열기 필드 미로의 사용은 마우스의 운동력과 불안 같은 행동을 측정하기 위해

요약

Open Field Maze를 사용하여 실험실 마우스 모델에서 일반적인 운동 활동, 불안 및 감정에 접근하기 위한 프로토콜이 제공됩니다.

초록

동물 모델은 행동 메커니즘에 관한 질문에 답하려는 연구자들에게 매우 귀중한 것으로 입증되었습니다. Open Field Maze는 동물 모델의 행동을 측정하는 데 가장 일반적으로 사용되는 플랫폼 중 하나입니다. 일반적인 보행 능력에서 대상 동물의 감정에 관한 데이터에 이르기까지 다양한 행동 정보를 제공하는 빠르고 비교적 쉬운 테스트입니다. 설치류 모델과 관련하여이 절차를 통해 실험실에서 사육하거나 야생에서 포획 한 다양한 생쥐 또는 쥐 균주를 연구 할 수 있습니다. 이 기술은 또한 불안 완화 또는 불안 유발 효과에 대한 다양한 약리학 화합물을 조사하는 데 쉽게 적합합니다. 여기에서는 쥐의 행동을 설명하기 위해 열린 필드 미로를 사용하는 프로토콜이 자세히 설명되어 있으며 두 종류의 C57BL/6 마우스 간의 일반적인 운동 능력 및 불안 관련 정서적 행동에 대한 간단한 분석이 수행됩니다. 간략히, 설명된 프로토콜을 사용하여 Wild Type 마우스는 연령이 일치하는 Knock Out 마우스보다 불안 관련 행동을 현저히 낮게 보였으며 두 균주 모두 유사한 보행 능력을 보였음을 보여줍니다.

서론

Open Field Maze (OFM)는 1934년 설치류¹의 감정성을 측정하기 위한 테스트로 처음 개발되었습니다. 그것은 동물 심리학에서 가장 널리 사용되는 행동 측정 방법 중 하나라는 지위를 얻었습니다². 잘 정의된 행동에 대한 쉽고 상당히 빠른 평가를 제공하며, 테스트 대상에 대한 교육이 필요하지 않으며 테스트를 관리하는 인간에 대한 전문 교육이 거의 또는 전혀 필요하지 않습니다. 이러한 특성으로 인해 송아지, 돼지, 토끼, 영장류, 꿀벌, 바닷가재와 같은 다른 동물 종으로 확장된 연구에서 열린 필드 미로가 널리 사용되었다³. 이 프로그램의 인기의 일부는 테스트의 기초가 되는 심리학적, 생리적 개념이 일반적으로 간단하고 잘 이해되어 있다는 사실에서 비롯됩니다. 예를 들어, 진화적 힘은 대부분의 종이 특정 자극에 대해 불안에 매개된 두려움이나 도피 반응을 보이도록 동물의 공통 반응을 선택했다고 가정되었습니다. 예를 들어, 설치류는 크고, 밝고, 개방적이고, 알려지지 않은 환경에 대해 뚜렷한 혐오감을 보인다⁴. 우리는 그들이 이러한 유형의 환경을 위험한 것으로 보도록 계통 발생학적으로 조건화되었다고 가정할 수 있습니다. 이러한 모든 기능은 오픈 필드 미로에 통합되어 행동 패러다임 테스트에서 사용의 기초를 형성합....

프로토콜

참고 : 여기서의 모든 절차에 제출하여 승인을 IACUC (연구 준수 사무소)에 의해 NIH의 지침에 따라 실시 하였다되었다. 행동 테스트 패러다임에 사용 된 마우스는 순진하고 다른 시험에 사용되지 않았다. 이 프로토콜에 사용되는 C57BL / 6 야생형과 똑 마우스는 ⁹ 이전에 설명하고 여기에 제시된 데이터는 원고에서 있습니다.

