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방법 논문

알고리즘의 개발은 원격 측정 장치를 사용하여 높은 척수 손상과 동물의 자율 Dysreflexia의 종합적인 연구를 수행하는

7.6K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/52809

⸱

2016년 7월 29일

 ,  ,  , 
1International Collaboration on Repair Discoveries (ICORD), Faculty of Medicine, University of British Columbia, 2Department of Medicine, Division of Physical Medicine and Rehabilitation, University of British Columbia, GF Strong Rehabilitation Centre

이 논문에서

요약

원격 측정 장치의 카테터는 복부 대동맥에 이식되어 고흉부 척수 절개 전후 동물로부터 박동별 혈류역학적 데이터를 지속적으로 수집합니다. 새로운 JAVA 소프트웨어를 사용하여 혈역학적 매개변수와 자율신경 반사 장애의 자발적 에피소드의 빈도 및 강도를 분석했습니다.

초록

척수 손상(SCI)은 신체 및 자율신경 기능 장애를 특징으로 하는 쇠약해지는 신경학적 상태입니다. 특히, 흉곽 중간 수준 이상의 SCI는 종종 손상 수준 이하의 유독성 또는 무독성 체세포 또는 내장 자극에 의해 유발되는 자율신경 반사장애(AD)라고 하는 잠재적으로 생명을 위협하는 고혈압 상태로 이어질 수 있습니다. 알츠하이머병을 유발하는 가장 흔한 원인 중 하나는 골반 내장이 팽창하는 것인데, 이는 방광 및 장 팽창 또는 배변 시 발생합니다. 이 프로토콜은 심혈관 매개변수의 변동과 자발적으로 발생하는 AD 이벤트의 수, 심각도 및 기간을 연구하기 위해 JAVA 플랫폼 소프트웨어용으로 개발된 새로운 패턴 인식 알고리즘을 제공합니다. 이 소프트웨어는 흉부(T3) 완전 절편 전후의 의식이 있는 동물과 구속되지 않은 동물의 원격 측정 기록에서 추출한 수축기 혈압(SBP) 및 심박수(HR)와 같은 혈류역학 데이터에 패턴 인식 알고리즘을 적용할 수 있습니다. 이 소프트웨어를 사용하면 최소한의 실험자 편향으로 혈류역학적 매개변수와 AD 에피소드를 감지하고 분석할 수 있습니다.

서론

자율 dysreflexia (AD)는 자궁 경부 또는 높은 흉부 세그먼트에서 급성 또는 만성 척수 손상 (SCI) 후 개인의 생명을 위협하는 응급 상황이며 일반적으로 지속적인 고혈압과 서맥 1의 에피소드를 특징으로한다. AD는 주로 일반적으로 교감 신경 활동 및 혈관 톤 1-4을 제어하는 척추 교감 신경절 신경 세포에 척 주상 센터에서 입력을 제공 척추 경로를 내림차순의 중단에 의해 발생합니다. AD 에피소드 300 mmHg로 최대 수축기 혈압 스파이크 (SBP)을 특징으로하고 있습니다 발작, 뇌출혈, 심근 경색, 심지어 죽음에 5-8으로 이어질 수 방치합니다. 유해 및 비 유해 자극의 다양한 장과 방광 팽만, 경련, 욕창, 요로 방광 카테터 또는 의원 절차 9-12 포함 AD의 트리거 역할을합니다.

RESP에서 AD의 시간적 개발SCI에 온세 두 사람 9 및 동물 모델 (13, 14)에서 조사되었다. 일반적으로 이러한 연구는 (즉, 요역 동학은 사람이나 동물의 대장 팽창에 음경 vibrostimulations)는 AD의 시간적 개발을 결정하기 위해 '유도 AD'방법을 사용했다. 이러한 접근법은 AD의 개발 시간의 정확한 결정을 배제 할 수있다 절연 시간 지점에서 반복적으로 평가에 대한 필요성에 의해 제한된다. 인간에서 24 시간 혈압 모니터의 사용은 일련의 혈압 측정은 미리 결정된 간격으로 이루어질 수있다. 이 기술은 최근 만성 SCI 환자에서 자발적으로 발생하는 AD를 모니터링하기 위해 이용되었다. 동물 모델에서, 고체 압력 변환기 점점 만성 이길별로 이길 동맥 혈압 모니터에 사용되고있다. 최근 Rabchesvky 등. (2012), 평균 동맥압 1 초 평균 추출하는 알고리즘을 개발 (MAP)을이동 평균 임계 15 비교 거라고. 자연 AD 이벤트는 10 mmHg로 또는 10 BPM 이상의 HR 드롭과 동시에 임계 값 이상의 큰 MAP 피크에 따라 특징했다.

