우리는 쥐를 대상으로 간단하고 편견 없는 후각 테스트를 제시합니다. 이 프로토콜을 사용하면 물과 비교되는 새로운 냄새에 대한 후각적 구별, 선호도, 회피 및 민감도를 단일 행동 세션으로 평가할 수 있습니다. 이 방법은 단일 실험자에 대해 표시되며 분석은 컴퓨터 지원 비디오 처리를 기반으로 합니다.
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이 논문에서
요약
초록
후각은 매우 종 가운데 보존하고 재생과 생존을 위해 필요합니다.
인간에서, 후각은 노화의 영향을받는 감각 중 하나이며, 신경 퇴행성 질환의 강력한 예측 인자이다. 따라서, 후각 테스트 초기 신경 학적 결손을 검출하는 비 침습적 진단 방법으로 사용된다. 후각 네트워크 감수성 근본적인 메커니즘을 이해하기 위하여, 설치류에서 후각 연구는 지난 10 년간 추진력을 얻고있다.
여기서는 사전 식품이나 물 제한없이 마우스에서 타고난 악취 지각 감도의 매우 간단한 시간 효율적이고 재현 후각 테스트 방법을 제시한다. 시험은 마우스에 익숙한 환경에서 수행되는, 냄새와 취기 노출의 2 분의 세션 만이 필요합니다. 분석에 ImageJ에 컴퓨터 보조 명령을 사용하여, 사후를 수행하기 때문에, 될 수있는한 연구원에 의해 처음부터 끝까지 수행.
이 프로토콜은 특별한 하드웨어 또는 설치를 필요로하지 않으며, 후각 인식과 감도를 테스트에 관심이있는 실험실에 대해 표시됩니다.
서론
후각은 포유 동물에서 가장 선진국과 중요한 감각 기능 중 하나입니다. 후각 활동의 손상 차손은 최악의 경우 음식 섭취, 사회적 행동하고, 심지어 생존에 영향을 미칠 수 있습니다. 인간으로, 후각 저하가 1 의존 나이이고 신경 장애 2의 강력한 예측 인자로 간주됩니다 - 6. 펜실베니아 대학에 의해 개발 된 후각 식별 검사는 현재 초기 신경 학적 결손 7을 평가하고 높은 확률로 치매 8,9의 진행을 예측할 수있는 가장, 사용되는 비 침습적 및 정량화, 진단 테스트 중 하나를 나타냅니다.
후각 시스템 및 설치류에서 후각의 굴지의 접근성, 기전 후각 기능 (10)를 다루는 연구의 강렬한 선을 촉발했다. 우리는 이전에 신호 RECEPT의 기능의 손실을 보여 주었다또는 Notch1은 후각 회피 (11)에 영향을 미친다. 이 프로토콜에서 우리는 후각 성능을 연구하는 신경 세포 나 교세포에서 신호 리간드, Jagged1 결핍 된 마우스를 사용합니다.
타고난 후각은 인식과 같은 세 개의 매개 변수, 냄새와 후각 민감도 4 사이의 차별에 의해 정의된....
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프로토콜
모든 동물의 절차는 과학적인 목적으로 사용되는 동물의 보호에 관한 유럽 연합 지침 63분의 2,010 / 유럽 연합 (EU)에 따라하고 (프리 부르 주, 스위스) 지역의 동물 관리위원회에 의해 승인됩니다.
1. 동물 준비
- 실험 동물
- 성인 남성 야생 유형과 연령 3-5 개월 형질 전환 생쥐 (C57BL / 6 배경)에 대한 실험을 수행합니다. 마우스의 세 그룹은 야생형 한배의 새끼 컨트롤에 해당합니다 (그룹, Jagged1 flox / flox 19)와 두 개의 조건부 KO 마우스 라인 (B 군, Jagged1ncKO와 C, Jagged1gcKO).
- 12 시간 제어 어두운 / 라이트 사이클 통풍 표준 실험실 조건에서 주택의 마우스, 그리고 음식과 물을 광고 무제한을 제공합니다.
