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방법 논문

의 생명 공학에 대한 각질 기반의 나노 섬유의 합성

14.9K 조회수

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DOI:

10.3791/53381

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2016년 2월 7일

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이 논문에서

요약

전기 방사 나노 섬유는 비 기계적 무결성을 중량으로 세포의 성장과 증식을 지원하는 높은 표면적을 갖는다. 이러한 나노 섬유는 의치 넓은 응용 범위를 가진다. 여기서 우리는 전기 방사 기술을 이용하여 각질 / PCL 나노 섬유를 제조하고, 조직 공학에서의 응용 가능성을 위해 섬유를 특성화.

초록

다양한 분야에서의 응용을위한 범용성 및 잠재적으로 인해 전기 방사, 자주 나노 파이버를 제조하기 위해 사용되고있다. 이러한 다공성 나노 섬유의 생산은 그들의 독특한 물리 화학적 특성에 큰 관심이다. 여기에서 우리는 폴리 (ε 카프로 락톤)를 포함하는 케라틴 (PCL) 나노 섬유 (즉, PCL이 / 케라틴 합성 섬유)의 제조에 정교한. 수용성 각질 제 머리카락으로부터 추출 된 다른 비율의 PCL과 혼합 하였다. PCL / 각질의 혼합 용액을 설정 실험실 설계 전기 방사를 이용한 나노 섬유 멤브레인로 변신했다. 섬유 형태 얻어진 나노 파이버의 기계적 특성을 관찰 주 사형 전자 현미경 및 인장 시험기를 사용하여 측정 하였다. 또한, 나노 파이버의 분해성 화학적 특성은 FTIR에 의해 분석 하였다. SEM 이미지는 다른 조성의 PCL / 케라틴 섬유의 균일 한 표면 형상을 나타내었다. 이 PCL / keratiN 섬유는 또한 영률 실패 점 등 뛰어난 기계 특성을 보였다. 섬유 아세포의 세포 부착과 좋은 세포 생존 능력을 증명하여 증식 할 수 있었다. 상술 한 특성에 따라, 우리는 강하게 천연 및 합성 고분자 나노 파이버가 혼합 된 다양한 생물 의학 응용에 사용할 수있는 복합 재료의 우수한 현상을 나타낼 수 있음을 주장하고있다.

서론

전기 방사 나노 섬유는 중합체를 달성 방법으로서 널리 인식되고있다. 섬유는 나노 스케일에서 제조 될 수 있고, 섬유 한 사용자 정의 속성이다. 이러한 발전과 전기 방사 나노 섬유의 특성은 특히 조직 공학에서 생물 의학 공학 애플리케이션에 특히 흥미 있었다. 전기 방사 나노 섬유는 세포 외 매트릭스 유사성을 가지고있어 세포의 부착, 이동 및 증식을 촉진이. 때문에 세포 외 기질 (ECM)이 유사성, 전기 방사 섬유 상처 드레싱, 약물 전달을 돕기 위해 원료로 사용 될 수 있고, 예컨대 간, 뼈, 심장, 근육 (3)와 같은 조직 공학에 대한.

합성 및 천연 기원의 다른 중합체의 다양한 다른 애플리케이션 의공학 4 전기 방사 섬유를 만드는 데 사용되어왔다. 최근에이 성장하고있다합성 및 천연 중합체 (4)를 혼합하여 복합 나노 파이버의 개발의 terest. 이러한 조성물에서 최종 제품은 일반적으로 또한 천연 고분자에서 생물학적 단서와 속성을 채택하면서 합성 고분자와 관련된 기계적 강도를 상속합니다.

합성 및 천연 중합체는 나노 복합체의 합성에 사용되는 바와 같이,이 실험에서, PCL 및 케라틴이 제....

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프로토콜

모든 프로토콜은 연구 준수 및 윤리 노스 캐롤라이나 A & T 주립 대학 사무실의 지침을 따릅니다.

각질 추출 4 1. 화학 준비

  1. 흄 후드, 2 % 중량 / 부피 초산 용액 (PAS) 1000 ml의를 준비하는 것은 탈 (DI) 물 980 ml의 초산 20 ㎖를 추가합니다.
  2. 100 mM 트리스 염기 용액 (TBS) : 1000㎖를 제조 DI 물 1000 ml의 트리스베이스의 12.2 g을 추가하고 완전히 용해 될 때까지 교반한다.
  3. DI 물 30 ㎖에 진한 염산 4 mL로 흘려 흄 후드에 묽은 염산 수용액 (DHAS)을 준비한다.
  4. 화학적으로 처리되거나 변경되지 않은 인간의 머리 잘라낸의 약 20 g의 조달. 헤어 길이 될 수 있습니다.
  5. 따뜻한 물과 비누로 손으로, 철저하게 머리를 씻으십시오. 마지막 헹굼에 대한 탈 (DI) 물을 사용합니다.
  6. 80 ºC O를 두 개의 600 ㎖의 비커에 머리와 장소를 넣어1 시간 동안 VEN.
  7. 비커의 바닥으로부터 액체를 배출시키고 모발이 완전히 건조 될 때까지 오븐에서 제자리.
  8. 분할은 각 비커에 머리 10g을 배치, 600 ml의 비커 사이에 균일하게 머리를 건조. 500 개 이상의 ....