다음은이 AD 탐지 알고리즘이 내장되어 새로운 JAVA 소프트웨어가 제공됩니다. 이 알고리즘은 동맥 혈압 (ABP)과 AD 자발적으로 발생하는 이벤트를 가리킨다 심박수 (HR)에 소정의 패턴을 검출함으로써 작동한다. 사용자는 반드시 '검출 알고리즘'이 쉽게 주목 특정 파라미터로 정의 할 수 있도록하는 소프트웨어에 대한 모든 입력 변수를 조정할 수있다. 이 소프트웨어는 또한 혈역학 적 매개 변수의 낮의 리듬 성이 (16)를 분석 할 수 있도록 주어진 시대에 ABP 및 HR을 dichotomize 할 수있다. 본 논문에서는, 상세한 설명은 원격 측정 장치를 이식하여 SCI 수술을 실시하는데 사용되는 수술 기법에 대해 설명한다. 전의amples은 또한 AD 감지 소프트웨어의 포스트 처리 기능에 대하여 어떻게 심혈관 기능이 제공되는 포스트 SCI를 변경된다. 비교 목적으로, 방법 및 결과가 결장 팽만라고도 AD 유도하는 방법에서 얻은 (CRD)도 도시되어있다.

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프로토콜

수컷 위 스타 (HSD : WI의 Wistar) 래트 나이 7 주째 및 300-350g의 무게는이 실험에 사용 하였다. 모든 래트를 12 시간 광 / 암주기에서 유지하고 표준 실험실 쥐 Chow 및 임의 량의 물을 받았다. 모든 실험 절차는 브리티시 컬럼비아 대학으로 케어에 대한 안내 및 사용 실험 동물의 동물 관리에 캐나다위원회 설립 승인 윤리 승인 확인 된. 수술과 동물의주의가 우리의 실험실에서 표준 절차 17 (외. 2010 램지)에 따라 실시 하였다.

