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방법 논문

쥐 허혈성 피부 상처 모델의 데모

22.7K 조회수

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DOI:

10.3791/52637

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2015년 4월 1일

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

쥐가 크기 때문에, 가용성, 오히려 유순 한 행동에, 몇 년 동안 연구 모델로 이용되고있다. 이 프로토콜의 목적은 만성 상처의 병태 생리에 대한 통찰력을 제공하는 허혈성 상처 치유 피부 모델로서 쥐를 이용하는 것이다.

초록

인간의 만성 상처에 대한 성향 등으로 인해 부동에 당뇨병과 장애인 심혈관 기능 및 누그러 압력 노화, 질병 상태에 따라 증가한다. 동물 모델은 만성 상처의 복잡성의 이해를 발전하기위한 목적으로 이러한 조건을 모방하는 것을 시도 개발되었다. 본 명세서에 기재된 모델은 허혈성되고 만성 상처 표현형 (혈관 감소, 염증 및 지연 증가 상처 봉합)을 닮은 상처 발생 혈류 감소 연장을 허용 래트 피변 허혈 모델이다. 그것은 컨트롤 등의 플랩 측 방향의 중앙 배치의 2 허혈성 상처와이 비 허혈성 상처와 bipedicled 등의 플랩으로 구성되어 있습니다. 이 피변 허혈 모델 신규 추가 배리어 및 혈관 재 형성을 방지 및 상처 치유로 수축을 감소시키기 부목로서 기능 플랩 아래에 실리콘 시트의 배치이다. 에도 불구하고때문에 사람에 비해 자신의 매우 독특한 해부학 및 생리 학적 차이에 대한 연구를 상처 치유에 대한 쥐를 사용하는 논쟁 (즉, panniculus의 카르노 서스 근육, 짧은 수명의 존재, 모낭의 수가 증가하고, 감염된 상처를 치유 할 수있는 능력) 이 모델에 사용 된 수정은 이전에 개발 된 허혈성 피부 플랩 모델에 귀중한 대체합니다.

서론

효과적인 약물 개발 및 다른 상처 치유 치료제는 인간의 치료 1 동물 모델에서 연구 결과를 번역하는 알려진 문제점에도 불구하고, 생체 내 모델에서 적절한 필요합니다. 다음은 병리 기전 상처 치유의 추가적인 이해를 조사하는 허혈성 피부 상처 치유 쥐 모델의 사용을위한 프로토콜의 상세한 설명이다. 쥐의 종, 종종 넓은 가용성, 크기로 인해 고용하고 절개 및 절제 상처, 이미징 및 조직 2 컬렉션에 적합한 피부 영역을 제공하기에 충분히 큰 같이 유순 자연 상처 치유 연구에 사용됩니다. 그러나 쥐가 느슨한 피부 동물 언급되면서, 쥐와 인간의 피부 해부학 적 차이가 심하게 고려해야한다. 이 독특한 특성은 래트 피부의 폐쇄 w 크게 기여하기보다는 오히려 상피화, 상처 수축 허​​용ounds 2. 또한, 쥐의 피하 panniculus 카르노 서스 근육의 존재는, 수축 모두 콜라겐 형성에 의해 3,4- 치유에 기여한다. 이러한 매우 중요한 해부학 적 차이는 허혈 래트의 피부 상처 모델의 개발을 고려하고, 특정 변형 상처 수축을 감소시키고 panniculus 카르노 서스의 근육 (5)의 영향력을 감소시키기 위해 실행되었다.

당뇨병 성 족부 궤....

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프로토콜

참고 : 아래에 제시된 모든 동물 절차에 대한 승인은 사우스 플로리다의 동물 관리위원회 (IACUC)의 대학에서 얻은 동물 복지법 및 실험실 동물의 관리 및 사용을위한 설명서의 모든 요구 사항을 준수했다.

실리콘 시트 및 수술 도구 1. 준비

  1. 규격에 맞게 자르는 스트립 (10.5 cm X 3.0 cm) 0.01 두께, 의료용 실리콘 시트를 비는 강화 및 오토 클레이브를 사용하여 소독.
  2. 청소하고 (수술 중 멸균 필드를 만들 가위, 집게와 커튼이나 수건) 적절한 수술 도구를 소독.

