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방법 논문

저렴하고 간편한 구축 Zebrafish의 시설의 건설

16.7K 조회수

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DOI:

10.3791/51989

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2014년 11월 22일

 ,  ,  ,  , 

이 논문에서

요약

번식 및 생체 내 연구에 적합한 제브라피시 시설이 쉽고 저렴한 방식으로 지어졌습니다. 유지 보수가 최소화됩니다. 이 시설은 학생 참여 및 독립적인 연구에 이상적입니다.

초록

생체 내에서 생물 의학 연구는 임상 발전에 시험관 연구 결과에 번역 중요한 것입니다. 제한된 자원을 가진 작은 교육 기관은 사실상 불가능 구축 및 연구를위한 일반적인 설치류 시설을 유지하기 위해 찾을 수 있습니다. Zebrafish의 연구는 약리학, 생리학, 개발 및 유전 연구에서 생체 연구를위한 중요한 대안이 될 입증되었습니다. 이 문서는 기능 제브라 피쉬 설비가 간단하고 저렴한 방법으로 구축 할 수 있다는 것을 보여줍니다. 우리는 설비가 최소한의 도구와 전문 지식에 대한 하나의 작업 일에 내장 될 수 있음을 보여줍니다. 본 연구에서 구축 한 27 1.8 L 수조 제브라 피쉬 시설의 비용은 약 1,500달러했다. 우리는 3 개월의 초기 작업 (150) 물고기 식민지의 유지 보수는 1,000 달러 것으로 추정된다. 연구는 제안을 위해 도입 된이 프로젝트 참여 학생들은 제브라 피쉬의 aquaculturing합니다.

서론

생체 내 모델은 시스템 및 유기체 수준에서 번역 할 시험관 연구에서 수 있기 때문에 종합적인 생물 의학 연구 수행에 필수적이다. 예를 들어, 작은 포유류, 설치류, 즉, 함께 연구 약물의 개발 및 사용 가능한 약물의 개선에 필요한 입증되었다. 그러나, 복잡성 (재정적 물류는)이 사실상 불가능 구축하고 실험이 작은 연구 교육 기관에서 제안에 대한 설치류 시설을 유지 보수 할 수 있도록 다음과 같은 수 있습니다. 그럼에도 불구하고, 생체 내 연구는 덜 정교한 물류 필요한 다른 동물 종을 사용하여 수행 될 수있다. 제브라 피쉬 (다니오 레 리오 (rerio))을 성공적으로 유전학, 개발, 병태 생리 및 약리학 1,2,10,11,12을 연구하는 생체 내 모델로 사용되어왔다. 실험에 대한 제브라 피쉬를 수용하는 데 필요한 시설은 R에 비해 상대적으로 간단하고 훨씬 적은 비용이odent의 시설과 서비스를 제공합니다. Kim 등. (3)는 최근 상세히 부품 및 노동 비용을 모두 포함하는 약 $ 1,500에 대한 구축 할 수있다 (80) 탱크 제브라 피쉬의 주택 시스템을 설명했다. 이것은 상용 공급 업체의 수에 상관없이 기성품, 80 탱크 시스템을 구입해야 할 것이라고 ....

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프로토콜

참고 :이 프로토콜은 장로교 대학의 IACUC의 지침을 따르십시오.

표 1에 획득 1. 재료.

2. 제조업체의 지침에 따라 5 선반 크롬을 조립합니다. 이 시설을 수용하는 데 사용됩니다.

3. 물 용기와 여과 시스템 (도 1a 및도 2)을 구축.

  1. 가이드로 그림 1A를 사용하여, 최종 설치 위치와 크기를 결정하기 위해 18 갤런 물통, 펌프, 필터 및 UV 램프의 레이아웃.
  2. 부품이 배치되면, 측정 및 조립에 필요한 길이로 ¾ "PVC 파이프를 잘라. 특정 공간 요구 사항 및 제한 사항에 따라 모든 파이프의 길이가 다릅니다.
  3. PVC 프라이머와 시멘트를 사용하여 이전 배치로 파이프 및 피팅을 조립, 아래 (3.3.2과 3.3.3)를 참조하십시오.
    1. 모래 사포 파이프의 절단면들은 터치에 매끄러운까지D 이물질이 없습니다.
    2. 프라임 파이프의 외부에서 프라이머 PVC 포함 면봉 구입 PVC 프라이머 피팅의 내부.
    3. 포함 면봉을 사용하여 파이프의 외부로 PVC 시멘트를 적용하여 함께 파이프 피팅 시멘트. PVC 점착을 필요로하는....

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결과

펌프 및 Flters 시스템 구축
랙 조립 및 첫 번째 단계를 설정되면 펌프와 필터 시스템을 구축하는 것입니다. 필터 시스템에 연결되어 펌프 손쉽게 필터 유지 보수 및 교체 할 제 선반의 하부 레벨 위에 위치된다. 유사하게, UV 램프 필터 PVC 파이프를 연결하고 필요한 (도 4a)와 같은 UV 램프를 쉽게 교체 할 수 있도록 플라스틱 와이어 타이 제자리에 유지된다. 즉시 종이 필터, 활성탄 필터, 및 UV 램프 PVC 파이프를 통해 설치되는 펌프를 다음. Biobal​​ls 질산염 암모니아 독성 폐기물 변환 박테리아의 성장을위한 표면을 제공하기 위해 탱크에 첨가된다. 시스템의 물 갤런 당 하나의 biobal​​l은 세균의 성장을 허용 할 수있는 충분한 지역입니다. 오버플 경우 biobal​​ls가 저장 부에 유지되며 contamina의 기회 있도록 저수지의 플라스틱 뚜껑을 장착 할 수있다기는 최소화된다. 오버 플로우 이벤트가 매우 어렵다하더라도, 배출 시스템 (저장조의.......

