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방법 논문

인간 발달의 세 삼 분기의 상당 기간 동안 알코올에 쥐를 노출하는 데 사용 증기 챔버의 건설

14.6K 조회수

DOI:

10.3791/51839

2014년 7월 13일

이 논문에서

요약

우리는 동시에 6 마우스 새장을 수용 쉽게 사용할 재료를 사용하여 알코올 증기 챔버의 구조를 보여줍니다. 우리는 더 이상 인간의 임신 3의 삼보 격에 해당하는 태아 알코올 노출의 마우스 모델에서의 사용에 대해 설명합니다. 이 패러다임은 임신과 출생 후의 일 1-12 동안 동물을 노출합니다.

초록

개발하는 동안 알코올에 노출 공동으로 태아 알코올 스펙트럼 장애 (FASDs)로 알려진 형태 학적 및 행동 이상의 별자리가 발생할 수 있습니다. 스펙트럼의 가장 심각한 끝에 성장 지연, 두개 안면 dysmorphology 및 신경 행동 결손에 의해 특징 태아 알콜 증후군 (FAS)가있다. 설치류 동물 모델과 연구 FASDs의 병태 생리에 관련된 많은 분자 및 세포 메커니즘을 해명했다. 임신 한 쥐에 에탄올 투여는 임신의 제 1 및 제 2 삼보 격 동안의 인체 노출을 모델링하는 데 사용되었습니다. 인간의 세 번째 임신 에탄올 소비는 신생아 설치류를 사용하여 모델링되었다. 그러나, 몇몇 설치류 연구는 인간 임신, 임산부 일반적인 노광 패턴의 세 학기 제로에 상당 동안 에탄올 노출의 효과를 특징으로 하였다. 여기, 우리는 O를 쉽게에서 증기 챔버를 구축하는 방법을 보여줍니다각각 여섯 표준 마우스 케이지까지 수용 할 수있는 btainable 재료. 우리는 모든 세 학기 제로 중에 최소 처리와, 에탄올에 노출을 모델링하는데 사용될 수있는 증기 챔버 패러다임을 설명한다. 우리의 연구는 임신 댐 에탄올에 중요한 대사 내성을 개발 한 것을 보여줍니다. 그러나, 신생아 마우스는 신진 대사 관용과 태아의 수, 태아 무게, 태반 무게, 강아지 / 고양이 모래의 수, 죽은 강아지 / 고양이 모래의 수를 개발하지 않았고, 강아지 무게는 크게 에탄올 노출에 의해 영향을받지 않았다. 이 패러다임의 중요한 장점은 유전자 조작 쥐의 연구에의 적용이다. 또한,이 패러다임은 동물의 취급, 태아 알코올 연구에 큰 혼동을 최소화한다.

서론

임신 중 음주는 크게 영향을받는 개인과 그 가족의 삶의 질을 감소 많은 기관과 시스템의 지속적인 변화를 일으키는 원인이 태아에 나쁜 영향을 줄 수 있습니다. 그것은 여성의 약 30 %가 파티 패턴 1,2 1-8 % 년 음주와 함께, 미국에서 임신 중에 마시는 것으로 추정된다. 태아 발달 동안 에탄올 노출에 의해 생산 효과의 범위는 공동으로 태아 알코올 스펙트럼 장애 (FASDs)로 알려져있다. 최근 추정 FASDs 미국 3 2-5 %의 높은 유병률과 주요 공중 보건 문제가 있다는 것을 나타냅니다. FASDs의 가장 심각한 증상은 성장 지연, 두개 안면 기형, 학습 장애 등의 신경 행동 학적 결손 특징으로 태아 알코올 증후군 (FAS)입니다. FAS의 유행은 미국 3에서 0.2 ~ 0.7 %로 추정하고있다. FASDs의 현재 치료는 부분적으로 만 효과가 있습니다보다 효과적인 치료법의 개발은 질환의 복잡한 스펙트럼의 세포 및 분자 토대의 이해 부족에 의해 제한됩니다.

국립 출생 결함 예방 연구 (NBDPS)의 데이터는 임신이 임신 2 이후 단계에서 감지 절제 다음되기 전에 임신 한 여성은 가장 일반적으로, 1 일의 임신 기간 중에는 술을 나타냅니....

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프로토콜

모든 동물의 절차는 뉴 멕시코 - 건강 과학 센터 대학 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다.

1. 증기 챔버 어셈블리

  1. (그림 1표 1) 위, 아래, 앞, 뒤, 옆, 도어 용 비디오에서 제공하는 차원에 원형 톱 또는 실톱으로 잘라 폴리 카보네이트 시트.
  2. 원형 톱 또는 퍼즐로, 전면 패널의 중앙에있는 넓은 십육인치 8 인치 높이 개구부를 잘라.
  3. 측정 챔버의 문이 될 것입니다 10 인치 폴리 카보네이트 시트에 의해 18 인치에 피아노 경첩 구멍을 표시합니다.
  4. 문에, 5 / 16 인치 드릴 비트 카운터 싱크 구멍을 드릴, 및 3 / 16 인치 드릴 비트와 나사 구멍을 뚫습니다. 나사 머리의 도어 안쪽의 카운터 싱크 구멍을 드릴 수 있는지 확인하십시오.
  5. 용접 용 폴리 카보네이트 시트를 준비합니다.
  6. 이리저리 조립NT, # 16 용접에를 사용하여 하단 패널에 백업하고, 측면 패널.
  7. # 16 용접에와 패널 사이의 틈새를 밀봉.
  8. # 16 용접에와 상단 패널을 연결합니다.
  9. 용접은 치료하는 동안 자리에 모든 것을 잡아....