동물의 1. 준비 : 외과 적 치료

  1. 원격 측정 장치의 주입
    참고 : 프로토콜이 구현 된 제조업체의 사양 및 장치의 주입과의 이전 경험에 따라 : 16
    1. 3 일간 enrofloxacin과 동물을 사전 처리, 하루에 한 번 (10 ㎎ / ㎏,의이 .c.) 사전에 동작.
    2. 수술 전에 케이지에서 9-13 시간을 고체 음식을 제거합니다. 소프트 다이어트 영양 식사 교체는이 기간 동안 제공 될 수있다.
    3. 유도 챔버 내의 4 % 이소 플루 란의 유도 량과 베인 회로를 이용하여 약 1.5 %의 이소 플루 란 (1.5 L / 분의 산소)의 유지 용량을 사용하여 동물을 마취. 동물 마취의 수술 비행기에 있는지 여부를 평가하기 위해 발가락 핀치 반사와 각막 반사를 사용합니다. 호흡 또는 (점막 창백한 즉, 매우 느린 호흡률과 모든게 완벽 할꺼야) 마취 깊이가 너무 높으면 평가 모니터링해야 즉, 동물을 나타내는 신속 얕은 호흡은 수술 적 단계의 마취에 없을 수도있다 (너무 낮음 ). 반복 수술 중 마취마다 약 5 분의 수술 평면의 모니터링 및 조정 이소 플루 란은 필요에 따라 복용량.
      참고 : 모든 수술은 무균 기술을 사용하여 수행됩니다 특히, 외과 의사 착용외과 수술, 모자, 마스크, 멸균 장갑. 오픈 gloving 절차는 관측 된 살균 기술을 사용하여 개방 수술기구를 포함하는 수술 용 멸균 팩과 동물이 수술을 시작하기 전에 드레이프이다. 수술 도구 팁 멸균 (최대 다섯 수술에 대한) 수술 사이에 뜨거운 구슬에 있습니다. 외과 스폰지와 거즈는 사용 전에 멸균한다. 수술하는 동안, 동물은 37 ° C로 유지 된 물을 순환 담요에 유지된다.
    4. 즉시 수술 전, 부 프레 노르 핀 (SC 0.02 ㎎ / ㎏)을 관리 할 수​​ 있습니다. 복합 진통제를 제공하기 위해 수술을하기 전에, 또한, 케토 프로 펜 (SC 5 ㎎ / ㎏)을 관리 할 수​​ 있습니다. 로컬 선 블록을 제공하기 위해 수술 직전 (SC 5 ㎎ / ㎏) 부피 바카을 관리 할 수​​ 있습니다. 복부를 면도하면, 적어도 1 분 동안 포비돈 요오드 다음 클로르헥시딘 및 70 % 에탄올의 면봉 (3 회)를 교대로 적용하고, 70 % 에탄올 (닦아 새롭게 문을 연 알코올마다)을 제거합니다. 피부의 보라고절개 라인의 중앙에서 시작하여 바깥쪽으로 선회 동심 방식으로 이루어진다 (않도록 "위로 / 앞뒤로"이동에 의해 면적을 오염하지 않음). 멸균 거즈 면봉을 사용하여 각 응용 프로그램 사이에 버린다. 이 과정은 동물 수술을 시작하기 전에 세 번 반복된다. 클리핑 및 수술 세정하는 동안, 이소 플루 란의 약 1.5 % 유지 용량 아래 베인 비 - 재 호흡 회로에 연결된 코 콘에 동물을 유지합니다. 마취의 수술 계획에 동물을 유지하기 위해 필요에 따라 이소 플루 란 레벨을 조정합니다.
    5. 근육과 복막이 장 노출을 통해 절단 5cm 길이 중간 선 복부 절개를합니다.
    6. 창자를 철회, (이 후방 복벽의 하행 대동맥을 노출됩니다) 링거 용액의 2-3 ml를 적신 멸균 수술 거즈로 장을 커버하고 자주 필요한 절차를 통해 조직의 탈수를 방지하기 위해 추가 링거와 촉촉한 유지 .
    7. 대동맥 주위 해부 및 홍채 spatulae을 이용​​하여 하대 정맥에서 대동맥을 분리 무딘.
    8. 신장 동맥에 바로 원위부 대동맥의 가장 바깥 쪽 외막 층의 주동이의와 꼬리 끝의 주위에 배치 합자 (8-0 모노 필라멘트 봉합사).
    9. 합자 간단히 폐색 혈액의 흐름을 들어 올리고 끝에 90 °에서 25 게이지 바늘 러와 함께 장골 분기에 1-2mm의 전방의 수준에서 대동맥에 구멍.
