Method Article

병렬 세그먼트 흐름 열 조정과 멀티 플렉스 감지 활성화

DOI:

10.3791/53448

⸱

December 15th, 2015

 ,  ,  ,  ,  , 
1School of Science and Health, University of Western Sydney

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

여기에서는 다중화 검출을 가능하게 하는 병렬 분할 유동 크로마토그래피 컬럼의 작동 및 튜닝을 위한 프로토콜을 제시합니다.

Abstract

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Active flow technology(AFT)는 유동 불질성을 극복하여 효율성과 감도 측면에서 분리 성능을 높이고 multiplexed detection을 가능하게 하도록 설계된 새로운 형태의 컬럼 기술입니다. 이러한 형태의 AFT는 병렬 세그먼트 흐름(PSF) 컬럼을 사용합니다. PSF 컬럼 배출구 엔드 피팅은 2개 또는 4개의 포트로 구성되며, 최대 4개의 검출기를 연결하도록 다중화할 수 있습니다. PSF 컬럼은 다중화 검출을 위한 플랫폼을 제공할 뿐만 아니라 추가 데드 볼륨 튜브 없이 파괴 및 비파괴 검출기를 동시에 결합할 수 있습니다. 각 포트를 통과하는 유량은 특정 감지기의 요구 사항에 맞게 압력 관리를 통해 조정할 수도 있습니다. PSF 컬럼을 사용하여 다중화 검출을 달성하기 위해 최적의 분리 성능과 결과 품질을 보장하기 위해 제어할 수 있는 여러 파라미터가 있습니다. 즉, 각 포트에 대한 튜브 치수, 각 유형의 검출기에 대한 포트 선택 및 유량 조정입니다. 이 프로토콜은 멀티플렉스 검출 모드에서 작동하는 PSF 컬럼을 사용하고 조정하는 방법을 보여주기 위한 것입니다.

Introduction

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활동 흐름 기술 열

활성 플로우 기술 (AFT) 크로마토 그래피 컬럼은 최근 흐름 이질성 1-6과 관련된 분리의 비 효율성을 극복하기 위해 개발되었고, 또한 다중 검출을 가능하게 할 수 있습니다. 이 특정 통신 우리의 세부 사항에 병렬의 작동 과정은 다중 검출과 흐름 (PSF) 열을 분할. PSF 열의 키 기능적 장점은 : (1) 칼럼 베드의 방사상 중심 영역으로부터의 흐름은, (2) 검출 수단에 의해 처리되어야하는 이동상의 부피 유량의 주연 또는 벽 영역으로부터 격리 소스가 감소되고, (3) 검색 소스 각각 검출 프로세스를 통해 검출 지연을 주입하거나,이어서 포스트 칼럼 유동 스트림 7,8의 분할을 필요로하지 않고 샘플 정보를 확장 다중화 될 수있다. 수 PSF 칼럼의 디자인의 핵심 기능다중 검출 dvantage은 새로운 출구 피팅 및 프릿 조립입니다. (1) 기존의 컬럼에 비해 AFT 컬럼의 사진도. 이 분할 프로세스는 포스트 칼럼 유동 스트림 분할과 동일하지 병렬 분할 흐름 컬럼을 사용하여 얻어지는 것을 이해하는 것이 중요하다. 포스트 칼럼 흐름 스트림 (즉, 축 방향으로), 이에 따라, ....

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Protocol

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참고 :이 프로토콜은 다중 검출을위한 다중 검출기와 결합 된 HPLC 시스템에 PSF 열을 사용하는 방법에 대한 지침이 포함되어 있습니다. 이 프로토콜은 독자를 가정하는 크로마토 그래피 및 다양한 HPLC 검출 방법에 대한 기본 지식과 경험을 가지고 작성되었습니다.

주의 : (메탄올, 즉 MSDS)를 사용하기 전에 모든 재료 및 시약에 대한 물질 안전 보건 자료 (MSDS)를 참조하십시오. 용매 및 고성능 액체 크로마토 그래피 (HPLC) 용리액을 처리 할 때 모든 적절한 안전 관행의 사용을 확인합니다. HPLC, 분석 균형과 검출기 계측 공학 컨트롤의 적절한 사용을 보장하고, 개인 보호 장비 (안전 안경, 장갑, 실험실 코트, 전체 길이 바지와 폐쇄 발가락 신발)의 사용을 보장합니다.

