마우스 나이브 CD4<sup&gt; +</sup&gt; T 세포의 분리 및<em&gt; 시험관</em&gt; T 세포 하위 집합으로 차별화

Stephanie Flaherty; Joseph M. Reynolds

doi:10.3791/52739

이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.

방법 논문

마우스 나이브 CD4

53.7K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/52739

⸱

2015년 4월 16일

Stephanie Flaherty¹ , Joseph M. Reynolds¹

¹Department of Microbiology and Immunology, The Chicago Medical School, Rosalind Franklin University of Medicine and Science

이 논문에서

요약

순진한 CD4⁺ T cell은 활성화 시점의 환경에 따라 다양한 subset으로 분극화합니다. naive CD4⁺T cell을 다양한 effector subset으로 분화하는 것은 T cell receptor stimuli 및 specific cytokine signal의 추가를 통해 in vitro에서 달성할 수 있습니다.

초록

항원 미숙(순진) CD4⁺T 세포는 MHC class II에 제시된 동족 항원의 T 세포 수용체(TCR) 인식 시 효과기 하위 집합으로 확장 및 분화를 겪습니다. TCR 활성화 시 환경에 존재하는 사이토카인 신호는 미성숙한 CD4⁺T 세포의 effector 운명을 결정하는 주요 요인입니다. naive T cell 활성화 중 cytokine 환경은 복잡하고 in vivo에서 중복 및 반대 신호를 모두 포함할 수 있지만, in vitro에서 naive CD4⁺T cell 활성화 중 다양한 cytokine 조합을 추가하면 특징적인 cytokine 및 transcription factor 발현을 가진 effector T helper 계통의 확립을 쉽게 촉진할 수 있습니다. 이러한 분화 실험은 특정 CD4⁺T helper subset의 발달을 촉진하거나 억제하는 것으로 여겨지는 표적의 평가를 위한 첫 번째 단계로 일반적으로 사용됩니다. 분화 과정 중에 신호 작용제, 길항제 또는 기타 사이토카인과 같은 매개체를 추가하는 것도 T 세포 분화에 대한 특정 표적의 영향을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 여기에서는 마우스에서 naive T cell을 분리하기 위한 기본 프로토콜과 in vitro에서 naive cell을 다양한 T helper effector 계통으로 분극화하는 데 필요한 후속 단계를 설명합니다.

서론

별개의 계통 또는 CD4 ⁺ T 도우미의 부분 집합의 개념 (목) 세포는 20 ^{세기 한} 후반 이후 주변왔다. 세포 증식 및 세포 목 이펙터로 최종 분화의 여러 라운드에서 공동 자극 신호 결과의 존재 동족 항원의 인식. 이 과정에서 생성되는 토륨 셀의 ^유형이 활성화 중에 본 사이토킨 환경에 의존한다. 우선, 토륨 나이브 T 세포는 세포 수용체 (TCR) 활성화, 보조 자극 CD28 결찰 및 사이토 카인이 다음과 같은 별개의 신호 계통에 편광 생각되었다. 1 형 헬퍼 세포 (TH1)는 사이토킨 IFNγ 그들의 이펙터 생산뿐만 아니라 분화 과정 중에 ^3,4- IL-12 시그널링 그들의 요건을 특징으로한다. 결국 차별화 된 Th1 세포가 가장 특유 B를 특징으로하는 유전 적 프로파일이 발견되었다Y TH1 유전 적 프로그램 ^(5)의 마스터 조절기 간주되는 T 상자 가족의 전사 인자의 발현, Tbx21 (T-내기). 또한, IL-12뿐만 아니라 IFNγ로는 T-내기 식 ^{6, 7을} 홍보 할 수 있습니다. 면역 응답하여, Th1 세포는 세포 내 병원체뿐만 아니라자가 면역 염증 강한 프로모터 대 숙주 방어에 중요하다. 대조적으로, 2 형 헬퍼 세포 (은 Th2)은 그 개....