이 기사에서는 다양한 심박수에서 압력/부피 분석을 통해 쥐의 좌심실 기능을 측정하는 방법에 대해 설명합니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
이 논문에서
요약
초록
인간의 심장 질환을 모방 동물 모델은 잠재적 인 치료 전략을 테스트하기 위해 만들어졌습니다. 이러한 전략을 평가의 핵심 구성 요소는 심장 기능에 미치는 영향을 조사하는 것입니다. 생체 내 심장 역학 (예를 들어, 심 초음파, 압력 / 볼륨 관계 등)에서 측정하는 여러 가지 기술이있다. 심장 초음파 검사에 비해, 도관을 통한 실시간 좌심실 압력 / 체적 분석 LV 함수를 평가하는데 더 정확하고 통찰력. 또한, LV의 압력 / 체적 분석 순간적 수축력 (예를 들면, β 아드레날린 자극)과 병리학 욕설 (예, 허혈 / 재관류 손상)의 조작시 변경 사항을 기록 할 수있는 능력을 제공한다. 최대 이외에 (+ DP / DT) 및 최소 (-dp / DT) LV 압력 변화율, 몇몇 부하 독립적 인덱스 통해 LV 함수의 정확한 평가 (예를 들어, 엔드 수축기 혈압볼륨 관계 및 프리로드 recruitable 스트로크 작업)을 얻을 수있다. 심박수는 심박수의 증가는 심장의 출력 (즉, Bowditch 효과)를 증가시키는 주요 메커니즘되도록 LV 수축력에 큰 영향을 미친다. 실험군 간의 혈역학 이와 비교할 때, 그것은 유사한 심장 박동수를 가질 필요가있다. 또한, 많은 심근 병증 모델의 특징은 수축 예약의 감소이다 (즉, Bowditch 효과 감소). 따라서, 중요한 정보는 수축력에 심박수를 증가시키는 효과를 결정함으로써 얻을 수있다. 우리와 다른 데이터는 신경 세포의 산화 질소 합성 효소 (NOS1) 녹아웃 마우스 수축력이 감소했다고 설명했다. 여기서 우리는 NOS1 녹아웃 마우스 모델을 이용하여 심박수를 증가와 LV 압력 / 체적의 측정 방법을 설명한다.
서론
심장의 목적은 유기체의 대사 요구에 부응하기 위해 몸 전체의 혈액을 펌핑하는 것이다. 이러한 요구는 지속적으로 (운동을하는 동안 예를 들어,) 변동되기 때문에, 마음 (즉, 심 박출량을 증가)에 적응해야합니다. 마음이 위업을 달성하기 위해 다양한 경로를 고안했다. 마음이 달성의 주요 방법으로는 심장 박동의 증가 (즉, Bowditch 효과) (1)를 통해입니다. 즉, 하나의 심박수가 증가함에 따라,이 수축의 증가와 심 박출량의 증가를 초래한다. 따라서, 심장 기능은 심장 박동에 따라 상당히 좌우된다. 불행히도, 심장 질환 (예를 들어, 심근 경색, 비대 등) 나쁨 심장 기능의 결과가있는 심장 따라서 신체의 대사 요구를 충족 할 수 없을 것이다. 심장 질환은 서구 사회에서 이환율과 사망률의 주요 원인입니다. 많은 사람 cardiomy 요점을 되풀이 동물 모델opathies 분자 메커니즘을 조사하고 잠재적 인 치료를 테스트하는 데 사용됩니다. 치료가 가능한있을 수 있습니다 경우 이러한 메커니즘을 분별하고 결정하기 위해, 연구자들은 생체 내에서 심장 기능을 평가해야합니다.
그러나, 이들 파라미터는 후 부하, 예압 및 심박수에 크게....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
참고 :이 동물 프로토콜은 오하이오 주립 대학 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)에 의해 승인되었다. 이 절차는 경동맥의 내경이 카테터를 삽입하기에 충분히 큰 경우 어느 마우스에 사용될 수있다. 16g (이전 2 ~ 개월) 위에있는 마우스를 사용합니다.
1. 도관을 위해 마우스를 준비
- 살균 주머니에있는 모든 수술 장비 및 소모품 인감. 오토 클레이브 기계 파우치 소독. 절차를 통해 멸균 필드를 유지하고 멸균 장갑을 착용하십시오.
- 복강 내 주사하여 케타민 (55 ㎎ / ㎏) 플러스 자일 라진 (15 ㎎ / ㎏)와 쥐를 마취.