    10. 20 게이지 바늘을 사용하여 곡선 대동맥에 원격 장치의 카테터의 선단부를 안내합니다. 끝이 신장 동맥에 단지 말초이 있는지 확인 rostrally 사전
      1. 조직 접착제를 소량 사용하여 고정한다. 합자를 제거하고 카테터 또는 조직 접착제로 인해 더 혈류 폐색이없는 확인합니다.
    11. 4-0 실크 봉합사를 이용하여 복벽에 원격 장치의 본체를 고정. musc를 닫 4-0 Vicryl과 4-0 prolene의 봉합사를 사용하여각각 제작 및 피부.
  2. 텔레 메 트리 이식 수술 후 케어
    주 : 제 14 일 동안 수술 후 동물은 한번 상세한 모니터링 평가 일 이외에 적어도 3 회 매일 체크한다. (hunching, 경직을 포함하여 체중, 외모, 행​​동 / 활동, 배변, 피부 (통증 등 눈, 코, 앞 발 주위에 볼 수 증가 포르피린 생산, 얼굴 찌 표지판 등의 증상에 따라 평가된다) : 7 종류의 동물을 평가 , 절개 치유와 장액), 수화 호흡.
    1. 과일, 곡물의 구색, 부드러운 다이어트 영양 식사 대용으로 동물을 공급하고, 원격 측정 장치 주입 후 6 일 동안, 임의 량의 물을 제공합니다. 동물에 동작 첫날 게시물에 대한 원천 징수 규칙적인 고체 설치류 우 있어야합니다. 수술 후 외관시 처음 3 일 동안 가온 락 테이트 화 링거 용액으로 동물을 주입 (5 mL)을 피하탈수 증상. 동물의 평가에 따라 필요에 따라 링거 용액 (5 ㎖) 관리 (피부 텐트, 창백한 귀 / 점막의 징후) 아침과 저녁을 확인하는 동안.
    2. 수술 후 3 일간, 하루에 한 번씩 enrofloxacin (10 ㎎ / ㎏, 사우스 캐롤라이나) 및 케토 프로 펜 (5 ㎎ / ㎏, SC)를 관리 할 수​​ 있습니다. 수술 후 다음 3 일간 아침과 저녁 (즉, 매 12 시간) 동안 프레 노르 핀 (0.02 ㎎ / ㎏, SC)를 관리 할 수 있습니다. 통증 / 고통의 흔적이 언급하는 경우 프레 노르 핀의 중간 일 복용량 (0.02 ㎎ / ㎏, 사우스 캐롤라이나) 투여 될 수있다.
  3. 척수의 완전 절개
    참고 : 동물 T3 완전 절개 수술 전에 최소한 14 일 동안 원격 측정 이식 수술에서 회복하도록 허용합니다.
    1. SCI 수술 전에 3 일 동안 예방 enrofloxacin (10 ㎎ / ㎏, 사우스 캐롤라이나)과 사전 치료 동물.
    2. 전술 한 바와 같이 4 % 이소 플루 란의 유도 량에 따라 동물을 마취. 더욱이,케타민 히드로 클로라이드 (70 밀리그램 / kg, IP) 및 덱스 메데 토미 딘 염산염 (0.5 밀리그램 / kg, IP)을 가진 동물을 주입.
      참고 : 코드가 횡단되면 완전 절개 수술의 경우, 이소 플루 란으로 인한 혈관 확장이 자주 지혈에 문제를 제공합니다. 이 문제는 케타민 / 덱스 메데 토미 딘 칵테일을 사용하여 방지 할 수 있습니다. 동물은 20 ~ 25 분 동안 마취 및 척수 절개 수술 후 atipamezole (1 ㎎ / ㎏, SC)을 이용하여 반전한다.
    3. 사전에 작동 피하 프레 노르 핀 (0.02 ㎎ / ㎏), 및 케토 프로 펜 (5 ㎎ / ㎏)을 관리 할 수​​ 있습니다. 로컬 선 블록을 제공하기 위해 수술 직전 (SC 5 ㎎ / ㎏) 부피 바카을 관리 할 수​​ 있습니다. 복부를 면도 (3 회)를 클로르헥시딘, 70 % 에탄올 브러쉬 교대시, 포비돈 요오드이어서 적어도 1 분 동안인가되어야하며, 70 % 에탄올 (와이프 새로 열린 알코올마다)으로 제거 하였다. 브러쉬가 시작 동심 방식으로하여야한다절개 라인의 중심 및 ( "위로 / 앞뒤로"이동에 의해 면적이 오염되지 않도록) 외측으로 선회. 멸균 거즈를 사용하여 각 응용 프로그램 사이에 버린다. 동물 수술을 시작하기 전에 과정을 세 번 반복합니다. 클리핑 및 수술 세정하는 동안, 이소 플루 란의 약 1.5 % 유지 용량에 따라 코 콘에 동물을 유지 (마취의 수술 비행기를 유지하기 위해 필요에 따라 조정). 수술 동물의 지속 시간 동안 37 ° C로 유지 물 순환 담요에 보관됩니다.
