코카인 유발 행동 과민성 및 마우스의 조건 장소 선호도 평가

요약

이 프로토콜은 연구자들이 조건화된 장소 선호 및 운동 행동 민감성 분석을 사용하여 중독의 이러한 측면을 테스트하기 위해 고안된 실험을 수행할 수 있도록 하기 위한 것입니다.

초록

마약에 대한 보람 있는 경험은 강력한 맥락적 연관성을 만들고 반복적인 복용을 장려하는 것으로 생각됩니다. 결과적으로, 남용 약물에 대한 반복적인 노출은 취약한 개인의 뇌 기능에 지속적인 변화를 일으키며, 이러한 지속적인 변화는 중독/의존의 특징인 부적응 약물 추구 및 복용 행동을 유지하는 데 기여할 가능성이 높습니다². 설치류의 경우, 보상 경험과 맥락적 연관성은 이전에 약물 쌍을 이룬 맥락에 대한 선호도가 측정되는 조건화된 장소 선호 분석법(CPP)을 사용하여 자주 측정됩니다. 반면에 행동 민감화는 반복적인 노출을 통해 점진적으로 발전하는 약물 유발 행동의 증가입니다. 감작 행동은 종종 몇 달간의 약물 금주 후에 측정될 수 있기 때문에, 초기 노출의 용량과 기간에 따라 지속적인 약물 유발 가소성의 관찰 가능한 상관관계로 간주됩니다. 연구자들은 이러한 분석이 중독의 측면을 매개하는 신경생물학적 기질을 결정하고 이러한 행동을 방해하는 다양한 개입의 잠재력을 평가하는 데 유용하다는 것을 발견했습니다. 이 원고는 마우스 CPP 및 코카인에 대한 운동 행동 민감화를 위한 기본적이고 효과적인 프로토콜을 설명합니다.

서론

동물 모델을 사용하여 약물 중독을 이해하는 것을 목표로 하는 연구는 보상/강화/동기 부여, 금단 및 재발 등 치료 성공을 가로막는 다양한 구성 요소뿐만 아니라 이러한 중독 문제를 더욱 복잡하게 만드는 일반적인 지속성을 다루기 위해 다양한 접근 방식을 취해야 합니다. 약물 남용과 관련된 보람 있는 경험은 후속 약물 복용에 동기를 부여하는 것으로 생각되기 때문에 약물 맥락 연관성에 초점을 맞춘 연구는 약물 복용 및 탐색에 기여하는 뇌 메커니즘을 이해하는 데 특히 유용할 수 있습니다. 이러한 분석 중 하나인 CPP(Conditioned Place Preference)는 보상 민감도의 그룹 차이를 비교하기 위한 고처리량 방법입니다. 과제에 대한 전통적인 해석은 조건화된 자극(CS)이 무조건적 자극(UCS)과 쌍을 이루고, 여러 쌍을 이룬 후에 CS가 UCS와 동일한 행동을 유도하는 고전적 또는 파블로프식 조건화와 관련이 있습니다(단,^39,40 참조). 이론적으로 동물은 내부수용성 상태(보상 또는 혐오)를 맥락적 단서와 연관시키는 법을 배운다. 그런 다음 내부 수용 상태의 상대적인 혐오감 또는 식욕 강도를 평가한 다음 상황적 단서에 대한 동물의 선호도를 결정함으로써 평가합니다. 약물 보상 연관성을 측정하기 위해 장소 조건화를 사용하는 것은 적어도 1957 년으로 거슬러 올라가며, ....

프로토콜

모든 실험 절차는 맥린 병원 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다. 참고 : 다음 프로토콜은 다른 성공적인 프로토콜 (예를 들어, 라이트 - 대 어두운 상 시험, 연속 대 간헐적 투여 등)과 다른 많은 세부있는 CPP와 전위의 민감성에 하나의 접근 방법을 설명합니다. 초보자는 손에서 실험 질문 (들)을 기반으로 문헌에서 변화 적응, 이러한 프로토콜로 시작하거나 가이드로 사용하실 수 있습니다. 자동화 된 측정 방법이 설명되어 있습니다; 그러나, 각각의 분석 (예를 들어, 비디오 녹화, 손 득점) 비 자동화 된 수단을 사용할 수있다.