참고 : 모든 절차는 다양한 심박수에서 모두 압력 / 볼륨을 측정하고 ESPRV 미만 20 분 소요됩니다. 추가 시간이 필요한 경우 (즉, 30 분 이상), 마취 추가 ¼ 복용량마다 30 분을 준다. - 전방 R에 머리를 제거및 제모 로션 (예를 들어, 나이 르)를 사용하여 목과 가슴 영역은 발포체 egion 플랫폼으로 마우스의 사지 테이프. 발가락 핀치에 의해 깊은 마취의 상태를 확인합니다.
- 신체 온도 (37 ± 1 ° C의)를 모니터링하고, (외과 드레이프와 플랫폼 사이에 위치) 열 조절 가열 ....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
좌측 심실 내로 카테터의 적절한 삽입 적절한 압력 및 부피 값을 달성하는 중요한 단계이다. LabChart 프로 7을 이용하여,도 1에 도시 된 카테터가 심실로 갈수록 동맥 압력 파형 (형상 및 값)의 변화.
좌측 심실 내로 카테터의 적절한 삽입 후, 압력 (P)과 부피 (V)를 PV 루프를 생성하는 데 사용될 것이다 얻어진 값 (도 2에 도시 됨).
이들 압력 값을 이용하여, 수축을 변경 메커니즘을 조사 할 수있다. 의 일례는도 3에 보여진다 방법 압력 및 심장 박동수가 증가함에 따라 부피 변화. 확장기 및 수축기 LV 볼륨이 감소하면서이 예에서, 300 내지 600 비트로부터 심박수를 증가 / 분, LV 압력은 80 ~ 100 mmHg로 증가했다. 도 4에 도시 된 심박수는 압력 개발 (DP.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
수축의 신뢰할 수있는 측정을 얻기 위해이 기술에 대한 중요한 단계는 라스베가스에 적절한 카테터 위치입니다. 좌심실이 수축 할 때 카테터가 제대로 배치되지 않은 경우 벽은 불규칙한 모양의 태양 광 발전 루프를 일으키는 원인이 매우 높은, 생리하지, 압력 값의 결과로 카테터 연락 할 수 있습니다. 필요한 경우, 카테터는 정확한 배치를 달성하기 위해 회전 될 수있다. 이 기술의 또 다른 중요한 단계는 마우스가 적절한 마취를받은 있는지 확인하는 것입니다. 마우스를 마취를 초과하면, 이는 심장 기능을 크게 감소한다. 심박수와 마우스 덜 ~ 250 비트 / min으로 마취 동안 고려 될 수있는 것보다. 또한, 마우스 심장 펌프 혈액의 부피가 곤란 정확한 볼륨을 얻을하게 작다. 그것은 각 마우스의 볼륨을 조정하는 것이 중요하다. 볼륨 조정을 위해, 우리는 큐벳 교정 기법을 설명했다. 즉 또한 볼륨을 교정하는 데 사용되는 추가 방법 (있다,유동 프로브 하행 흉부 대동맥에서) 10을 이용하여 스트로크 체적 .......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
경쟁하는 재정적 이해관계가 없습니다.
감사의 글
이 연구는 NIH 보조금 HL091986(JPD) 및 HL094692(MTZ)의 지원을 받았습니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Xlyzine 100 mg/ml | 아나 세드 | 4821 | |
| 카타민 50 mg/ml | Ketalar | 310006 | |
| Heparin | APP 제약 | 6003922 | |
| 4-0 실크 스레드 | 외과 전문 | SP102 | |
| 6-0 실크 스레드 | 외과 전문 MBKF270 | ||
| 겸자 | 정밀 과학 도구 | 11251-10 | |
| 곡선 겸자 | 정밀 과학 도구 | 11274-20 | |
| 가위 | Fine Science Tools | 14090-09 | |
| Vascular clamp | Fine Science Tools | 18555-03 | |
| 현미경 | 세계 정밀 기기 | PZM-3 | |
| 압력 카테터 | Millar 기기 | SPR-839 | |
| 압력 및 볼륨 시스템 | Millar 기기 | MPVS-300 | |
| PowerLab4/35 | AD 기기 | N12128 | |
| LabchartPro 7 | AD 기기 | ||
| 온도 컨트롤러 | CWE | TC-1000 | |
| 자극기 | 잔디 | SD-5 | |
| 멸균 장갑 | 마이크로 터치 | 1305018821 | |
| 헤어 리무버 로션 | Nair | ||
| Betadine 수술 스크럽 | 수의학 | NDC 6761815401 | |
| 알코올 | Decon Laboratories | 2801 | |
| Bovie 소작기 | Bovie | AA29 | |
| 1 ml 주사기 (26 G 바늘) | BD | 8017299 |
참고문헌
- Janssen, P. M. Myocardial contraction-relaxation coupling. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 299, H1741-H1749 (2010).
- Roman, M. J., Devereux, R. B. Comparison of noninvasive measures of contractility in dilated cardiomyopathy. Echocardiography. 8....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
