여기에 제시된 프로토콜의 목표는 태아기 뇌 발달 과정에서 쥐를 중간 수준의 알코올에 노출시키는 절차를 설명하고 성인기 동안 사회적 행동의 변화를 정량화하는 것입니다.
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이 논문에서
요약
초록
사회적 행동의 변화는 태아 알코올 스펙트럼 장애(FASD)가 있는 어린이에서 관찰되는 주요 부정적인 결과 중 하나입니다. 여러 독립 실험실은 뇌 발달 중 알코올에 노출된 설치류의 사회적 행동에 대한 강력한 변화를 광범위한 노출 기간, 시기, 용량 및 행동 정량화 시점의 연령에 걸쳐 입증했습니다. 이 실험실의 이전 연구에서는 쥐의 중등도 태아 알코올 노출(PAE) 후 레슬링 증가 및 조사 감소를 포함하여 성인기까지 잘 지속되는 특정 형태의 사회적 상호 작용에서 신뢰할 수 있는 변화를 확인했습니다. 이러한 행동 변화는 중등도의 PAE1에 의해 변경된 신경 회로를 식별하는 데 유용했으며, 사회적 행동에서 PAE 관련 변화의 신경 기반에 대한 보다 완전한 이해를 향해 나아가는 데 중요할 수 있습니다. 이 논문은 쥐댐이 임신 기간 동안 자발적으로 에탄올 또는 사카린을 소비하는 중등도의 PAE(대조군)를 수행하는 절차와 성체 자손의 사회적 행동을 측정하는 절차를 설명합니다.
서론
어린이의 추정 1~5%는 태아 알코올 증후군 (FAS), 부분 FAS (PFAS), 및 알코올 관련 신경 발달 장애 (ARNDs)를 3 등 태아 알코올 스펙트럼 장애 (FASDs) 2, 진단된다. 사회적 행동과인지의 적자는 FASDs 4-7 소아에서 관찰 된 가장 흔한 부작용 중입니다. 부정적인 결과가 FASDs 8-10과 인간, 비교적 미묘한하지만, 그럼에도 불구하고 지속적으로 발생할 수 FAS의 눈에 띄는, 형태 학적 행동 및인지 적자 특성으로 이어질하지 않는 적당한 PAE 무거운 태아 알코올 노출 (PAE)에 적자를 국한되지 않습니다 및 비 - 인간 동물 뇌 발달 11시 에탄올에 노출. 적당한 PAE의 행동 및 해당 신경 생물학적 결과를 이해의 중요성은 FASD 케이스의 대다수가 덜들 내에 있음을 나타내는 현재의 추정에 의해 강조된다스펙트럼 (12)의 evere 범위.
여러 독립적 인 실험실을 포함, 두뇌 발달하는 동안 노출을 에탄올 관련 설치류 사회적 행동의 변화를보고 플레이 14,16,17를 변경 조사와 상호 작용 1,13-15을, 감소, 사회적 자극에 응답에 적극적인 상호 ....
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프로토콜
여기 첨부 된 동영상에서 설명하는 모든 절차는 보건 과학 센터의 기관 동물 케어 및 사용위원회 및 뉴 멕시코 대학의 메인 캠퍼스에 의해 승인되었습니다.
1. 태아 에탄올 노출
- 필요한 모든 재료와 화학 물질을 얻 사카린 나트륨 염 수화물, 190 증거 에탄올 (부피 기준 95 % 알코올), 파란색 유리 마시는 튜브, 하나의 구멍, 1 "굽힘 튜브 - 볼 포인트, 종이 통치자 WWW에서 인쇄 천연 고무 흰색 # 4 스토퍼 .vendian.org / mncharity / dir3 / paper_rulers /.
- 공급 업체 나 다른 소스에서 입증 된 성인 증식 쥐를 얻습니다. 이 프로토콜에 제시된 방법과 대표적인 데이터에 대한 긴 에반스 브리더를 사용합니다. 여성은 125-150g 그들이 사육시 약 9~10주 나이가되도록 도착시 연령 6 ~ 7 주 (1.5 단계) 무게. 모든 미래의 댐은 처음 어머니 있는지 확인합니다. 남성 12 있는지 확인도착 연령의 주 및 번식 프로토콜의 시작 오래 15주.
- 하우스 역 12 시간 조명 / 어두운 일정에 22 ° C에서 개별적으로 플라스틱 케이지의 동물 (09 시간으로 21:00에 점등). 모든 음주 세션 중에 포함, 연구를 통해 음식과 수돗물 임의로에 대....