HPLC 기기의 1. 설치

  1. LIN 초순수 (예, 100 % 밀리 Q 물)를 가진 HPLC 기기를 준비전자의 모바일 위상 라인 B에 대한 100 % 메탄올 제조 업체 요구 사항에 따라 펌프를 제거. 사용되는 검출기 중 하나가 MS를하는 경우는, 여기로, 두 이동상 A와 B로 0.1 % 포름산을 추가
  2. 검출기 및 열 사이의 데드 볼륨을 최소화....

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Results

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다중화 HPLC 분석 PSF 모드 (도 1)에 AFT 컬럼을 사용하여 수행하고,도 2에 도시 된 바와 같이 설정 하였다. 설정이 유형의 커피 샘플 전체에 UV-VI를 DPPH • 및 MS를 사용하여 동시에 분석하도록 허용 이온 수 (TIC) 모드. 도 3에 도시 된 바와 같이 크로마토 동시에 기록 되었기 때문에, 체류 시간의 조정에 기초하여 TIC 응답 - ​​응답 DPPH • 커피 시료의 화합물은 다음 쉽게 UV-VI와 MS까지 정합 될 수있다. 긍정적 인 응답은 MS-TIC 검출기에서 본 어디에, 피크 분자량은 DPPH • 피크의 체류 시간은 표에게. 1리스트를 기록하고, UV-VI와 / 또는 MS에 이러한 피크의 반응시켰다 따라서 분자 질량 제공 검출기. AF 허용 다른 탐지 프로세스 사이의 피크를 일치의 용이성복잡한 샘플에 대한 검사 및 특성.......

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Discussion

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이 연구는 특성화 및 다중 검출 병렬 분할 흐름 (PSF) 컬럼을 사용하여 HPLC를 사용하여 커피의 프로파일을 포함한다. PSF 열을 다중화 HPLC는 종래의 다중 검출 프로세스를 사용하여 소요 시간의 분획 내에 분자 특정 정보의 큰 정도를 획득하는 동안 샘플의 데이터의 복잡도를 감소시킴으로써 키 화학적 실체의 특성화 및 식별을 가능하게한다. PSF 열은 멀티 플렉스 검출을위한 플랫폼을 허용하지만, 단지 추가적인 데드 볼륨없이 튜브 모두 파괴 및 비파괴 검출기의 조합. DPPH •, UV-VI와 MS (TIC)는 에스프레소 커피의 분석을 위해 다중화했다.

4 포트 PSF 열은 세 개의 다른 검출기를 이용하여 커피 다중화 분석에 이용 하였다. PSF 열 배출구의 중앙 포트 THRE의 MS 검출기와 접속 된 두주변 E 포트 DPPH • 검출 시스템 또는 UV-비스 검출기 하나에 접속 하였다. 세 번째 사용 가능한 주변 .......

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

저자는 공개할 것이 없습니다.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 작업은 UWS와 ThermoFisher Scientific의 지원을 받았습니다. 저자 중 한 명(DK)은 Australian Postgraduate Award 수상을 인정합니다.

....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
HPLC 기기: 다중화 검출을 위해 선택되는 여러 검출기. 선택한 검출기에는 추가 기기(예: 와 같은 펌프가 필요할 수 있습니다.
병렬 분할 흐름 HPLC 컬럼Thermo Fisher Scientific정의되지 않음곧 상용화
예정 메탄올모든 브랜드HPLC 등급
PEEK 튜빙모든 브랜드다양한 길이 및 ID
컬럼 스토퍼모든 브랜드: 사용하지 않는 주변 장치 포트를 차단합니다.
PEEK 튜브 커터모든 브랜드
, 분석 저울,모든 브랜드
모든 브랜드
용리액 수집 용기,모든 브랜드1-2ml 샘플 바이알을 용리액 수집 용기로 사용할 수 있습니다.
, , 모든 브랜드, 스톱워치, , 의

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. The design of a new concept chromatography column. Analyst. 136 (24), 5127-5130 (2011).
  2. Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. Enhanced separation performance using a new column technol....

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Parallel Segmented Flow ColumnMultiplexed DetectionActive Flow TechnologyHPLC ProcedureFlow Rate AdjustmentDetector ConfigurationPort TuningMobile Phase PreparationDPPH Radical AssayRetention Time Alignment

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