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결과

섬유 형태론
섬유의 SEM 이미지는 모든 섬유 조성물 얻어졌다. 도 3 참조. 섬유 화상 섬유가 랜덤하게 배향되어 있음을 확인한다.

기계 테스트
기계적으로 강한 섬유는 일반적으로 다양한 조직 공학 응용 프로그램이 필요합니다. 이 섬유는 특정 스트레스와 환경 조건 (9)에서 충분한 강도와 유연성을 유지해야한다. 일반적으로, 스캐 폴드 효과 차폐 스트레스를 피하기 위해 목표 조직에 가까운 계수를 갖고 생체의 도중 및 / 또는 시험 관내 세포의 성장 (10)에 충분한 강도를 유지하는 것이 요구된다. 인장 시​​험기의 영률 및 섬유의 파단 강도를 측정.......

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토론

인간의 머리에서 각질의 추출이 성공적으로 이루어졌다. 아세트산은 케라틴은 트리스 자료 추출 할 수 있도록, 인간의 머리에 산화제로서 작용. 케라틴 분말의 제조 인해에만 연구 목적으로 행해졌 사실 소규모이었다. 이 과정은 이미 대규모 제조 산업에서 확립되었다. 소규모 케라틴 추출 목적은 오염 배치 다양성 및 비용 효율성을 제어 할 수 있었다.

각질 추출이 절차의 제한 단계이다. 2 % - 케라틴 분말의 수율은 0.7 매우 낮다. 0.4 g의 각질 - 인간의 머리카락의 20g는 0.14을 얻었다. 전기 방사 된 섬유를 생산하는 또 다른 중요한 단계는 전기 방사에 적합한 용액 제형된다. 케라틴 용이 DI 물에 분산시키고, 그러나, 전기 방사시, 케라틴 / 물 용액은 섬유 형성을 초래하지 않았다. 필요한 m을 제공한다나노 파이버를 생성하는 공중 합체를 olecular 상호 작용은 용액에 도입 하였다. TFE에 용해 PCL은 수소 결합을 통해 각질과 더 강하게 상호 작용을 할 수 있었.......

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공개 사항

저자는 더 경쟁 재정적 이해 관계가 없음을 선언합니다.

감사의 글

저자는 지원 자금에 대한 혁명 금속 생체 적합 물질에 대한 공학 연구 센터 (ERC-0812348) 및 나노 기술 학부 교육 (EEC 1242139)을 통해 국립 과학 재단 (National Science Foundation)에게 감사의 말씀을 전합니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
인간의 머리카락 그린즈버러의 현지 이발소에서 획득
과아세트산시그마 알드리치
PCL(e-카프로락톤 폴리머)시그마 알드리치502-44-3Mn 70-90 kDa
트리플루오로에탄올(TFE)시그마 알드리치75-89-8
트리스 베이스(TrizmaTM 베이스 분말)시그마 알드리치>99.9% 결정질
염산Fischer ScientificA144C-212 Lot093601 Waltham, MA
Kwik-SilWorld Precision InstrumentsSarasota, FL
셀룰로오스 멤브레인Sigma Aldrich12 - 14 kDa 분자 절단
광학 현미경Olympus BX51MBX51M일본
주사 전자 현미경Hitachi SU8000SU8000일본
탁상용 Shimadzu 기계북미 분석 및 측정 기기 AGS-X 시리즈AGS-X 시리즈 컬럼비아, 메릴랜드
푸리에 변환 적외선 분광법Bruker Tensor 2 기기 Billerica, MA
Microcal Origin 소프트웨어Northampton, MA
X-ray diffraction (XRD)Bruker AXS D8 Advance X-ray DiffractometerMadison, WI
Fibroblast 3T3  cellAmerican Tissue Type Culture CollectionManassas, VA
Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEMInvitrogenGrand Island, NY
Spectra max Gemini XPS 마이크로플레이트 리더분자 장치Sunnyvale, CA
학생- Newman-Keuls 사후 테스트SigmaPlot 12 소프트웨어

참고문헌

  1. Huang, Z. -M., Zhang, Y. Z., Kotaki, M., Ramakrishna, S. A review on polymer nanofibers by electrospinning and their applications in nanocomposites. Compos Sci Technol. 63, (2003).
  2. Li, W. J., Laurencin, C. T., Caterson, E. J., Tuan, R. S., Ko, F. K.

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