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결과
많은 번식 라운드의 과정을 통해 에탄올 상태에서 암컷 쥐가 지속적으로 4 시간 마시는 세션 당 에탄올의 약 2.1 g / kg의 평균을 마신다. 쥐 댐 45 분 시점에서 측정 된 약 60 ㎎ / DL의 피크 모체 혈청 에탄올 농도 결과 술 튜브를 도입 한 후의 제 15 ~ 30 분 동안 네 시간 합계의 약 절반을 소비한다. 마시는 기간의 나머지에서 3.5 시간 동안, 그들은 0.4 g / kg 체중 / 시간 이하, 비교적 안정된 속도로 5 % 에탄올을 소비하는 것을 계속한다. 자발적인 에탄올 소비량이 수준의 패턴은 산모의 체중 증가, 자손의 출생 체중, 산자, 모성 보호, 태반 습 중량, 행동 테스트에서 자손의 무게, 전체 뇌, 해마 또는 소뇌 젖은 무게에 유의 한 영향을주지 않습니다.
대표적인 수단과 각각의 행동 측정을위한 남성 saccharin- 에탄올에 노출 된 쥐의 SEM표 1에 도시 된 재. 이들 데이터는 사전 실험으로부터 모으고 태아 .......
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토론
여기에 설명 된 태아 알코올 노출 패러다임은 임신 중 쥐 댐에 의한 에탄올의 자발적인 소비 (5 % v / v)로 포함한다. 타이밍, 도즈, 기간 및 노선 에탄올 투여뿐만 아니라, 조사중인 종에 대하여 다를 문헌에서 표현 뇌 발달 동안 에탄올 비인간 동물을 노출시키기위한 수많은 프로토콜들이있다. 노광 다양한 프로토콜의 장점의 완전한 치료가 여기에 제공되지 않지만, PAE에 대한 자발적인 마시는 방법의 몇 가지 장점이 강조 프로토콜에서 설명. 우리는 이전에 래트 댐 차 음식 소스 (24)의 일부로서 5 % 에탄올을 소비하는 유동식 프로토콜, 통상적으로이 분야의 연구에서 사용되는 방법을 이용했다. 이러한 접근법에 대한 제어 조건이 칼로리 섭취량은 에탄올이 소모 댐의 것과 멍에시킨 쌍 먹인 그룹과 임의 량의 (ad libitum) 접근 할 수있는 그룹을 포함차우합니다. 두 그룹의 쥐 댐 (에탄올, 사카린) 영양과 칼로리 섭취 그룹 변동성 사이 줄이고, 낯선 음식 소스의 강제 섭취로 인한 스트레스의.......
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공개 사항
저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.
감사의 글
DAH에 AA019462 부여하고 DDS에 AA019884 지원을 제공합니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 사카린 나트륨 염 수화물 | 시그마 | S1002 | |
| 190 프루프 에탄올 | 시그마 | 493538 | |
| 구슬 유리 마시는 튜브 | 피셔 | 14-955K | |
| 천연 고무 화이트 # 4 스토퍼 한 구멍 | 플라스틱 LSG4M181 | ||
| 1 "벤드 튜브 - 볼 포인트 | Ancare | TD-199-3" | |
| 종이 눈금자 | 해당 없음 N/A | www.vendian.org/mncharity/dir3/paper_rulers | |
| 사회적 상호작용을 위한 장치 | 맞춤형 | N/A | 95cm X 47cm X 43cm |
| 비디오 카메라 | 해당 | 없음 | 저조도 또는 저조도 기록 가능 |
| 적외선 조명기 | Vitek | VT-IR1-12 | |
| Teklad 실험실 등급 sani-chips | Harlan | 7090A | |
| 브러시 및 쓰레받기 | 해당 사항 없음 | 이 | |
| 소프로필 알코올 | 시그마 | W292907 | |
| 이산화염소(1.5mg 정제) | Quiplabs | N/A | 제조업체의 권장 사항에 따라 준비 |
참고문헌
- Hamilton, D. A., et al. Prenatal exposure to moderate levels of ethanol alters social behavior in adult rats: Relationship to structural plasticity and immediate early gene expression in frontal cortex. Behav. Brain Res. 207 (2), 290-304 (2010).
- May, P. A., et al.
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재인쇄 및 허가