    4. C8-T3 척추 위에 놓인 피상적 인 근육의 지느러미 중간 선 절개 길이가 2cm를 확인합니다.
    5. 경질 층을 표시하기 위해 해부 무딘.
    6. microscissors 또는 25 게이지 바늘의 끝 경질 층을 관통.
    7. T2-T3의 추간 간격의 경질을 열고 microscissors를 사용하여 완전 절개를 수행합니다. 척추 arterie를 버스트하지만 옆으로 충분하지 microscissors를 엽니 다들과 정맥. 빠른 움직임에서 척수를 가로로 쪼개다과 동물의 뒷다리 사지에서 과장 트를 검색합니다. 주동이의와 꼬리 척수 젊고 아름다운 여자의 시각적 분리를 통해 완전한 절개를 확인합니다.
    8. 확인 후, 지혈을 달성하기 위해 젊고 아름다운 여자 사이에 gelfoam을 배치합니다. 출혈을 멈추게하고 척수의 덩어리를 분리 할 수​​있는 충분한 gelfoam을 적용합니다.
    9. 사용 4-0 Vicryl과 4-0 prolene의 봉합은 각각 근육과 피부를 닫습니다. SCI 수술 후 동물에게 (30 ° C에서 5 ml를, 사우스 캐롤라이나) 사전 예열 락 테이트 링거액을 제공하고이 온도 제어 된 환경에서 복구 할 수 있습니다.
  4. 척수 절개 수술 후 케어
    주 : 제 14 일 동안 수술 후 동물을 하루에 한 번 상세한 모니터링 평가 이외에 3 회 매일 체크한다. 후 14 일에 상세한 모니터링 평가는 격일로 반복 될 수있다. 7 catego 동물을 평가RIES : 체중, 외모 (hunching, 경직, 절개 치유와 장액 포함), 동작 / 활동, 배변, 피부 (통증 등의 포르피린과 얼굴을 찡 그리기 등의 증상에 따라 평가된다), 수화 호흡. 첫 번째 5-7일 방광 검사와 하루에 적어도 3 회를 표현해야한다.
    1. 과일, 곡물의 구색, 영양 부드러운 다이어트 식사 대용으로 동물 사료 및 척수 절개 수술 후 8-14일를 들어, 임의 량의 물을 제공합니다. 탈수 증상이 수술 후 처음 3 일 동안과에 따뜻하게 락 테이트 링거액 (5 ㎖) 피하와 동물을 주입한다. 검사하는 동안 동물의 평가에 따라 필요에 따라 링거액 (5 ㎖)을 관리 할 수​​ 있습니다.
      척수 절개 한 후, 쥐가 뒷다리 마비를 전시하고, 굴곡이 손상 모델에 보존 된 앞다리의 확장을 사용 ambulate :합니다. 쥐 트렁크와 꼬리 지원이 부족하다. 용이하게하기 위해케이지에서의 이동은, 고무 그리드는 압연 귀리 침대 아래에 배치해야합니다. 이 쥐가 앞발로 그리드를 파악하고, 음식과 물에 액세스 할 수 케이지에 쉽게 이동할 수 있습니다. 침구는 매일 변경해야합니다. 척수 절개 후 7 일에서, 귀리 침구는 원래의 우드 칩 침구로 교체해야합니다. 압연 귀리 침구는 침구를 먹을 수있는 파이 카을 개발할 수 있습니다 쥐 주어진 프레 노르 핀 때문에 사용이 식도 impactions의 원인이 될 수 있습니다. 압연 귀리 압연 귀리와 식도의 흡수 매복이 관찰되지 않았다 있습니다.
    2. 수술 후 3 일간 하루에 한 번씩 enrofloxacin (10 ㎎ / ㎏, 사우스 캐롤라이나) 및 케토 프로 펜 (5 ㎎ / ㎏, SC)를 관리 할 수​​ 있습니다. 수술 후 다음 3 일간 아침과 저녁 (즉, 매 12 시간) 동안 프레 노르 핀 (0.02 ㎎ / ㎏, SC)를 관리 할 수 있습니다. 통증 / 고통의 흔적이 언급하는 경우 프레 노르 핀의 중간 일 투여 량은 투여 될 수있다.