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결과

그림 2A는 임신 한 쥐와 신생아의 자손 모두가 챔버에서 상대적으로 안정적인 에탄올 증기 농도에 노출 된 것을 보여줍니다. 이러한 원거리 4-6g / DL 사이.도 2b는 시간의 함수로서 임신 한 생쥐에서 달성를 BECs를 나타낸다. 를 BECs는 표준 알코올 탈수소 기반 분석법 (48)를 사용하여 측정 하였다. G5에서를 BECs 신속 노광 개시 후 ~ 60 mM의 2 시간 상승 및 4 시간의 노출 기간의 끝에 만족. 를 BECs 점차 노출의 끝에 다음과 같은 추가 4 시간 후 ~ 12 mm로 감소했다. G13-14으로, G5에서 검출 수준의 약 60 %를 BECs의 극적인 감소가 발생했습니다. 또,를 BECs 레벨이 더 천천히 증가하고 임신 마우스의 혈중 에탄올 짧은 존재의 결과로, 더 빠르게 감소했다. 단기적 (G18-20)에서를 BECs 더욱 G5에서 검출 수준의 약 30 %로 감소했다. 이러한 연구 결과는 developm와 일치임신 한 쥐.......

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토론

여기, 우리는 세부 사항에서 증기 흡입 챔버의 건설을위한 방법을 설명합니다. 챔버를 구축하는 데 필요한 자재와 공구는 상업 공급 업체의 숫자에서 쉽게 사용할 수 있으며, 챔버의 건설을위한 단계는 비교적 간단하다. 우리가 여기에서 설명하는 시스템은 역류 및 혼합을 방지하기 위해 모든 인라인 체크 밸브가 포함되어 있지 않습니다. 우리는 공중에 우리가 공기 만 실에 어떤 혼합 또는 에탄올의 역류가없는 것을 제안 만 실을 모든 검지 에탄올을 측정 할 수 없습니다. 단 챔버가 주기적 에탄올 증기에 대해 검사되어야한다 공기는 (그것이 기실 항상 측정기 및 / 또는 주사기에 존재하는 잔류 에탄올 증기의 검출을 피하기 위하여 종래 에탄올 챔버 테스트해야 주목해야한다). 이상적으로, 챔버는 마우스 케이지 연속적 E의 기간 동안 보관 될 수있는 동물 관리 시설에서 전용 실에 배치해야생쥐를 운반 할 필요없이 xposure 패러다임, 이에 스트레스를 감소시킨다. 공기 배출구에있는 스탠다드 룸이 패러다임에 필요한 모든 것입니다. 룸은 다른 연구자들과.......

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공개 사항

저자가 공개하는 게 없다.

감사의 글

R01-AA015614, R01-AA014973, T32-AA014127 및 K12-GM088021는 건강의 국립 연구소에 의해 부여 지원. 저자는 기술 지원 및 박사 부부를위한 사만다 L. Blomquist 감사합니다. 비판적 원고와 비디오를 평가하는 케빈 콜드웰 도널드 자고.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
폴리카보네이트 1/4" 투명 48" x 24"McMaster-Carr8574K2310
폼 고무 전구 씰 3/8"w x 7/32"hMcMaster-Carr93085K6710 ft
용접용 #16McMaster-Carr7515A113
피아노 힌지 12" 길이McMaster-Carr1658A112 x 1 ft
홀드다운 토글 클램프 표준McMaster-Carr5126A268
PEX 튜빙 1/2"McMaster-Carr51275K8810
가시 티 튜브 피팅(검정색) 패키지 10McMaster-Carr5463K6081
가시 플러그 피팅(검정색) 패키지 10McMaster-Carr5462K791
가시 엘보 튜브 피팅(검정색) 패키지 10McMaster-Carr5463K5961
3/8 "벽을 통한 어댑터, 튜브 대 나사산 파이프McMaster-Carr5463K8511
Phillips 기계 나사 4-40McMaster-Carr91772A1121
기계 나사 육각 너트 4-40McMaster-Carr90480A0051
패널 장착 유량계 2-20McMaster-Carr41945K763
플라스크, 필터 1,000 ml 6 / 팩VWR89001-8002
정밀 밀봉 격막VWR89084-4901
VWR 블랙 고무 스토퍼 #8 1-홀VWR59581-3671
튜브 TYGON R3603 3/8X9/16 50'VWR89068-5561
TUBE TYGON R3603 1/4X11/16 50'VWR89068-5021
에어레이터 스톤 P2120VWR32573-0071
3/8" T-커넥터 Pk of 20VWR46600-0601
VWR 디스 커넥터 테이퍼 Pk of 10VWR46600-1101
3/8 호스 바브 밸브 인라인 커플 링콜드 제품 회사HFCD176121
에어 펌프 중간 용량LMI 제조업체DB60L1
Nexelate 와이어 선반 36 "W X 24"D X 63"H글로벌 산업용T9A9901351
스템 캐스터 세트 (4) 5" 폴리우레탄 휠글로벌 산업용T9A5005911
피트 개

참고문헌

  1. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). World Health Organization Who. Alcohol use and binge drinking among women of childbearing age--United States. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 61 (28), 534-538 (2012).
  2. Ethen, M. K., et al.

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재인쇄 및 허가

태그

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