이 프로토콜의 목적은 인간이 아닌 영장류에서의 혈당 조절을 평가하고 dysmetabolic 건강한에서 대사 상태를 평가하기 위해 정맥 내 글루코스 내성 시험 (IVGTTs)를 수행하기위한 표준 방법을 제공하는 것이다.
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이 논문에서
요약
초록
정맥 내 글루코스 내성 시험 (IVGTT)은 글루코스 항상성의 특성에 중요한 역할을한다. 혈청 생화학 프로파일 모두 공급의 혈당치를 포함한 금식 상태, 혈색소, 인슐린 수치, 다이어트의 병력, 신체 조성 및 체중 상태, 정상 및 비정상 혈당 조절에 대한 평가와 함께 할 때 만들어 질 수있다 . IVGTT의 해석은 덱 스트로스 도전과 관련하여 시간이 지남에 포도당과 인슐린 수치의 변화 측정을 통해 이루어집니다. 고려해야 할 중요한 요소는 다음과 같습니다 T0 (포도당 주입의 끝), 처음 20 분에 빠른 포도당 통관의 기울기에서 파생 된 포도당 통관 율 K (T20에 T1), 시간과 관련하여 도달 피크 포도당과 인슐린 수준 포도당 기본으로 돌아가려면, 곡선 (AUC) 아래의 면적은.이 IVGTT 대책은 건강한 t에서 포도당 항상성 이동 등의 특성 변화를 보여줍니다OA 병에 걸린 대사 상태 5. 여기에서 우리는에서 인간 형 당뇨병 (T2D)의 가장 적절한 동물 모델과 IVGTT 이러한 동물의 임상 적 프로파일은 인간이 아닌 영장류 (히말라야와 시노 몰 거스 원숭이)의 특성을 설명하는 비만 dysmetabolic에 건강한 린, T2D와 상태 8, 10, 11.
서론
IVGTT 일상적 다른 대사 상태 5에서 7 인간의 β 세포 기능을 결정하기 위해 사용되는 편리한 기능적 분석이다. T2D 동물 모델에서, 잘에서 대사 질환 진행을 보여 동물을 특성화하기위한 도구로서 인식되고 dysmetabolic 고혈당 상태 8, 9 건강한. T2D의 가장 가까운 동물 모델은 붉은 털과 노몰 거스 원숭이가 주목할만한 예입니다있는 인간이 아닌 영장류 (NHPs)에서 증명된다. 이러한 동물은 자연스럽게 인간 10과 나이 및 빈도에 기여 비만과 같은 위험 인자 T2D을 개발한다. 또한,이 유사한 질병의 진행은하고 dysmetabolic 질환 11 진행됨에 따라 췌장 병리은 아밀로이드 침착을 표시합니다.
여기에서 우리는이 동물의 대사 상태의 우리의 식민지 특성화의 일환으로 NHPs에 IVGTT을 수행하는 우리의 표준 방법에보고한다. 이 방법은소비 다른, 더 많은 시간과 비용이 많이 드는 기술 2를 기준으로 수행하기 쉬운. IVGTT 신속하고 자주 동물의 많은 식민지를 특성화하는 데 유용합니다. 당화 혈색소 (당화 혈색소)의 수준을 고려하면, 동물의 다이어트 및 음식 섭취 이력뿐만 아니라 %의 근육량과 체지방은 ....
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프로토콜
모든 동물 절차 프로토콜 14-017 아래, 노스 캐롤라이나 연구 캠퍼스 (NCRC)에있는 데이비드 H. 머독 연구소 IACUC 승인하고, 당뇨병과 prediabetes / 인슐린 저항성 및 치료제의 효능의 비인간 영장류 모델의 특성을 개선하기 위해 인슐린 감수성 및 신진 대사 기능.
1. 동물 선택 및 학습 준비
- 매달 음식 섭취 및 체중에 기초하여 레코드를 선택 다이어트 및 중량 안정 동물.
참고 : 자신의 음식 섭취가 안정 될 때까지 식욕에 최근 하락을 전시 한 동물을 특징으로 할 수 없습니다.- 성숙한 동물 (> 5-6 년), 본문 개월 연속 간의 가중치 먼저 원숭이 검사와 무게에 극적인 변화를 대사 상태를 변경 이외의 다른 원인을 배제하지 않고 10 % 이상 차이가 동물을 선택하지 마십시오.
- 포도당, 인슐린 및 C-pepti에 대한드 분석은 단백질 분해 효소 억제제 (아프로 티닌 및 DPP4I)와 K 2 EDTA 샘플 수집 튜브를 준비합니다.
참고 : DPP4I + 아프로 티닌 칵테일 프로테아제 억제의 폭 넓은 스펙트럼을 제공하는이 추가적인 분석 (글루카곤, GLP-1)에 요구한다. 추가적인 분석이 수집되지 않는 경우,....
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결과
도 1에 나타낸 결과는 30 분 IVGTT에 걸쳐 성숙 건강 및 당뇨병 사이 노몰 거스 원숭이에서 전형적인 포도당 및 인슐린 곡선 실증한다. 건강하고 고급 당뇨병 원숭이의 데이터는 신진 대사 특성의 범위의 양 극단에서 동물 사이의 명백한 차이점을 대비하기 위해 표시됩니다. 이 IVGTT 프로토콜은 비슷한 결과와 붉은 털 원숭이의 저자에 의해 성공적으로 사용되어왔다.