2. 텔레 메 트리혈역학 적 매개 변수의 모니터링

  1. 사전 및 사후 SCI, 이길별로 비트 동맥 혈압 (ABP) 및 핵심 체온 매일 24 시간 동안 수집합니다. 원격 측정 장치를 이용하여 24 시간 블록 1000 Hz에서 동맥 혈압 코어 체온 샘플.
  2. 트랜스 듀서의 무선 충전을위한 동물 케이지에서와 트랜스 듀서에서 디지털 측거기 신호의 수신을위한 스마트 패드를 놓습니다.
    주 : 출력 전압은 계속해서 각 채널로부터의 데이터 흐름을 구성하는 컴퓨터에 접속 된 구성 관리자에게 전달된다. 전압은 지속적으로 동맥 혈압, 온도 녹화로 전환된다. 이러한 LabChart 같은 데이터 수집 소프트웨어를 이용하여 상기 샘플링 된 데이터를 시각화.
  3. 바로 이전에 모니터링 및 모니터링 후 10 분 동물 모니터링 동안 수집 된 원격 측정 데이터뿐만 아니라, 10 분 버린다.

자발적 Incid 3. 평가자율 Dysreflexia의 화상 으 (AD)

참고 : 자연 AD 이벤트의 빈도, 심각도 및 지속 시간은 우리 자신의 소설 AD 감지 JAVA 플랫폼 소프트웨어 (그림 4) 용으로 개발 된 알고리즘을 사용하여 평가 하였다. 신규 알고리즘이 자동으로 이전과 SCI는 그림 2에 지정된 매개 변수를 사용 후 24 시간 SBP 및 HR 원격 측정 기록을 기반으로 자연 AD 이벤트를 검출하기 위해 개발되었다.

  1. 수집 소프트웨어를 사용하여 관심의 기간 동안 원시 원격 측정 데이터로부터 SBP 및 HR 값을 추출합니다.
    참고 : 수집 소프트웨어를 감지하고 연속 ABP 녹음에서 SBP 피크의 값을 결정합니다. 심박수는 SBP 인접한 피크 사이의 시간 간격을 측정함으로써 추정된다.
  2. interbeat 열 A의 간격, 열 B에서 SBP 값, 열 C의 MAP 값과 일의 시간에 원격 측정 기록의 CSV 파일을 업로드 전n 개의 열 D (도 4A).
  3. 소프트웨어 (그림 4B-D)를 사용하여, 관련 생리적 HR 범위를 지정 (즉, R 간격에 R) 180 BPM과 625 BPM의 SBP 녹음합니다. 심박수의 최소 및 심박수 최대 패널 아래에있는 소프트웨어의 관련 인사의 범위를 지정합니다.
  4. 240 초 이동 평균 창을 통해 SBP와 HR에 대한 임계 값을 만듭니다. 광고 시간 임계 값 패널에서 분석을 위해 이동 평균 임계 값의 창 길이를 나타냅니다.
  5. 이동 평균 기준 이상 20 mmHg로에서 SBP 전치 임계 값을 설정합니다. 이동 평균 임계 값 조옮김 BP 패널의 전위 값을 표시합니다.
  6. 이하 초 간격이보다 더 큰 10 초의 지속 시간 동안 피크하는 피크 전치 임계 값을 초과 SBP 피크 클러스터를 분리. 인터 간격 BP와 뒤를 사용 피크 기간에 피크를 지정합니다피크 클러스터 간격 BP 패널을 사용 배급 간격.
  7. 서로의 120 초 내에 그룹 SBP 피크 클러스터.
    주 : 각각 120 초 내에 검출 가능한 AD 이벤트는 하나의 이벤트로 분류 될 것이다. 광고 시간 임계 값 패널에서 별도의 AD 이벤트를 구별하기 위해 연속 SBP 클러스터 사이에 허용되는 최대 기간을 지정합니다.
  8. SBP 피크 클러스터 그룹 40 BPM 이상의 HR의 감소를 검출함으로써 잠재적 자발 AD 이벤트와 연관​​되는 경우 확인.
    1. 잠재적 인 이벤트의 시작시 HR 값의 평균 10 % (평균 범위 패널을 드롭 상부 심장 박동이 비율을 지정). 가능성 이벤트의 끝에서 심장 박동 값의 평균 75 %를 (아래에서이 비율을 지정 심장 박동 평균 범위 패널을 드롭).
    2. correspon을 보장하기 위해, 더 높은 심장 박동수 액으로부터 하부 심박수 액 빼기40 BPM 이상의 딩 드롭. 심박수 드롭 제한 패널을 이용하여 심박수를 저하 제한 지정.
  9. 패널가 작성되고 나면, 확인을 누릅니다. 검출 된 AD 이벤트의 그래픽 프리젠 테이션은 SBP의 스파이크와 관련된 HR 데이터 (그림 4C-D)를 포함하는,되게됩니다. 출력 엑셀 파일도 승압 응답 (mmHg로), 지속 시간 (초), 최대 수축기 혈압 (mmHg로), 최소 HR (BPM) 및 각각의 검출 된 AD 이벤트의 HR 드롭 (BPM)가 생성됩니다.

