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방법 논문

기증자의 간을의 현지 외 정상 체온 기계 관류

11.7K 조회수

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DOI:

10.3791/52688

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2015년 5월 26일

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이 논문에서

요약

여기에서 우리는 기증자 간 이식의 산소 전 현장 기계 관류를 설명하는 프로토콜을 제시한다. 이 문서에서는 조달 및 기계 관류에 대한 간 이식을 준비, 관류 액, 주요 관류 시스템을 준비하고 간 이식의 산소 정상 체온 기계 관류를 수행하는 단계 프로토콜에 의해 단계가 포함되어 있습니다.

초록

종래의 정적 저온 보존 (0-4 °의 C)와 대조적으로, 비원 기계 관류 도너 간 더 잘 보존을 제공 할 수있다. 장기 연속 관류 장기 품질을 향상시킬 수있는 기회를 제공하고, 이식하기 전에 공여자의 간 계외 생존력 평가를 허용한다. 이 비디오 기사는 예에 대한 단계 프로토콜에 의해 단계는 간동맥과 문맥의 연속 관류의 압력과 온도 조절 박동성 혈류를 제공하는 장치를 사용하여 인간의 기증자 간의 정상 체온 기계 관류 (37 ° C의)를 현장 제공합니다. 관류 유체는 두 개의 중공 사막의 산소 공급에 의해 산소를 함유하고, 온도 10 ° C, 37 ° C 사이에서 조절 될 수있다. 재관류 동안, 간 대사 활성뿐만 아니라, 부상의 정도는 관류 액으로부터 취한 샘플의 생화학 적 분석에 의해 평가 될 수있다. 기계 관류는 매우 유망한 도구입니다이식에 적합한 간 수를 늘릴.

서론

간 이식의 장기 보존 현재의 방법으로 세척하십시오 (예 : 위스콘신 대학교 솔루션 또는 히스티딘 - 트립토판 - 케 토글 루타 레이트 솔루션 등) 저온 (0-4 ℃) 보존 유체 기증자 간 후속 저장합니다. 이 방법은 정적 냉장 (SCS)라고합니다. 0-4 ℃에서의 간 대사 속도는 매우 낮지 만, 여전히 SCS 일 동안 제공 될 수없는 산소 0.27 μmol / 분 / g의 간 조직에 대한 요구가있다. SCS의 종래의 방법에 따라서, 도너 간의 (추가) 어느 정도의 손상을 초래한다. 보존 부상이 금액은 좋은 품질의 기증자의 간에서 문제가되지 않지만, 이미 기증자에 부상 어느 정도의 고통을 최적 간에서 중요하고 제한 요인이 될 수 있습니다. 이 때문에, 품질이 만족스럽지 못한 소위 확장 된 기준 공여체 (ECD) 간으로 간 자주 위험 O 같은 이식 거부F 조기 이식 실패가 너무 높은 것으로 간주된다. 지연 이식 기능, 주요 비 기능, 비 문합 담도 협착 (NAS)의 높은 비율은 순환 죽음 (DCD), 이전 기증자 또는 steatotic 이식 2의 수신자 후 기부에서 간의받는 사람에 기재되어있다. NAS는 간 이식 후의 이환 및 사망률의 주요 원인이다. NAS는 모두 외의의 뜻과 간내 기증자 담관에서 발생할 수 췌관 내 담즙 슬러지와 주조 형성 3....

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프로토콜

이 프로토콜은 대학 의료 센터 흐로 닝언의 의료 윤​​리위원회 (Medisch Ethische Toetsingscommissie), 네덜란드에 의해 승인되었습니다.

재관류 유체의 1. 준비

주 :이 프로토콜에 따라 정상 체온 기계 관류 제조 관류 액의 총 부피가 2233 mL로하고 관류 유체의 타겟 삼투압은 mOsmol / L (302)이다.

  1. 표 1에 기재된 관류 유체의 성분으로부터, 인간 충전 적혈구, 혈장 분리 냉동 인간 알부민을 유지한다. 멸균 방식으로 구성 요소의 나머지 부분을 혼합하고 수술실 (OR)에 교통 멸균 가방에서 솔루션을 저장합니다. 문화 실에서 멸균 환경 (이상적으로 좋은 제조 연습 시설) 또는 층류 캐비닛에서이 작업을 수행합니다.
구성 요소들 양
포장 적혈구 (적혈구 용적률 60 %)