테스트 룸과 오픈 필드 장치 1. 준비

1. 네 활동 챔버로 구성된 여러 단위 열기 필드 미로 (OFM)를 사용하는 것은 이러한 분석 (그림 1)에 사용되었다. 각 챔버 측정 50cm (길이) 50cm (폭) 38cm (높이) x 및 화이트 고밀도 및 비 - 다공성 플라스틱으로 제작 된 X.
2. 미로의 벽이 부드러운 동안 보행시 견인을위한 미로의 바닥 질감입니다. 미로 사분면이 시험의 목적을 위해 완전히 비어있다. 이 프로토 나머지 고려COL 상술 미로 단일 사분면 OFM을 설명하기 위해 이용 될 것이다.
3. 이전 주제 마우스로 남아있는 향기 단서를 제거하기 위해 사용하기 전에 95 %의 에탄올과 이후 테스트하기 전에 실을 닦습니다.
4. 에탄올은 쥐를 테스트에 전에 완전히 증발하도록 허용합니다. 이것은 각 ....

결과

대부분의 경우 실험군 당 균주 개인의 평균 개수는 충분한 관련성 통계를 생성하기 위해 약 20이다. 그러나이 숫자는 마우스 가용성에 따라 8-30의 범위 일 수있다. 필요한 측정 또는 비교에 따라, 또한 연령 유사한 피사체를 사용하는 것이 바람직하다.

열기 필드 미로에서 측정하는 제 틀림없이 가장 중요한 특정 매개 변수는 총 외래 거리입니다. 측정 단위는 비교를 위해 부적절하지만, 가장 자주 메트릭 측정 (cm)로 표현된다. 여기에 (그림 5)에 제시된 실험에서, 야생형 (WT) 또는 정상 C57BL / 6 마우스는 특정 노크 아웃 C57BL / 6 마우스 변형 (KO)과 유사한 보행 능력을 보여줍니다. 총 거리가 이송 균주 또는 치료 사이의 유사한 경​​우 운동 활성을 효과적으로 등식에서 제거되기 때문에, 감정적 인 행동의 추가 분석이 간단해진다기. 테스트 마우스의 전위의 능력에 유의 한 차이가있는 경우 미로의 특정 지정된 영역에서 소비 영역 .......

토론

열기 필드 미로 동물 행동 연구에서 가장 널리 사용되는 플랫폼 중 하나입니다. 중요하고, 종래의 ^2,4- ethological 파라미터 번호를 수집하여 OFM의 수행 동안 분석 될 수있다. 이 자료는 연구자가 불안 관련 감정적 인 행동 ⁸ 전체 운동 활성에 이르기까지 행동을 측정 할 수 있습니다. 그러나, OFM의 사용에도 단점은 있습니다. 한가지 문제는 어떤 교란 시험 세션 동안 조작 될 수있는 정적 변수의 넓은 범위이다. 예를 들면 시간, 조명 조건과 새로운 개체 포함을 포함한다. 응용 프로그램의 광범위한 스펙트럼을 지원하는 데 필수적인 실험 프로토콜 설정 및 디자인 변동성은 어려운 연구를 비교할 수 있습니다. 이러한 배경 또는 유전자 변형 마우스 라인과 약물 치료 등의 다양한 주제 변동성이 포함되는 경우, 시험 비교의 어려움은 더욱 증가 할 수 있습니다. 이러한 문제에도 불구하고, OFM은 설치류 행동 연구에서 가장 널리 적용 기법 중 하나이다. 이 마우스 불안과 감격에 관련하여 여.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
다중 장치 개방형 필드 테스트	San Diego Instruments, Inc.	흰색 7001-0354	모든 단일 또는 다중 단위 개방 필드 미로를 사용할 수 있습니다
SMART DT 추적 소프트웨어	PanLab/Harvard 장치	76-0695	모든 추적 소프트웨어를 이 프로토콜과 함께 사용할 수 있습니다
Sony 990x 비디오 카메라 레코더	Sony	CCD-TRV328	추적 프로필을 기록하기 위해 적절한 비디오 카메라를 컴퓨터에 연결할 수 있습니다.