이 수술 배치 및 카테터 및 전극, 반복적 인 채혈, 약물 주입, 생체 전기 활동의 기록의 유지 보수 및 생체 내 이미징을 허용하기 때문에 만성적으로 계측 비 마취 태아 양 모델은 건강과 질병에 인간 태아의 발달을 연구하는 데 사용됩니다. 우리는이 모델을 수립하는 데 필요한 절차에 대해 설명합니다.
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이 수술 배치 및 카테터 및 전극, 반복적 인 채혈, 약물 주입, 생체 전기 활동의 기록의 유지 보수 및 생체 내 이미징을 허용하기 때문에 만성적으로 계측 비 마취 태아 양 모델은 건강과 질병에 인간 태아의 발달을 연구하는 데 사용됩니다. 우리는이 모델을 수립하는 데 필요한 절차에 대해 설명합니다.
만성 기구를 사용하는 임신한 양은 인간 태아 발달 및 내독소, 박테리아, 탯줄 폐색, 저산소증 및 다양한 약물 치료와 같은 병태생리학적 자극에 대한 반응의 모델로 사용되어 왔습니다. 조산의 위험이 있는 태아에 대한 글루코코르티코이드 치료와 치료적 저체온증의 생명을 구하는 임상 관행이 이 모델에서 개발되었습니다. 이는 카테터와 전극의 외과적 배치 및 유지 관리에 대한 마취되지 않은 태아 양의 독특한 편의 기능 때문이며, 반복적인 혈액 샘플링, 물질 주입, 생체 전기 활동 기록, 전기 자극 적용 및 생체 내 장기 이미징이 가능합니다. 여기에서는 혈액 가스, 대사 및 염증 관점에서 수술 후 회복의 특성화를 포함하여 안정적인 만성 기구 기구 미마취 태아 양 모델을 달성하는 데 필요한 수술 기구 삽입 절차를 설명합니다.
동물 모델의 다양한 실험실 설치류, 비 - 인간 영장류 및 국내 반추 포함한 정상 임신 손상 모두의 연구를 위해 존재한다. 1,2,3,4,5 만성적 계측 양 임신 50 년 등을 위해 광범위하게 사용되어왔다 이러한 리포 폴리 사카 라이드 등의 병태 생리 학적 자극 (LPS)에 인간 태아의 개발 및 응답의 모델. 6-10 LPS 노출을 다음과 같은 병변으로 인해 두 종의 유사한 성숙 프로필입니다 뇌실 주위 백질 연화증,와 미숙아에서 볼을 정확히 모방. 11 12
기타 임신 합병증은 또한 산전 글루코 코르티코이드는 폐 개발 13-15 태아 (16, 17)에 자궁 내 성장 제한 (IUGR)의 영향을 이해를 증진하는 발견으로 아주 자세하게 연구되어왔다.
태아 양 모델의 광범위한 사용은 UNIQ에 기인반복적 채혈, 생체 전기 활동의 기록, 전기 자극 및 생체 뇌 영상에 적용 가능 수술 배치 및 카테터 및 전극의 유지에 비 마취 태아 양 UE 가공성. 자주 사용되지만 (18)의 원격 측정도 가능 아직 더 세련로 인해 초기 및 유지 보수 비용뿐만 아니라 설정합니다. (19)
장비의 많은 변형이 관심에 따라 측정 가능 더욱이, 태아 양 모델은 매우 다재다능하다. 예를 들어, 주 일 동안 기록 할 수있다 이러한 태아 호흡 운동, 전기 뇌 활동, 심혈관 반응, 심전도, 장기의 범위 지역 혈류 흐름 프로브 또는 마이크로 스피어 등에 감사하여 실시간으로 다변량 신호 이 다양성은 연구가 광범위 CARDI의 개발을 포함하여 진행되고있다ovascular 시스템 (20, 21), 시상 하부 - 뇌하수체 - 부신 (HPA) 축 (22), 특히 24 두뇌 발달 (23) 수면 상태 개발, 저산소증의 효과 / 질식 (25), 치료 적 저체온 (26), 염증 6-11, 모두 27의 조합, 글루코 코르티코이드 28, 29, 항우울제 (30), 기관지 폐 이형성증 (BPD) 31, 32, 이전과 노동 동안 이름 만에 태아 프로그래밍 33,34,35,36,37,38,39 또는 소설 태아 모니터링 양식의 개발 조사의 몇 지역. 40,41,42,43
제시된 방법의 전체 목표는이 다용도 모델의 기본 구현을 보여주기위한 것이다. 그것은 셀룰러 통합, 기관, 및 분자 수준에서 태아의 생리학 및 병리학 연구 급성 및 만성 실험 프로토콜의 다양한 설정을 허용한다.
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동물 케어 동물 관리에 캐나다위원회 및 동물 관리에 몬트리올 대학교 협의회 (프로토콜 # 10 RECH-1560)의 승인의 지침을 따랐다. 사용 된 재료 및 방법에 대한 상세한 정보는 표 1에 제공된다.