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토론

이 문서의 주요 목적은 기능 제브라 피쉬 시설의 건설이 복잡하지 않고 최소한의 건설 지식 초보자 물고기 연구자들에 의해 만들어 질 수 있음을 입증하는 것입니다. 또한,이 문서에서는이 기능 제브라 피쉬 시설에 대한 자료는 지역의 애완 동물 공급 상점 또는 하드웨어 상점에서 쉽게 저렴하게 획득 할 수 있음을 보여줍니다. 모든 재료 및 도구는 시스템의 구성을 획득되었으며 어항 약 1 근무일 잡히게되면. 72 시간 첫 번째 실행이 결정되는 등의 누출 또는 낮은 수압으로 시스템의 모든 실패를, 할 수 있습니다. 시스템 내에서 오염 물질이 순환에서 제거 될 때까지이 처음 실행도 할 수 있습니다. 예를 들어, PVC 접착제는 순환의 처음 몇 시간 동안 제거한다 유해 유기 물질을 함유 할 수있다. 이 시스템은 허용하고 렌즈 유지 볼륨과 물 교체의 조정을 용이하게하는 주 배수 밸브가 ANCE. 또한, 시스템은 기압의 조정을 용이하게 해소 압력 라인을 갖는다. 이 수압 규제 할 수 있으므로 하나 또는 두 개의 구획 (가구)이 사용될 .......

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공개 사항

저자는이 문서에 대한 관심의 충돌을 선언합니다.

감사의 글

저자는 연구 및 공동 작업 (SPARC) 수상의 작은 약국 상을 통해이 프로젝트의 금융 지원을 위해 약국의 장로교 대학 학교의 연구의 사무실에게 감사의 말씀을 전합니다. 저자는 씨 존 Smink, 수생 동물 연구소의 관리자 클렘 슨 대학 (Clemson University), 클렘 슨, 자신의 기술 지원 원고 개정 SC 감사합니다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
아이템브랜드수량
74-in H x 48-in W x 18-in D 5-선반 스틸 프리스탠딩 선반 유닛스타일 선택1
18-갤런 일반 버킷/토트Centrex 플라스틱: LLC  견고한 토트1
6-아웃렛 전원 스트립과 15-Ft. 코드Master Electrician1
9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter 및 UV 램프Smartpond 
전체 집 물 교체 필터월풀6
불투명 전체 집 사전 여과 하우징월풀2
스레드 밀봉 테이프윌리엄 H 하비1
8-fl oz LO-VOC PVC 시멘트오티;
8-fl oz LO-VOC 프라이머오티;
1/4인치 x 100피트 비닐 드립 관개 분배 튜빙미스터 랜드스케이프라이저 
1/4-in 바베드 드립 관개 온/오프 밸브Mister Landscaper33
9-Port NPT 관개 매니폴드 필터  Mister Landscaper6
드롭인 필터(하우스 포함 );월풀6
2인치 직경 90도 PVC 엘보LASCO3
2인치 직경 90도 티LASCO3
3/4인치 직경 90도 슬립 엘보LASCO15
3/4인치 직경 PVC 어댑터LASCO7
3/4인치 직경 PVC 티LASCO12
2인치 직경 PVC 캡LASCO3
1인치 직경 x 3/4인치 직경 PVC 어댑터LASCO2
3/4인치 PVC 소켓 인라인 볼 밸브아메리칸 밸브5
1/2인치 직경 x 3/4인치 직경 PVC 어댑터라스코8
3/4인치 직경 PVC 캡라스코1
2인치 x 5피트 PVC 파이프샬롯 파이프4
¾ -인치 x 10피트 PVC 파이프샬롯 파이프3
11/16x1-7/80 PVC 링SXT10
½ ” PVC 남성 어댑터SXT1
¾ ” PVC 커플 링 SXT1
&프랙12; ” PVC 암 어댑터 SXT1
링크
1.8 L 듀얼 베타 키퍼탑 핀27
¾ ” PVC 남성 어댑터 (w/ #18 O-ring)SXT28
90-degree ¾ ” 나사가 달린 PVC 팔꿈치SXT27
파인 메시N/A1 야드
벌크헤드 커넥터N/A1
핵쏘N/A1
드릴N/A1
홀 톱N/A1
조절 가능한 렌치N/A1
플라이어 N/A1
줄자N/A1
보안경N/A1
작업장갑N/A1
1111

참고문헌

  1. Detrich, H., Westerfield, M., Zon, L. The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A.. , 3rd ed, Academic Press. New York, New York. (2010).
  2. Grim, J. M., et al. Hemogen (hemgn), a transcription factor that regulates erythropoiesis and skeletogenesis in zebrafish. <....

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