Leucocyte-Platelet Rich Fibrin (L-PRF)은 독특한 피브린 구조, 풍부한 혈소판 및 풍부한 성장 인자를 가진 자가 혈소판 농축액의 FDA 승인 제제를 나타냅니다. 여기에서는 L-PRF의 체어 사이드 생성을 위한 프로토콜을 제시하고 단축 테스트 및 봉합사 유지 강도 테스트를 포함한 기계적 특성을 평가합니다.
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이 논문에서
요약
초록
자가 혈소판 농축액은 재생 의학 분야에서 유망한 혁신적인 도구이며 구강 수술에 광범위하게 사용되어 왔습니다. 겔 또는 현탁액인 혈소판 풍부 혈장(PRP)과 달리 Leukocyte-Platelet Rich Fibrin(L-PRF)은 항응고제가 포함되지 않은 전혈에서 체어 사이드에 생성된 고체 3D 피브린 멤브레인입니다. 이 막은 농축된 혈소판과 풍부한 성장 인자를 가진 조밀한 3차원 섬유소 매트릭스를 가지고 있습니다. L-PRF는 우수한 취급 특성과 상처 부위에 대한 봉합성으로 인해 수술에서 인기 있는 보조 약물입니다. 이 연구의 목표는 생성을 입증하고 임상 성공의 기초가 되는 L-PRF의 관련 특성에 대한 자세한 특성을 제공하는 것입니다.
서론
다양한 임상 상황에서 상처를 봉합하고 치유를 개선하기 위해 혈액 및 혈액 유래 제품을 사용하는 것은 주로 피브리노겐 농축액인 피브린 접착제로 시작되었습니다. 피브린 접착제에 혈소판을 첨가하면 혈소판의 강도가 향상되었을 뿐만 아니라 신생 혈관 형성과 재생이 촉진되었습니다. 이러한 이점은 활성화 시 혈소판의 알파 과립에서 다양한 펩타이드 성장 인자를 방출하는 데 기인합니다1. 혈소판 농축액(PC)은 성장 인자를 전달하는 실용적인 방법으로 간주되었으며2 연구 특성화보다는 상업적 이익에 의해 사용이 주도되었습니다3. 실제로, PC는 균질하고 정의된 약리학적 제제와 달리 특성화하기 어려우며, 피브린 기질 내에 갇힌 신호 분자와 혈액 세포(혈소판 및 백혈구)의 포푸리입니다. 다양한 상용 및 독점 제제는 세포 구성, 성장 인자 회복 및 방출4의 역학이 다른 다양한 PC를 생성합니다.
대부분의 구강 수술에서 혈소판 풍부 혈장(PRP) 제제는 혈소판 현탁액이 아닌 개방 수술 상처의 젤로 사용된다는 점을 인식하는 것이 중요합니다. 이러한 상황에서는 트롬빈(thrombin), 염화칼슘(calcium chloride), 배트록소빈(batroxobin) 또는 다른 제제의 첨가에 의해 겔....
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프로토콜
모든 혈액 그리기 절차는 허가 및 인증 전문가에 의해 수행되어야합니다. 연구를위한 인체의 사용은 임상 시험 심사위원회 또는 기타 적절한 권한 승인을 포함한다. 동의서에 관한 및 참가자 식별을 보호하는 특별주의 사항을 따라야합니다. 이 프로토콜에 나와있는 모든 실험은 인간의 혈액 및 / 또는 혈액 제품과 적절한 개인 보호 장비의 처리는 항상 착용해야합니다 포함한다. 폐기물은 생물로 간주 규정에 따라 처리해야한다.
1. 정맥 천자
- 환자 / 참가자를 확인하고 기존의 기록을 확인합니다. 세부 연구를 설명하고 동의를 얻을.
- 평평하고 안정된 표면에 표시 튜브와 개별 환자에 대한 설정 트레이가 있습니다.
- 절차를 설명하고 지원 팔을 편안하게 환자 좌석을 확인합니다. 환자 자신 또는 SH 알리전자는 작은 핀치를 느낄 것이다 및 절차 전반에 걸쳐 여전히 남아 있어야한다.
- 어댑터에 바늘을 연결합니다.
- 손을 씻고 장갑을 착용하십시오.
- 바깥쪽으로 중심에서 동심원 70 % 이소 프로필 알코올로 청소하여 정맥 천자에 대한 전주 포사를 준비합니다. 30 초 동안 자연 건조 사이트를 허용합니다.
- 촉진하여 적절한 정맥을 확인합니다.
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결과
(상부, 중간 및 하부) 층이도 2에 도시 된 다른 섹션에서 L-PRF 응고의 주사 전자 현미경 이미지. 알 수있는 바와 같이, 상기 상부는 더 세포 주로 섬유소 네트워크로 구성된다. 중간 층은 자신의 활성화 및 탈과립의 증거와 혈소판 풍부하다. 하층은 백혈구 및 피브린 매트릭스 내에 포획 적혈구의 혼합물을 갖는다.