1. 마취
수술 2. 개요
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38 임신 한 시간 일자 암양은 임신 128 ± 2 일째 계측 하였다 (DGA, ~ 0.88 임신, 용어 145 DGA) 동맥, 정맥 및 양수 카테터 및 심전도 (ECG) 멸균 전신 마취하에 기술 (에웨어 모두와 태아와 전극 ). 트윈 임신의 경우 태아가 큰과 palpating intertemporal 직경 추정에 기초하여 선택되었다; 대안 적으로, 계측되는 태아 어떤 전위 바이어스를 피하기 위해 무작위로 선택 될 수 있거나 또는 두 태아는 기능화 될 수있다. 절차의 총 지속 기간은 124 ± 27 분이었다. 계측되는 태아 상체 부 92 ± 19 분 동안 자궁 밖에 남아 있었다. 계측 암양의 대부분은 F2 동물이었다. 그들의 댐은 F1 (국경 레스터 * 로마노프)이고 폐하는 햄프셔 램이었다; - 국경 레스터 (25 %) - 로마노프 (25 %) = HABLRV 햄프셔 (50 %)을 다음과 같이 그들은 교차했다.
대표 산모와 태아의 생리수술 및 계측시 특성은 ...
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만성 계측 비 마취 태아 양 : 마취 및 수술 절차는 태아의 생리 및 병태 생리 연구를위한 동물 모델을 확립 필요가되게됩니다.
프로토콜 내에서 네 가지 중요한 단계가 강조되어야한다. 우선, 모체 플랭크를 통해 카테터 및 전극을 통과 : 이것이 내부 장기 손상을 방지하기 위해 한 번 수행하는 것이 중요하다. 둘째, 태아 exteriorizing 이전 uterotomy 운영 사이트 고정이 방지하거나 양수 및 자궁 폐쇄하기 전 양막의 후속 봉합의 손실을 최소화하기 위해 중요하다. 셋째, 동맥 카테터 : 태아 양 동맥은 약 1-2 mm 직경과 경험이 풍부한 외과 의사에 대한 카테 테르를 꽂다하기 때문에 어렵지 않다; 두 외과 의사의 팀은 프로 시저의 전체 길이를 최소화하기 위해 시간을 절약하는 데 도움이 작업에서 최고의 빠른 수행한다. 넷째,주의 초uring 전에 양막에 태아를 반환하고 자궁을 폐쇄에 양수 공동의 모든 카테터 및 전극의 조직이 실수로 카테터의 잡아 당기거나 때문에 수...
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저자는 Molly Towell Perinatal Research Foundation, Canadian Institutes of Health Research (CIHR), and Fonds de Recherche du Québec – Santé (FRQS) (to MGF) 및 CIHR-Quebec Training Network in Perinatal Research (QTNPR) (to LDD)의 자금 지원을 감사하게 생각한다.
저자는 기술 지원을 해준 Esther Simard, Marco Bosa, Carl Bernard 및 Carmen Movila에게 감사를 표합니다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
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| Tranqui Ved 주사 (xylazine 100 mg/ml) | Vecdo | NDC 50989 - 234 - 11 | 최종 Dos는 10 mg/kg |
| 반응성 오렌지 14 | 입니다.Sigma - Aldrich | R - 8254 | |
| Ringers Solution 구성 요소 | 솔루션은 95% O2 및 5% Co2로 가스 평형을 이루며, 최종 pH 7.4 | ||
| 염화나트륨 | Sigma - Aldrich | S7653 | 최종 농도: 118 mM |
| 염화칼 | Fisher Scientific | P217 - 3 | 최종 농도: 4.7 mM |
| 염화칼슘 이수화물 | Fisher Scientific | C79 - 500 | 최종 농도: 2.5mM |
| 인산칼륨 일염기성 | Fisher Scientific | P -285 | 최종 농도: 1.2mM |
| 황산마그네슘 | J.T. Baker | Jan-00 | 최종 농도: 0.57mM |
| 4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-에탄술폰산(HEPES) | Fisher Scientific | BP 310 - 500 | 최종 농도: 5.95g/L |
| 포도 | 시그마 - Aldrich | G8270 | 최종 농도 : 5.5 mM |
| LifeWindow | Digicare Biomedical Technology | ||
| CED 생체 증폭기 및 ADC 장치 | Cambridge Electronic Design Limited, Unit 4, Science Park, Milton Road, Cambridge CB4 0FE ENGLAND. | 바이오 앰프 : 1902; ADC: 마이크로1401; 데이터 수집 소프트웨어: Spike 2, V7.13 | |
| Neurolog 아날로그 신호 생체 증폭기 | Digitimer Ltd 37 Hydeway Welwyn Garden City Hertfordshire, AL7 3BE, England | NL108A | |
| ABL800Flex | Radiometer Canada; 200 Aberdeen Dr, London, ON N5V 4N2 | ||
| Eppendorf 5804R | Eppendorf Canada; 2810 Argentia Road, #2 Mississauga, Ontario, L5N 8L2 | ||
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