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결과

다양한 이유로 인해에 이식 거부했다 (12) 인간의 간은 기증자 가정의 연구에 동의를 얻은 후 사용 하였다. 공여 특성을 표 2에 기재되어있다. 인간 공여자 간 6 시간 동안 관류 normothermically이 논문에 설명 된 프로토콜을 이용하여. 간 이식의 품질 간 관류 (- D도 2a)의 거시적 균질성을 모니터링하여 평가 하였다. 간의 혈역학는 동맥 및 포털 흐름의 변화를 모니터링하여 평가 하였다. 간동맥 및 문맥 흐름 및 흐름의 후속 안정화 초기 증가는 256 ± 16 ml / 분의 평균 동맥압 흐름의 결과가 관찰되었다 (평균 ± SEM) 및 748 ± 34 ml의 평균 문맥 흐름 / 분 관류 (그림 3A)시 간 안정적인 혈역학을 나타내는, 6 시간에서 (± SEM을 의미). BL동맥 관류 액으로부터 회수 관류 샘플 OOD 가스 분석은 관류 액에서 산소화의 상태를 모니터링하기 위해 사용되었다. 4 L의 흐름에 carbogen (9.......

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토론

이 동영상은 간동맥과 문맥을 통해 압력 제어 듀얼 관류을 가능하게하는 장치를 사용하여 인간의 기증자 간의 정상 체온 기계 관류에 대한 단계 프로토콜에 의해 단계를 제공합니다. 이 프로토콜에 따라 동안 관류 시스템의 기술적 장애는 발생하지 않았고, 모든 이식 잘 관류 잘 산소화이었다. 전 현장 관류 간 안정적인 혈역학을했고, 담즙 16, 17의 생산에 의해 정의 된대로, 대사 활성했다.

이것은 인간의 기증자 간의 기계 관류에 대한 잘 확립 된 프로토콜입니다. 이 기술은 SCS (21)의 종래의 방법에 비해 여러 가지 잠재적 인 이점이있다. 기계 관류 장기 보존의 의도 된 엔드 포인트에 따라 다른 온도에서 기증자 간 이식을 보존 할 수있는 기회를 제공한다. 저체온 산소 기계 관류 더 나은 관류 및 microvasculture의 세척 아웃 그가 수도를 제공합니다LP는 아데노신 삼인산 (ATP) 재생을 자극하여 세포 내 에너지의.......

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공개 사항

이 논문의 저자는 공개 관심의 충돌이 없습니다.

감사의 글

이 연구 작업은 재정적으로 모든 네덜란드, Innovatief Actieprogramma 흐로 닝언 (IAG-3), 월 Kornelis 드 콕에는 Stichting과 Tekke Huizingafonds에서 제공하는 보조금에 의해 지원되었다. 우리는 잠재적 인 폐기 간을 확인하고 동의서를 얻기위한 모든 네덜란드 이​​식 코디네이터에 감사하고 있습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
간 보조장기 보조OA. Li.Li.140관류 장치
간 보조 일회용 패키지장기 보조OA. Li.DP.540일회용 세트 및 캐뉼러
메러디스 No.8Vygon Nederlands 변환기1362082담관 캐뉼라
인간 알부민 200 g/L / ALBUMANSanquin15522598100 ml
수정된 비경구 영양Baxter Nederland B.V.N14G30E7.35ml
인퓨전용 종합비타민 / CERNEVITBaxter International Inc.98009277 μ l
주입을 위한 집중된 미량 원소/NUTRITRACEB. Braun Melsungen AG148113327.35 ml
Metronidazole 5 mg/mlBaxter Nederland B.V.9818188240ml
세파졸린 / 세르바졸린산도즈 BV156113372 ml
속효성 인슐린다양한 공급 업체20 ml
칼슘 글루 비오 네이트, 정맥 주사 용액 10 %, 137.5 mg / mlSandoz9703869540 ml
멸균 H 2< / sub>OFresenius Kabi Nederland BV9808445351.3 ml
NaCl 0.9%Baxter Nederland 변환기15262510160ml
헤파린 5,000 IE/ml IV 투여용LEO Pharma B.V.980261784 ml
중탄산나트륨 8.4%B. Braun Melsungen AG97973874양은 pH에 따라 다릅니다
포장 적혈구(SAGM)혈액 은행(Sanquin)N0012000750ml
신선 냉동 혈장혈액 은행(Sanquin)N04030A0/N04030B0900ml

참고문헌

  1. Plaats, A., et al. Hypothermic machine preservation in liver transplantation revisited: Concepts and criteria in the new millennium. Ann. Biomed. Eng. 32 (4), 623-631 (2004).
  2. op den Dries, S., Sutton, M. E., Lisman, Y., Porte, R. J.

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