4. 대장 팽창은 의도적으로 AD를 유도합니다

참고 : 유도 AD의 심각도는 대장 팽창 (CRD), 3,18,19 루틴 장을 모방하는 임상 적 자극을 통해 측정 할 수있다.

  1. 프랑스 카테터의 풍선 (직선, 10 프랑스어, 3 ㎖, 35cm, 라텍스 무료)가 공기 2 ㎖로 팽창에 의해 유출되지 않습니다 확인합니다.
  2. 일을 억제수건에 배치하고 30 분 동안 안정 BP와 HR을 허용하여 전자 동물.
  3. 카테터의 끝 부분에 윤활제를 놓습니다. 2cm 풍선의 중간에서, 영구 마커로 카테터에 표시를 놓습니다. 마크는 오프닝에서 바로 보일 때까지 카테터는 콜론으로 항문을 통해 삽입된다. 수술 테이프와 꼬리에 카테터를 고정합니다. 다시 장소 그의 집 케이지의 포장 동물은 동물 내부에 주입 된 트랜스 듀서와 일치하는 수신기 스마트 패드에 배치합니다. 동물의 BP는 10 분 동안 정상화 할 수 있습니다.
  4. 카테터의 삽입과 관련 순응 기간 (즉, 10 분) 한 후, 10 초 이상 공기 2 ㎖에 풍선을 불어 안정 BP와 HR 할 수 있습니다. 1 분 동안 팽창을 유지한다. 카테터의 끝이 직장 내부에 남아 있는지 확인합니다. 그것은 풍선을-팽창 이상하지 않는 것이 중요합니다 (즉, 3 ㎖ +) 순서는 대장의 파열을 방지 할 수 있습니다.
    주 : 팽창을 1 분의 기간 동안 및# (160)는 상기 승압 반응의 개발 및 AD의 유도 에피소드와 관련된 압력 수용체 매개 HR 드롭에 적절한 시간을 할 수 있습니다. 또한,이 1 분주기는 또한 심혈관 인덱스 정규화 충분한 시간을 제공한다.
  5. 반복 팽창 시험 3 회, 시험 사이에 10 분의 최소 간격으로 매일 시험을 반복. 평가가 완료되면 동물에서 폴리 카테터를 제거한다.
  6. 1 초 간격 동안 평균 비트 바이 비트 데이터와 여러 임상 시험을 통해 HR의 SBP에 최대 증가 및 최대 감소를보고한다.

