 | |||
| 후두 거울 | Centravet | MIR011 | |
| 젖 종소리 | Centravet | RIN020 | |
| 주사기 | Centravet | ||
| 바늘 | Centravet | ||
| O2 | Air Liquid | I1001M20R2A001 | |
| 683 RodentT 인공호흡기 115/230V | Harvard Apparatus | 55-0000 | |
| 독립형 기화기 | WPI | EZ-155 | |
| 얇은 선 가열판 | WPI | EZ-211 | |
| 공기통 | WPI | EZ-258 | |
| Drugs | |||
| 카르프로펜 | 센트라벳 | ||
| 리마딜 | 센트라벳, | RIM011 | |
| 부프레노르핀 | 센트라벳, | BUP001 | |
| 베이트릴 | 센트라벳 | BAY001 | |
| 덱스메데토미딘 | 센트라벳, | DEX010 | |
| 아티파메졸 | 센트라벳 | ANT201 | |
| 베타딘 용액 | 센트라벳 | VET002 | |
| 이소플루란 | 센트라벳 | VET066 |
참고문헌
- Frankel, H. L., et al. Long-term survival in spinal cord injury: a fifty year investigation. Spinal Cord. 36, 266-274 (1998).
- Ramer, M. S., Harper, G. P., Bradbury, E. J. Progress in spinal cord research - a refined strategy for the Internatio....
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재인쇄 및 허가