건강한 원숭이 (히말라야와 사이 노몰 거스)의 금식, 기준 혈당 값은 낮은 60-50로 밀리그램 / DL (8)이 될 수 있습니다. 그림에 나타낸 바와 같이, 초기 포도당 여행 - T3에서 측정 - 건강한 NHP에 대한 200 밀리그램 / DL을 초과 자주하는 당뇨병 동물에 대한 일반적인 기준 혈당 값의 높은 상승하지 않을 수 있습니다. 다음 서른의.......
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토론
IVGTT은 상기 분석에서 공복 혈당 및 인슐린 수준이 달성된다. 체중 5, 12, 13에 기초하여 단일 덱 스트로스 주입 글루코스 자극 인슐린 분비의 능력을 평가하고, 그 동물의 능력을 평가하는 허용 인슐린을 해제하고베이스 라인쪽으로 높은 혈당 수준을 반환합니다. 이는 정상적인 글루코스와 인슐린 수준, 건강 관리, 정상 혈당와 dysmetabolic 혈증 동물 또는 고혈당, 인슐린 저항성 당뇨병 동물로 동물을 특성화하는 정보를 사용자에게 제공한다.
특히 이른 시점에서 혈액 샘플을, 덱 스트로스 주입 후에 그려진 것으로 적절하고 일관된 방식으로 처리하는 것이 중요하다. 이것은 내부와 피사체 사이에 변동을 감소시키고, 데이터의 시간적 순서로 오류에 대한 기회를 감소시킬 것이다. T3의시기는 매우 중요하다 소풍 오 때문에덱 스트로스의 주입 후 3 분 기준선 F 혈당 동물의 대사 상태를 특성화하기 위해 사용되는 엔드 포인트 중 하나이다. 그 혈액이 시간에 촬영되.......
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공개 사항
저자는 대사 질환 분야에서 활약하는 계약 연구 기관 (크라운 바이오 사이언스)와 제휴하고 있습니다.
감사의 글
저자는 DHMRI CLAS 동물 관리 직원의 강력한 지원을 인정하고 싶습니다, 시설 관리자 씨 다니엘 페랄타와 참석 수의사, 박사 Glicerio 이그나시오, DVM MRCVS.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
2
슈퍼켐 패널 K
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Allegra X-15R 원심분리기 | 플라즈마: 4 ° C 3,000rpm에서 10분 동안 | ||
| Sorvall ST16R 원심분리기 | 혈청: 22 ° 3,000rpm에서 10분 동안 C | ||
| Thermo Scientific -86 ° C 냉동고, Forma 88000 시리즈 | 모델: 88500A | ||
| 포도당 50% (D50) | 웹스터 | 07-8008986 | I.V. 포도당 주입물 |
| 3 ml 루어 락 주사기 | Midwest Veterinary Suppy | 시리얼 혈액 채취 | |
| 5 ml Luer Lock 주사기 | Midwest Veterinary Suppy | 헤파린 화 식염수 플러시 | |
| 10 ml Luer Lock 주사기 | Midwest Veterinary Suppy | I.V. D50 | |
| 거즈 스폰지 2 x 2 | Midwest Veterinary Suppy | 366.23000.4 | 중고 건조, 70% 알코올 및 2% 클로로엑스 용액 |
| 4 ml 세럼 분리기 튜브 배송 | 미드웨스트 수의학 공급 | 366.45000.4 | EDTA용 혈액 채취 튜브 |
| , 2 ml | VWR | 95057-239 | 혈액 채취 튜브 |
| 아프로티닌, 100 mg | 시그마 | A1153-100MG | 혈액 채취 튜브 프로테아제 첨가제 |
| 22 G x 1" 카테터 | 미드웨스트 수의학 공급 | 193.75250.2 | I.V. 카테터 |
| 주입 플러그 W/ 캡 | Midwest Veterinary Suppy | 001.11500.2 | %50 포도당 주입 포트 |
| Porus Tape, 1/2" x 10 yd | Midwest Veterinary Suppy | 001.85000.2 | 카테터 및 hep의 준수를 유지합니다. 잠금 |
| 클로르헥시딘 용액 2% | Midwest Veterinary Suppy | 193.08855.3 | prep catheter site |
| 70% 에탄올 | VWR | 71001-654 | prep catheter site |
| tourniquet | Webster | 07-8003432 | |
| 3-way | stopcock Midwest Veterinary Supply | 366.28510.4 | hep. lock |
| 37" 확장 세트 | Webster | 07-8454200 | hep. lock |
| Exel 50-60cc LL 주사기 | Midwest Veterinary Suppy | 001.12250.2 | Heparinized Saline flush |
| 250 ml bag 0.9% | saline Webster | 07-8365593 | flush |
| 1,000 U Heparin, 10 ml | Webster | 07-883-4916 | |
| Ketamine (Ketaset) 100 mg/ml | Fort Dodge | (AV 주문) | |
| Precision Xtra 포도당 테스트 스트립 50/bx | Abbott(American Diabetes Wholesale) | 9381599728K7 | 테스트 기준선/T3 혈당 수치 |
| Masimo Rad 57 | DRE | 6052057V | 맥박 산소 |
| 측정기 Pavia 직장 온도계 | Patterson | 07-8391335 | |
| Precision Xtra Glucometer | Abbott | 9381599728K7 | 휴대용 혈당계 |
참고문헌
- Bergman, R., Phillips, L., Cobelli, C. Physiologic evaluation of factors controlling glucose tolerance in man. J. Clin. Invest. 68, 1456-1457 (1981).
- Bergman, R., Prager, R., Volund, A., Olefsky, J. M. Equivalence of the insulin....
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재인쇄 및 허가