2. 실험 설정
- 실험 무대
- 실험 분야의 경우, 깨끗한 살균 마우스 케이지를 사용 (36cm 길이 × 20.5 cm 가로 x 13.5 cm 높이) (그림 1A).
- 3cm 높은 신선한 침구와 번호가 케이지에 각 마우스를 ....
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결과
인식 테스트는 2-MB 산에 땅콩 버터와 회피에 매력을 측정합니다. 세 그룹의 마우스는 시험 물에 비해 "냄새 경계"에서 소요 시간을 정량화한다. 물 (8 t = 2.52, p <0.05)에 비교하여 환경 시험에서, 대조군은 냄새에 상당한 선호도를 표시한다. 반면에, B 군은 땅콩 버터에 상당한 매력을 표시하지 않고 물 (T 6 = 3.22, P <0.05)과 더 많은 시간을 보낸다. 따라서, 대조군 (F 1,7 = 26.39, P <0.005)에서 다르게 동작합니다. 또한, C 군은 차별을 보여줍니다 물과 땅콩 버터 (T 8 = 0.78, P = 0.45)와 같은시기에 보낸다. 전반적으로, 세 그룹이 다르게 동작 (F 2,9 = 19.83, P <0.005)과 유전자형과 치료 (땅콩 버터와 물) 사이에 상당한 상호 작용이있다 (F 2,1 = 4.90, P <0.00.......
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토론
냄새에 대한 인식, 냄새에 물과 감도 대 냄새 사이의 차별이 프로토콜에서 제안 된 테스트는 마우스의 타고난 후각 행동의 다양한 측면을 평가 할 수 있습니다. 이 프로토콜은 이전에 15을 도시 선호도 및 회피 스케일에 따라서 임의의 냄새에 적용될 수있다. 프로토콜 탐색 활동을 기반으로하고 있기 때문에 그것은 마우스가 움직임에 영향을주는 후각 탐사 방해 할 수있는 임의의 모터 또는 불안 장애를 표시하지 않는 것이 중요하다. 기재된 시험 그러나 이들이 성인 여성 또는 세 생쥐 또한 후각을 조사하도록 구성 될 수 성인 수컷 마우스에 대해 의도된다.
1) 최소 3 일의 간격으로 각각의 시험을 수행 마우스에서 이러한 연구 조사 후각을 시작하기 전에 다음과 같은 측면에주의하는 것이 중요하다. 회피는 후각 메모리 (20)의 간섭을 최소화하기 위해 마지막으로 테스트해야합니다; 2) 전자를 수행마우스는 그들의 활성 사이클 21에있는 광.......
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공개 사항
이해 상충이 없습니다.
감사의 글
이 연구는 알츠하이머병 연구를 지원하기 위해 스위스 국립 재단(31_138429)과 시냅시스 재단의 지원을 받았습니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 마우스 케이지 | Italplast (이탈리아) | 1144B | 길이 36cm x 너비 20.5cm x 높이 13.5cm |
| 부서진 나무 침구 | Abedd (오스트리아) | LTE E-001 | 3cm 높이 |
| 땅콩 버터 | Migros (스위스) | NA | 1 : 10 |
| 2- 메틸 부티르산 | 시그마 Aldrich (스위스) | W269514 | |
| 같은 마우스 균주의 가임 암컷의 순수한 여성 소변 | NA | Dilution 시리즈 | |
| 카메라 | 올림푸스(미국) | Camedia C-8080 | MOV 파일 |
| Quicktime for Java(Windows) | Apple(미국) | MOV | 파일 시각화를 위한 NA 비디오 플러그인 |
| ImageJ for Windows | NIH(미국) | NA | 비디오 처리/분석 |
참고문헌
- Doty, R. L., Kamath, V. The influences of age on olfaction: a review. Cognitive Science. 5, 20(2014).
- Mesholam, R. I., Moberg, P. J., Mahr, R. N., Doty, R. L. Olfaction in neurodegenerative disease: a meta-analysis of o....
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