이 영화는 생쥐의 조직 및 간 혈류 역학을 취득하는 방법을 보여줍니다. 전체의 모니터링은 중요한 파라미터, 전신 혈압, 중심 정맥압, 간동맥 유량 및 포털 정맥 압력뿐만 아니라 마우스에서 포털 유량의 획득을 포함한다.
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이 논문에서
요약
초록
실험적 연구의 마우스 모델의 사용은 생리학 및 병리학 적 간 장해에 대한 막대한 연구 중요하다. 그러나, 마우스의 작은 크기로, 마우스에 적합한 수술 모니터링 절차의 기술적 상세 설명은 거의 없었다. 이전에 우리는 쥐에 대한 혈역학 적 매개 변수를 얻을 수있는 모니터링 절차를보고있다. 이제, 우리는 생쥐에서 체계적이고 간 혈역학 적 파라미터를 획득하는 절차, 쥐보다 작은 열이 배 종 적응. 이 필름은 동물의 계측뿐만 아니라 마우스에서 전신성 및 간 혈류 역학을 평가하는 데 필요한 데이터 수집 프로세스를 설명한다. 체온, 호흡과 심장 박동을 포함하여 중요한 매개 변수는 전체 과정에 걸쳐 기록되었다. 전신 혈역학은 경동맥 동맥 압력 (CAP) 및 중심 정맥압 (CVP)로 구성되어 있습니다. 간 관류 매개 포털 V를 포함EIN 압력 (PVP), 포털 유량뿐만 아니라 간동맥 (표 1)의 유량. 계측 및 데이터 수집은 일반 값은 1.5 시간 이내에 완료되었다 기록합니다. 전신 및 간 혈역학이 절차를 수행하는 동안 정상 범위 내에서 유지했다.
이 절차는 도전 만 가능하다. 우리는 이미 실험을 클램핑 정상 마우스뿐만 아니라 70 % 부분 간 절제술시 간 엽에서 간 혈류 역학을 평가하기 위해이 절차를 적용했습니다. 절제 (N = 20), 절제 (6.87 ± 2.39 CMH 2 O) 이전보다 유의하게 높았다 CMH이 O (P <0.05) 11.41 ± 2.94 후 PVP를 의미한다. 실험 클램핑 간 로브의 결과는이 모니터링 절차는 포털 압력과 포털 유량의 작은 변화를 검출하기위한 민감하고 적합한 것으로 나타났다. 결론적으로,이 절차는 숙련 된 마이크로 외과 의사의 손에 신뢰할 수 있지만 특급으로 제한해야eriments 마우스는 절대적으로 어디 필요합니다.
서론
이 동영상의 전반적인 목적은 전신 및 간 혈역학 파라미터를 획득하기위한 실시간 모니터링 절차를 입증하는 것이었다. 이 절차를 개발하기위한 이론적 근거는 체계적이고 간 혈류 역학적 매개 변수를 얻는 필요로 쥐 실험 개입에 대한 가장 큰 값입니다. 절차는 부분 간 절제술, 포털 정맥 결찰 및 간 이식으로, 순진한 동물과 중 또는 주어진 간담 담도 실험적인 수술 적 치료 후 적용 할 수 있습니다.
설치류 간 혈역학 데이터의 수집은 제안 침략 절차가 필요합니다. 간 관류 비 침습적으로 얻을 수 없다. 그러나, 전신 혈압의 획득을위한 대안이있다. 이러한 꼬리 커프 기법 8로서 모니터링 기술은 래트 및 마우스 모두에서 혈압을 획득에 이용되어왔다. 꼬리 커프 기술은 consci에 적용 할 수 있습니다OU에 동물. 혈압을 측정 할 때, 동물은 특정 불편한 위치에 배치되어 고정 될 필요가있다. 꼬리 즉석 기기의 사용 설명서에서, 제조자는 마우스 긴장되고 꼬리의 순환을 감소 할 수있는 스트레스를 수 있다는 것을 말한다. 그 상황에서, 꼬리에서 취득한 말초 혈압 중앙 혈압보다 훨씬 낮을 수있다.
전체 모니터링 절차는 데이터 수집을위한 일련의 센서를 이용하여 통합 된 다중 - 채널 모니터를....
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프로토콜
주택 및 수행 모든 절차는 독일어 동물 복지 규정에 따라했다.
1 센서 교정 (센서 교정에 대한 제조업체의 지침에 따라)
1.1) 밀라 카테터 교정. 30 분 전에 균형을 위해 (제로) 및 교정에 대한 멸균 생리 식염수에 카테터의 끝을 미리 담가.
- 브리지 앰프의 millar1 채널에 밀라 센서를 연결하고 물 열에 밀라 센서 팁을 삽입합니다.
- 0 CMH 2 O.에 물 열 값을 설정합니다 데이터 분석 소프트웨어 창에서 증폭 브리지를 선택하고 그것을 제로. 기준값 0 CMH 2 O가 설정 될 수있다.
- 20 CMH 2 O.에 물 열 값을 설정합니다 데이터 분석 소프트웨어 창 진행을 실행하고 중지합니다. 증폭 브리지의 창에서 "단위"를 선택,이 O에 따라 0과 20 CMH의 기준을 설정합니다. 2 O.