단축 인장 시험 및 봉합 고정 강도 시험 : 기계적 특성은 두 가지 모드에서 평가 하였다. 결과는 L-PRF의 점탄성 동작을 보여줍니다. 탄성률 (0.47 MPa의) 낮은 경우에도, 막 터프 (5 N · mm 휴식 에너지)이며 심각한 변형 (217퍼센트,도 3)을 견딜 수있다. 봉합 유지 테스트로부터의 데이터가, 멤브레인의 능력의 지표가 조직에 봉합하는, 상당히 힘든 제안차 변형 가능한 재료 (계수-0.2 MPa의, 변형 140 %, 에너지는 브레이크 3.2 N.mm) L-PRF에 (그림 .......
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토론
자가 혈소판 농축 때문에 성장 인자의 풍부 (18)의 재생 의료 분야에서 유망. 그러나, 이러한 제제는 종종 외과 적 조작이 매우 곤란하게 정의 구조 부족. 여러 번, 현탁액 젤은 예측할 수없는 결과를 초래, 배달의 현장에서 효과적으로 유지되지 않습니다. L-PRF는 혈소판의 발전에 큰 사전이 본질적으로 내포 된 혈소판과 회사 섬유소 막 인 것을 집중 나타냅니다. 이 고체 막은 우수한 핸들링 특성을 가지고, 안전하게 개방 수술 중 해부학 적으로 원하는 위치에 봉합 될 수있다. 그러나, 물리적 및 생물학적 특성은 상대적으로 알려져 있지 않다.
위에서 설명한 단계를 엄격하게 (그림 1)에 부착 할 때 L-PRF는 지속적으로 형성 할 것이다. 좋은 L-PRF 막 생성에 중요한 고려 사항 중 하나 인 TI나 채혈 및 원심 분리 사이에 지연. L-PRF 기술의 성공은 전적으로 통상적 분 이내에 원심 분리기 (19)에.......
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공개 사항
저자는 공개 아무것도 없어 그리고이 책과 관련된 관심의 알려진 충돌이 없는지 확인합니다.
감사의 글
이 프로젝트는 National Center for Advancing Translational Sciences의 CTSA(UL1TR000058)와 Virginia Commonwealth University의 CCTR 기부 기금의 지원을 받았습니다. 이 내용은 전적으로 저자의 책임이며, 미국 국립중개과학발전센터(National Center for Advancing Translational Sciences) 또는 미국 국립보건원(National Institutes of Health)의 공식 견해를 대변하는 것은 아닙니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 바늘 19G | BD | 305186 | |
| 바늘 처리 용기 | Fisherbrand | 14-827-122 | |
| 빨간색 상단 유리 수집 튜브 | BD | 8020129 | |
| 거즈 패드 | Tyco | 5750 | |
| 붕대 | Johnson & Johnson | 5005989 | |
| Surshield | Terumo | SV*S19BL | 안전 날개 주입 세트 |
| 혈액 채취 어셈블리 | BD | 303380 | |
| 지혈 | BD | 367203 | |
| 브랜드 루어 어댑터 | Vacutainer | L42179 | |
| 인트라-스핀 시스템 | Intra-Lock International | ISS110 | 원심분리기 및 Xpression L-PRF FabricationKit |
| 피펫(혈청학적 & 마이크로) | 코닝 | ||
| 메스 | Exelint | 29552 | |
| MTS Bionix 200 | MTS Systems Corporation | 재료 테스트 시스템 | |
| MTS 테스트 작업 4 | MTS Systems Corporation | ||
| Whatman 필터 용지 | Whatman | 1004 070 | |
| SS 교정 결찰 와이어 | Patterson Dental | 628-4228 | |
| 200 프루프 에탄올 | Koptec | V1001 | |
| 헥사메틸디실라잔(HMDS) | 알드리치 | 440191 | |
| 알루미늄 마운팅 스텁 | Ted Pella | 16324 | |
| 양면 탄소 테이프 | PELCO 탭 | 16084-1 | |
| 주사 전자 현미경 | JEOL | LV 5610 | |
| 트립신 | HyClone | SH30042.01 | |
| 세포 배양 인큐베이터 | Thermo Fisher Scientific Inc | 51026282 | |
| 항생제-항진균제 | Gibco | 15240-062 | |
| Genipin | Wako | 078-03021 | |
| 세포 배양 배지 | Gibco | 12000-022 | 최소 필수 매체 |
| MTS 시약 | Promega | G1118 | |
| PMS 시약 | 시그마 | P9625 | |
| 분광 광도계 | BioTek | Epoch 분광 광도계 | |
| 10mm 유리 클로닝 링 | Corning | 3166-10 | |
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| 닌히드린 98% | Aldrich | 454044 | |
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| 글루타르알데히드 | 시그마 | G6257 | |
| 12 웰 플레이트 | 코닝 | 3336 | |
| 96 웰 플레이트 | 코닝 | 3596 |
참고문헌
- Marx, R. E., et al. Platelet-rich plasma Growth factor enhancement for bone grafts. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 85 (6), 638-646 (1998).
- Rodriguez, I. A., Growney Kalaf, E. A., Bowlin, G. L., Sell, S. A.
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