1. 에어컨 장소 환경 설정

1. 장비 및 객실 설정 :
   1. 시험을하기 전에 적어도 3-5일를 들어, 1-3 분 매일 실험 쥐를 처리합니다.
      참고 :-처리하지 마십시오 마우스는 챔버 헤어 구조 강화에서 제거를 찾을 수 있습니다ssful, 방해하거나 에어컨을 변경할 수있다.
   2. 바람직하게는 자동화 된 데이터 수집 ⁽¹⁸⁾ photobeams을 갖춘 네 개 이상의 세 챔버 CPP 장치를 얻습니다. 확인 각 챔버가 제기 될 수있다 문을 통해 작은, 중간 챔버에 연결하는 ....

결과

CPP 분석의 대표적인 결과는 대략 세의 구주를 야생형 C57BL / 6N 마우스를 사용하여 그림 6에 표시됩니다. 연구 설계 시험 (전후)의 내 - 과목 변수로, 2 × 3 혼합 요인이었고,이 치료 (생리 식염수와 코카인 5, 10 ㎎ / ㎏)의 변수를 사이에-과목. RM ANOVA 두 시험에서 관찰 유의 한 주 효과 대신에 해석 된 테스트 및 치료 (F _2,20 = 3.68, P <0.05) 사이에 유의 한 상호 작용을 보여 주었다 (F _1,20 = 9.86을, P <0.01) 및 치료 (F _1,20 = 4.37, P <0.05). 사후 비교는 그룹 중에 사전 검사 중에 서로 차이가없는 것으로 나타났다. 사후 테스트에서, 5 ㎎ / ㎏, 10 mg을 / kg은 서로 유의 한 차이가 없었다; 10 ㎎ / ㎏, P & 5 ㎎ / ㎏, P <0.5 : 그러나, 두 그룹은 식염수 전용 대조군보다 코.......

토론

이 프로토콜은 약물 유발 행동 가소성의 양상을 평가하기 위해 평균 랩에 의해 사용될 수있는 각각의 조건화 된 장소 선호도 전위의 증감에 대한 방법을 설명한다. 대부분의 행동 테스트와 마찬가지로, 기본 프로토콜 이외의 추가 가치 고려 사항이 있습니다. 우선, 이들 기술들 각각은 두 단계, 유도 식을 갖는 것으로 생각할 수있다. "유도"행동을 위해 컨디셔닝 동안 발생 CPP의 개발을 포함하고, 감작 대 (일반적 연속) 약물 노출의 초기 기간이다. 과민성에 대한이 철수 한 후 또는 단순히 마지막 연속 노출로 어느 특정 약물 문제로 정의 할 수 있습니다 동안 CPP에 대한 "식", 사후 테스트입니다.

더 나은 자신의 잠재적 영향을 분석 할 수있는 다른 대 다음 단계 중 하나에 제한 조작을 고려하는 가치가있다. 일시적으로 제한 효과와 바이러스 (예를 들어, HSV) 또는 약물의 공동 정부 / 전처리 (예를 들어, 작용.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
Cocaine Hydrochloride USP	Mallinckrodt Pharmaceuticals	0406-1520	연구 목적으로 구매 및 사용 (Schedule II 통제 물질)은 주 및 연방법에 따른 준수와 면허를 필요로 합니다.
조건화된 장소 선호,  Mouse	Med-Associates Inc.	MED-CPP-MS 및 MED-CPP-3013	우리 실험실에서는 이 상자를 사용했지만 많은 대체 상자를 사용할 수 있으며 사용할 수 있습니다.
PAS-Home Cage Activity Monitoring Photobeam Arrays	San Diego Instruments	2325-0223 & 7500-0221	우리 실험실은 텍스트에 설명된 대로 맞춤형 챔버 내부에 이러한 어레이를 보관합니다.  사용 가능한 대안이 있습니다.
일회용 Sani-Cloth 해산 물티슈	PDI	13872

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