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방법 논문

쥐 신장 이식 기술

17.4K 조회수

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DOI:

10.3791/52848

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2015년 10월 20일

 ,  ,  ,  , 

이 논문에서

요약

이 원고의 목표는 동맥 문합에 대한 세부 사항에 특히 주의를 기울여 마우스에서 신장 이식을 수행하는 데 필요한 단계를 설명하는 것입니다.

초록

최초의 쥐 신장 이식 기술은 1973년 Russell 실험실에서 발표되었습니다. 다른 실험실에서 이 기술에 능숙해지고 활용하는 데 몇 년이 걸렸지만 현재 전 세계의 많은 실험실에서 널리 사용되고 있습니다. 신장 동맥 대신 동맥 문합을 형성하기 위해 기증자 대동맥을 사용하는 원래 기술에 대한 상당한 개선은 1993 년 Kalina와 Mottram 2에 의해 개발되고 보고되었으며, 1999 년 같은 실험실에서 더 발전했습니다 3. 이 모델에 능숙해질 수 있지만 문헌을 검색하면 많은 실험실에서 여전히 동맥 혈전증으로 인한 이식편 손실의 비율이 높다는 것을 알 수 있습니다. 우리는 여기에서 다른 사람들이보고 한 동맥 혈전을 크게 감소시키는 우리 실험실에서 고안 된 기술을 설명합니다 4,5. 이는 기증자 신장 하부 대동맥의 발뒤꿈치와 발가락 커프를 형성하여 더 큰 문합과 신장으로의 더 곧은 혈류를 촉진함으로써 달성됩니다.

서론

1973 년 이후 쥐 신장 이식 모델은 유용한 연구 도구 왔지만, 기술적 인 문제는 광범위한 사용을 저해했다. 수년에 걸쳐 여러 논문 출판이 절차 개선 / 개선을 자세히 설명하고있다. 주로 혈관 고형 장기 이식의 모델로이 절차는 또한 1973 6 러셀 실험실에 의해 고안되었다 이소성 심장 이식 모델에 아마 두 번째입니다. 두 모델은 동종 거부 반응, 지연 이식 기능의 개발에 대한 연구하기 위해 자신을 빌려 허혈 및 재관류 손상.

신장 이식에보고 할 수있는 가장 일반적인 문제 중 하나는 우리는 또한 우리의 실험실에서 경험 동맥 혈전증 4,5,7의 상대적으로 높은 발병률이다. 그러므로 우리는 혈전 형성의 문헌 고찰을 수행하고 가능성이 기술적 인 문제의 원인을 찾기 위해 밖으로 설정하고 또한을 고안가능한 솔루션입니다. 혈전증의 원인은 혈액 기증자 신장 동맥에 다음 기증자 신장 대동맥으로,받는 사람 대동맥에서 걸리는 다소 고통스러운 경로입니다. 이 경로는 혈소판 활성화 및 혈전 형성으로 이어질 수 있습니다 신장 동맥에 난류가 발생합니다. 최근의 관찰과 관련 문헌 8-14의 검색을 바탕으로 우리는 0 %에 혈전증을 감소시켰다 새로운 기술 내놓았다.

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프로토콜

모든 마우스는 잭슨 연구소 (바 하버, ME)에서 구입하고 NIH 가이드 라인에 콜로라도 덴버 IACUC 대학의 승인에 따라 콜로라도 덴버, 바바라 데이비스 센터 동물 시설의 대학에서 병원균이없는 조건에서 보관 하였다.

1. 기증자 신장 수확

  1. 모든 악기를 소독 절차를 통해 멸균 장갑을 착용하고 멸균 필드를 유지한다. 운영 현미경을 이용하여 모든 수술을 수행한다.
  2. 수술로 펜 토바 비탈 - 마취 (60mg의 / ㎏ IP) 기증자로부터 마우스 기증자의 신장을 제거합니다. 발가락 핀치에 의한 마취의 깊이를 확인하고 호흡을 관찰한다.
  3. 다음 4 방향 구속으로 마우스를 고정 모피 클립. 포비돈 - 요오드와 피부를 준비하고 멸균 방식으로 마우스를 드레이프.
  4. 2cm의 중간 선 수직 복부 절개를 확인하고 복강을 입력합니다. 우량 장을 후퇴하고 구체화가슴에. 절차를 통해 멸균 촉촉한 거즈에 싸서 장을 유지합니다.
  5. 큰 복부 혈관을 확인하고 그들을 동원, 어떤 요추 가지를 확인하고 소작 또는 10/0 나일론 봉합사를 결찰 중 하나.
  6. 바로 왼쪽 신장 혈관 원위부는 약 2mm 이상 무딘 절개에 의한 하대 정맥 (IVC)과 떨어져 복부 대동맥 (AA)를 애타게....