2. 실험 동물

  1. 성인 남성 또는 상업적 개종에서 얻은 250-350g 범위에 무게 암컷 쥐를 사용합니다. 세 래트가 이용되는 경우, 더 잘 수술 후 생존을 보장하기 위해 ≥350 g이어야한다. 모든 실험의 시작에 앞서 적어도 모든 동물을 순응먹이와 물은 마음대로 먹게하면서 12 시간 명암주기의 표준 조건 하에서 칠일.

3. 마취, 수술 전 진통과 수술 준비

  1. 유도 챔버를 통해 3 % -4 %를 이소 플루 란을 사용하여 전신 마취를 유도하고 피부 준비 및....

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결과

효율적으로 수행 한 경우 쥐의 허혈성 상처 치유 모델 프로토콜은 동물 당 약 20 분 소요됩니다. 이전 그림 1G에 나타낸 바와 같이 나타납니다 모델을 드레싱의 응용 프로그램. 그것은 bipedicled 플랩과 상처 안에 허혈성 있는지 확인하는 것이 중요 할 것입니다. 상처의 수준에서 피하 산소 장력 (PSCO 2) 두 허혈성 상처 사이의 피하 조직에 폴라 전극을 배치하여이 모델 5의 검증으로 측정되었습니다. PSCO 2 값은 비판적으로 허혈성 범위 (20 ~ 40 mmHg로)에 있었다. 이 모델의 개발 이후 LDI의 사용이 점점 혈류를 측정하기 위해 사용되었으며,이 기법은 bipedicled 플랩 허혈 상태에 대한 적절한 정보를 제공 할 것이다.

간략하게, LDI 기술은 광섬유 프로브에 의해지지 레이저 광의 빔의 방출에 기초한다. measuriNG 깊이는 레이저 광의 조직 특성 및 파장.......

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토론

쥐의 상처 치유는 종종 인해 감염된 상처와 interanimal 변화 (5)의 높은 비율을 치유 할 수있는 능력에 논쟁의 대상이되어왔다. 개발 중 모델의 원래 목표 중 하나는이 편차를 감소하는 것이었다. 특정 위치와 상처의 수를 감소 플랩의 폭에 대한 수정이, 실리콘 시트 및 소개 (일관성 cranio-꼬리 위치와 플랩을 중심으로)이 목표를 달성했다. 수축에 의해 상처 치유는 또한 인간에서와 같이, 측정 된 결과이고, 상피화 및 치료에 의해 감소​​되었다. 쥐의 다른 균주에 모델의 적응은, 즉, F344도 스프 라그 돌리 래트를 관찰하여 성공적인 검증 및 허혈의 정도를 재생했다. 전반적으로이 모델에 필요한 수술 기법 (조직 검사, 봉합 상처 절제술) 쉽게 대부분의 학생들과 제한된 수술 경험이있는 기술자가 취득된다.

_content은 "> 여러 수술을 수행하는 동안, 그것은이 실리콘 시트 배치 5 플랩 상승 이전에 허혈성 상처를 만드는 것이 .......

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공개 사항

저자는 공개할 것이 없습니다.

감사의 글

저자는 사우스 플로리다 대학교 외과(Mack Wu, MD, PhD)의 자금 지원에 감사를 표합니다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Sil-Tec 의료용 시트테크니컬 프로덕츠 Inc.500-3비강화, 두께 0.01 인치
미니 아이리스 가위, 8 cm, 곡선형, SSWorld Precision Instruments#503671
Ethilon 나일론 봉합사Ethicon1964G검정, 크기 4.0, PC-3 16  mm 바늘 (3/8 원)
레이저 도플러 이미저무어 인스트루먼트moorLDI2-IR표준 혈류 이미저: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8
ImageJNIH무료 다운로드http://rsb.info.nih.gov/ij/
MastisolHenry ScheinCat # 7289210Fisher Scientific NC9774929
TegadermMedical Specialties 3M1624W피셔 사이언티픽 NC9922128

참고문헌

  1. Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. Animal models of wound repair: Are they cutting it. Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).
  2. Dorsett-Martin, W. A. Rat models of skin wound....

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