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결과

원격 측정을 사용하여 동맥압을 24 시간 동안 연속적으로 1000 Hz의 주파수에서 샘플링된다. LabChart를 사용하여 동맥 혈압 (ABP)의 예시적인 기록은도 1b에 도시된다. 샘플 ABP는 하행 대동맥에 삽입 된 고체 압력 센서에 의해 모니터링 하였다. 소설 JAVA 플랫폼 AD 탐지 소프트웨어 관련 SBP (mmHg로) 피크 (그림 1C)를 추출 할 수있다. 또한 인접 SBP 피크 (도 1d) 사이의 시간 간격에서 HR (BPM)을 추출 할 수있다.

1,000 Hz에서 샘플링 비트 ABP에 의해 비트에서 추출 SBP 및 HR은 AD 탐지 소프트웨어의 입력 변수로 선택된다. 소프트웨어는,도 2에 제시된 바와 같이보다 20 mmHg로는 40 BPM 이상의 HR의 감소를 동반 SBP 증가로 자발적 AD 이벤트를 특징 짓는. 이러한 이벤트는 초기 240 ...

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토론

프로토콜은 SCI-동물 (도 1b)에서 ABP 장기적 철저한 분석을 위해, 원격 측정 장치에 결합 될 새로운 JAVA 플랫폼 AD 감지 소프트웨어의 상세한 구현을 설명한다. 이것은 그들이 일의 기간에 걸쳐 간헐적으로 발생하는 자발 AD 이벤트를 검출하기 ABP 패턴의 특성을 허용 최초의 소프트웨어이다. 잘 특징 T3 SCI 동물 모델이 AD의 자연 주파수, 승압 응답 듀레이션을 검출하기 위해 소프트웨어의 기능적 용량을 예시 할 수있다. 자연 AD 이벤트의 검출과 함께, 소프트웨어는 ABP에서 진동을 분석하고 혈역학 적 매개 변수의 주간 변화를 식별 할 수있다.

소설 AD 탐지 소프트웨어는 효율적, 안정적이고 정확하게 검출 및 급성 및 만성 SCI 동물의 자연 AD 이벤트를 특징으로한다. 광고 이벤트는 S의 증가에 따라 발생하는 것으로 여겨진다20 mmHg의 이상 (도 2A) 및 BP는 종종 현저한 서맥 (9...

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감사의 글

건강 연구의 캐나다 연구소와 심장 및 BC와 유콘의 스트로크 재단이 자금을 지원하는 경우 연구. 우리는 동물 보호 기술 지원과 전문 지식 씨 Rayshad Gopaul 박사 셸리 McErlane을 인정하고 싶습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
11 남성 Wistar 쥐 -Hsd-WI (250-300g)Envigo (이전에는 Harlan Laboratories) 141
실험 차트(PowerLab® 데이터 수집 시스템)AD Instruments 
압력 텔레미터 밀러 주식회사RP-TRM54P
컨피규레이터Millar Inc.TR190
스마트패드Millar Inc.TR180
Isoflurane (Aerrane)Baxter Corp.DIN: 02225875
Enrofloxacin (Baytril)Bayer HealthcareDIN: 02169428
5-0 Silk SuturesEthiconS182
4-0 Vicryl 피하EthiconJ496G
부프레노르핀 (Temgesic)Reckitt BenckiserDIN: 0281250
부피비카인 염산염 (마르카인 0.5%)호스피라 헬스케어  DIN: 02305909
케토프로펜(Anafen)MerialDIN: 02150999
케타민 염산염(Vetalar)BionicheDIN: 01989529
덱스메데토미딘 염산염(Domitor)PfizerDIN: 02333929
젖산 링거 용액 브라운 메디컬 Inc.DIN : 01931636
젤 폼 # 12Pharmacia & Upjohn Company03603-14-1
MicroscissorsFine Science Tools15003-008
Iris SpatulaeFine Science Tools10094-13
10 프랑스어 35  cm 폴리 카테터Coloplast AA6110
다이어트젤®  Clear H2O, Westbrook, ME76A
LabDiet 설치류 다이어트 5001Purina Mills (PMI®)5001
클로르헥사딘(히비탄)Wyeth Animal Health, Guelph, OntarioDIN 00245097
아티파메졸 염산염(안티세단)오리온 제약DIN: 02237744

참고문헌

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