인간 백신 닭 계란에 인플루엔자 바이러스 전파

Rena Brauer; Peter Chen

doi:10.3791/52421

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방법 논문

인간 백신 닭 계란에 인플루엔자 바이러스 전파

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DOI:

10.3791/52421

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2015년 3월 19일

Rena Brauer¹ , Peter Chen¹

¹Department of Medicine, Division of Pulmonary and Critical Care Medicine, Women's Guild Lung Institute, Cedars-Sinai Medical Center

이 논문에서

요약

수정 가능한 닭고기 달걀은 높은 수율의 바이러스를 증명하는 편리하고 비용 효율적인 시스템을 제공하기 때문에 많은 양의 인간 인플루엔자 A 바이러스를 생산하는 데 널리 사용됩니다.

초록

인플루엔자 감염은 약 36,000 명이 사망하고 미국에서 20 만 명 이상의 입원 매년와 연결되어 있습니다. 돌연변이 다시 구색 인한 새로운 인플루엔자 바이러스 균주의 연속 출현 바이러스의 제어를 복잡하게하고 신규 약물과 백신의 개발을 필요로 영구. 인플루엔자의 실험실 기반의 연구는 바이러스의 전파에 대한 안정적이고 비용 효율적인 방법이 필요합니다. 여기에, 포괄적 인 프로토콜은 지속적으로 높은 역가의 바이러스 주식을 산출 비옥 한 닭 계란에 인플루엔자 바이러스 전파, 제공됩니다. 11 일 - 간단히 말해, 혈청 무균 (SPF) 수정 된 닭고기 달걀은 37 ° C와 10 55~60% 습도에서 배양된다. 이 기간 동안, 배아 발달 쉽게 알 캔 들러를 사용하여 모니터 할 수있다. 바이러스 접종은 바늘을 사용하여 공동 내로 뇨 바이러스 스톡의 주사에 의해 수행된다. 37 ° C에서 배양 2 일 후, 계란은4 ° C에서 적어도 4 시간 동안 냉장. 공기 주머니와 상기 멤브레인 융모 껍질을주의 깊게 개방하고, 바이러스를 함유 막액 수확된다. 유체를 원심 분리에 의해 먼지로부터 클리어 분주 장기 저장에 대해 -80 ° C에 전달된다. 다량 보통이 프로토콜에 의해 달성되고 높은 바이러스 역가 (바이러스 - 함유 달걀 당 유체를 5-10 ml)을 대량으로 요구하는 시험 관내 연구를 위해, 특히 바이러스 제제 우리 유리한 방법 계란의 사용량을 만들었다 바이러스의 것과 동일한 바이러스 주식의 높은 복용량이 필요하다.

서론

인플루엔자는 인간의 건강에 큰 위협이되고 있습니다. 그것은 큰 글로벌 부담이 매년 전세계에서 ¹ 500000 사망까지 일으키는 잠재적으로 치명적인 호흡기 질환이다. 인플루엔자 바이러스는 가족 오르 쏘 믹소 바이러스과 (orthomixoviridae)에있는 자신의 게놈 ^1,2 8 음의 감각 단일 가닥 RNA를 수행한다. 바이러스 게놈의 높은 가변성 (즉, 항원 "드리프트")는 장기 면역을 방지 할 수 있습니다. 또한, 인플루엔자 항 바이러스제 ³ 더욱 강하다.

2009 H1N1 인플루엔자 대유행 인플루엔자 질병 (유행성 변형, 항 바이러스 성, 지연 백신 생산)과 관련된 모든 어려운 문제를 강조했다. 백신 제제는 대부분 병원성 인플루엔자 균주 ⁴ (H1N1, H3N2 인플루엔자 B 각각 하나씩)에 대한 세계 보건기구 (WHO)에 의해 매년 결정된다. 이 방법은 예측 인플루엔자 균주를 기반으로하기 때문에들, 병원성 균주는 때때로 잘못 파악하고 백신 유효성이 크게 저하된다. 더욱이, 신규 한 인플루엔자 균주의 ^{출현은이 전염병을} 일으키는 이러한 예방 프로그램을 회피 할 수있다.

범용....