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결과

이 수술 기법은 단순한 이식 생존 / 거부 연구, 또는 매우 복잡한 실험 프로토콜 중 하나를 수 있습니다. 도면에서 우리는이 향상된 동맥 문합 기술을 사용하는 장점을 설명 이하. 우리가 유의하게 0 %, 따라서 생산성 향상 35 %에서 동맥 혈전증의 발생을 감소이 기술을 사용. 우리는 유지 동일한 0 % 혈전증 결과에 1 년 이상이 기술을 이용했다. (1)이 새로운 기술의 기초이다 동맥 힐 앤드 토 커프스의 형성 방법을 설명도. 이 커프 이상 문합과 신장에 똑바로 혈액 유동 경로를 제공한다. 이러한 점을 모두 활성화시켜 혈소판 및 혈전 형성의 가능성을 감소 크게 줄어들 난류를 초래.

figure-results-1
그림 기증자 커프의 준비 1.......

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토론

이 이식 기술을 습득하는 것은 어렵지만 달성되면 그것은 매우 강력한 연구 도구이다. 환자 외과 의사 / 연구원은 세부 사항 및 작은 동물 모델에서 더욱 더 어떤 수술을 마스터하는 열쇠입니다 기술의 일관성에 대한 관심에 의해 보상 될 것이다. 마우스 신장 이식을 마스터의 기술적 어려움이 많은 주름, 그리고 그것은 다른 작은 동물 이식 모델에서 경험이 절차를 폭행하기 전에 얻을 수 있어야 가능성이 매우 높다.

특허 루멘을 유지하기 위해 바늘을 배치 할 때 상대 혈관 벽이 잡힐 안, 즉, 그것은 문합은 "깨끗한"되어 있는지 확인하는 것이 중요하다. 그렇지 않으면 실패한 이식과 극단적 인 경우에 가능성이 결과보다 것보다 그 흐름 상당한 수축이있을 것이다하는 것은 마비 - 사지 뒷다리로 이어집니다. 그것은 전체 두께가 봉합 바늘 통과하는 것도 매우 중요합니다 이 밀봉 및 문합 치유 에이즈 내막 대 내막 접촉이 있음을 보장하는 적당한 에지 e.......

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공개 사항

저자는 공개할 것이 없습니다.

감사의 글

이 작품은 1R03DK096151에 의해 부분적으로 지원되었다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
기구Roboz #Fine Science Tools #Arosurgical #
Straight micro-dissecting forcep #5RS-501511295-51
Curved micro-dissecting forcep #7RS-504711297-00
curved serrated forcepRS-513711052-10
Vannas micro-dissecting finger, shortRS-561009.140.08
마이크로 해부 가위, 직선, 날카롭고 긴11.602.11
마이크로 스프링 손잡이 바늘 홀더11.549.15
스트레이트 모기 집게91308-12
마이크로 해부 가위, 직선, 무딘RS-596214078-10
미세 해부 가위, 곡선, 무딘RS-598114079-10
마이크로 리트랙터RS-6540
계기판 트레이, 10" x 6 ½ ” x ¾ "RT-1350S
실크 봉합사, 5/0, 22.5m 스풀18020-50
봉합
10/0 나일론T4A10Q07
5/0 실크E19A05N
장갑드레이프
Medex SupplyPrecept의 바이오젤, #64-9012-9
주사기면 어플리케이터
B-D 1cc 인슐린, #329424Fisher-brand, #23-400-100
포비돈-요오드 면봉
PDI, #B40600
4/0 면 넥타이
국산 면화 기구
사 로 오토클레이브

참고문헌

  1. Skoskiewicz, M., Chase, C., Winn, H. J., Russell, P. S. Kidney transplants between mice of graded immunogenetic diversity. Transplant Proc. 5 (1), 721-725 (1973).
  2. Kalina, S. L., Mottram, P. L. A microsurgical technique for renal transplantation in mice. Aust N Z J Surg.

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재인쇄 및 허가

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