- 동일한 방식으로 CAP 측정 millar2를 보정 (베이스 라인이 90, 110 CMH이 O을 설정).
1.2) 혈류 프로브 교정
- <....
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결과
이러한 호흡과 심장 박동으로 마우스의 중요한 매개 변수는 분명히 쥐보다 훨씬 더 높다. 평균 전신 혈압과 경정맥 압력은 쥐 값과 유사한 인간 데이터에도 유사하다.
간 혈류 역학 데이터는 분명히 다르다. 우리는 8 생쥐에서 정상 값을 얻을. 정상 마우스에서 포털 혈류는 1.6-2.3 ㎖ / 분 사이이었다. 간동맥에 흐름은 0.10에서 0.35 ㎖ / 분였다. 정상 동물 간문맥 압력은 8.09 ± 2.47의 평균값 CMH 2 O (표 1)와 O 2 CMH 4.4-11.2 넓은 범위에 있었다. 정상 동물의 작은 그룹의 평균값을 비교할 때 넓은 범위 작지만 유의하지 차이가 발생할 수있다.
우리는 특히 포털 압력에 상당한 개체 간 차이를 관찰하기 때문에, 우리는 작은 내 개인차가이 기술로 검출 될 수 있는지 여부를 테스트nique. 우리는 두 개의 서로 다른 실험 설정에서이 절차를 평가 : .......
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토론
간 혈류 역학의 모니터링은 간 장학 및 간담도 수술에서 중요한 연구 도구입니다. 간 혈역학 데이터 취득 순환계에 간담 절차의 효과를 특성화하는 데 도움. 혈관 활성 약물을 평가하는 연구에서 필요에 따라 간 혈역학 데이터의 수집은, 예를 들면 포털 압력과 포털 흐름에 영향을 미치는 약물의 효과를 연구 할 필요가있다.
작은 크기에도 불구하고, 전신 중요한 매개 변수, 간 혈류 역학은 생쥐에서 모니터링 할 수 있습니다. 다음 프로토콜 내의 중요한 단계가 있었다 : 첫째, 순환 부전의 원인이 저체온증을 피하기 위해 전체 공정 중에 온난화 패드에 동물을 배치하는 것이 중요하다. 마우스의 혈관 벽이 매우 깨지기 쉬운 얇은 때문에 둘째, 마우스의 혈관을 해부 할 때 매우 신중해야 할 중요합니다. 이 일에 약간의 지방 조직을 잡아 혈관 벽을 해결하기 위해 가장 좋은 것 같다대신 혈관 벽 자체를 잡는의 전자 표면. 셋째, 장간막 정맥 주위 정착 봉합사를 걸 때 동맥 공급을 저.......
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공개 사항
저자는 그들이 더 경쟁 금전적 이해 관계가 없다고 선언합니다.
감사의 글
이 연구는 "가상 간 네트워크"투자 교육 및 연구를위한 독일 연방 Ministery (BMBF)에 의해 지원되었다. 나는 비디오를 생산 및 오디오를 기록하는 애니메이션과 이사벨 Jank을 만드는 그들의 도움에 대한 예나 대학 병원의 미디어 센터에서 프랭크 슈베르트 르네 Gumpert 감사드립니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 파워랩 16/30 | ADInstruments | PL3516 | |
| 쿼드 브리지 앰프 | ADInstruments | FE224 | 브리지 앰프 |
| 동물 바이오 앰프 | ADInstments | FE136 (3 pk) 용 FE136 | |
| 바늘 전극 | MLA1213 | ||
| 인공 혈관 주위 유량계 모듈 | 천음속 | TS420 | |
| Flowprobe MA0.5PSB / MA1PSB | Transonic | MA0.5PSB / MA1PSB | |
| SPR-1000 마우스 압력 카테터 | Millar 기기 | 841-0001 | |
| 액체로 채워진 카테터 | 테루모 | SR+DU2619PX | 26G, 0.64&회; 19mm |
| 마이크로 가위 | F· S&미드닷; L | 번호 14058-09 | |
| 마이크로 serrefine | F· S&미드닷; L | No.18055-05 | |
| 마이크로 클램프 어플리케이터 | F· S&미드닷; L | 번호 18057-14 | |
| 스트레이트 마이크로 펜치 | F&미드도트; S&미드닷; L | 번호 00632-11 | |
| 곡선형 마이크로 펜치 | F· S&미드닷; L | 번호 00649-11 | |
| 바늘 홀더 | F· S&미드닷; L | 번호 12061-01 | |
| 6-0 실크 | 에티콘 | ||
| 6-0 프롤렌 | 에티콘 | ||
| 7-0 프롤렌 | 에티콘 | ||
| 10-0 프롤렌 | 에티콘 | ||
| 꼬리 절단 장치 | Kent Scientific | ||
| www.kentscientific.com LabChart7 | AD데이터 | 분석 소프트웨어 |
참고문헌
- Albuszies, G., et al. Effect of increased cardiac output on hepatic and intestinal microcirculatory blood flow, oxygenation, and metabolism in hyperdynamic murine septic shock. Crit Care Med. 33 (10), 2332-2338 (2005).
- Bernhard, W., et al.
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