이 프로토콜의 목표는 이식 가능한 무선 원격 측정 장치를 사용하여 의식이 있고 자유롭게 움직이는 마우스의 전신 혈압을 평가하는 것입니다.
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이 논문에서
요약
초록
새로운 혈관 활성 제제의 개발 동안, 동맥 혈압 모니터링은 새로운 제안 된 약물의 효능을 평가하는데 중요하다. 실제로, 유전자 변형 마우스를 이용하여 새로운 잠재적 인 치료 표적의 발견에 집중 조사 전신 동맥압 변화 안정적 장기 평가를 필요로한다. 현재 외래 마우스에서 혈압 장기간 측정을 얻기위한 금 표준 동맥 삽관을 필요 이식 무선 송신기를 사용한다. 이 기술은 억제 또는 데이터 샘플링 동안에 응력 아티팩트를 도입 동물을 마취, 테 더링에 대한 필요성을 제거한다. 그러나, 도관을 통해 마우스에서 동맥 혈압 모니터링 인해 동맥의 작은 크기에 다소 어려울 수있다. 여기에서 우리는 무선 송신기 및 경동맥 (c)의 성공적인 피하 주입을위한 중요한 핵심 구절을 설명하는 단계별 가이드를 제시마우스의 고리 화. 또한 수술 후 회복 기간 후 자유롭게 움직이는 마우스로부터 취한 장기 혈압 행위의 예를 포함한다. 이 절차를 수행하면 동시에 여러 동물의 신뢰성 직접 혈압 녹음을 수 있습니다.
서론
고혈압은 논란의 여지가 선진국과 개발 도상국의 1에 모두 중요한 공중 보건 문제이며, 심혈관 질환의 주요 위험 요인 중 하나입니다. 실험 고혈압의 여러 동물 모델이 인간에서 관찰되는 것과 같은 고혈압 성 반응을 모방하기 위해 개발되었다. 다른 중, 외래 마우스 기원과 고혈압에 만성 노출의 결과 생체 분석에 허용 고혈압의 진행을 연구하는 훌륭한 모델을 나타냅니다.
혈압은 마우스 (BP) 모니터링은 생리와 고혈압과 심장 장애 3, 4과 같은 질병의 병태 생리에 관여하는 여러 메커니즘을 해명하는 연구를 도왔다. 사실, 마우스 게놈의 조작은 고혈압 5, 6을 공부 유전자 변형 또는 유전자 대상 모델에 적합한의 생성을 허용했다. 그러나, 부드러운 조작의식 마우스의 진정 또는 안정제의 사용은 근본적으로 혈압 7에 영향을하면서 잠재적으로 데이터 수집시 유물을 소개 할 수 감동이를 유도한다. 이러한 측면은 특히 중요 장기 BP 모니터링을 시도 할 때를 고려하여 수행되어야한다.
생쥐가 BP를 기록하는 여러 가지 방법이 있고, 현재 가장 일반적인 기술 사....
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프로토콜
윤리 문 :이 비디오 문서에서 언급 된 모든 동물 절차를 검토하고 테네시 건강 과학 센터의 대학의 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)에 의해 승인되었다.
참고 : 수술을 통해 멸균 미세 악기를 사용합니다. 수술 장비는 1500 ° F (815.6 ° C)의 최적의 살균 온도에서 적외선 살균기를 이용하여 멸균 할 수있다. 제조업체의 지침에와 카테터의 끝이 제조 업체에서 제공하는 특수 젤 리필되었는지에 따라 전체 송신기를 소독해야합니다 동물에 넣기 전에 Telemeters 그러나, 재사용 할 수 있습니다.
1. 실험 동물
- 수행 할 모든 실험에 대한 IACUC 승인을 얻습니다. 기관 IACUC와 상담이 높은이 절차 후 수술 후 진통제 사용을위한 요구 사항에 대한 권장합니다.
- C에서 동물을 유지21 ° C, 상대 습도 60 %의 주위 온도와 음식과 물을 무료로 이용할와 12 시간의 명암주기를 갖는 limate 제어 객실을 보유하고 있습니다.
주 : 마우스 본체는 원격 프로브 (긴 approximatively 1cm X 직경 2cm)을 수용하기 때문에, 그것을 20g 이상의 체중 쥐를 사용하는 것이 바람직하다.
2. 마취 및 수술 준비
- ....
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결과
데이터는 원격 수신기에 의해 획득 될 수있다; 트레이스 품질 제어 (도 1a)에 대한 컴퓨터 화면에 가시화된다. 이러한 동물 ID, 확장기 혈압 및 수축기 혈압 상세도 (도 1B)를 나타낸다. 동맥 혈압이 지속적으로 (24)를 기록 할 수있다, 또는 짧은 프로그램 간격에 대한 (즉, 60 초 획득 시간마다). 데이터가 자동으로 나중에 분석을 위해 하드 디스크에 저장 될 수있다. 3 일 연속 녹화에서 BP 데이터 (그림 2) 도시 평균, 어둠과 빛주기 사이의 일주기 리듬의 변화를 감상 할 수있다. 압력 변화 및 심장 속도의 평균을 계산 시간이 역모를 꾸몄다했다.
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토론
이식 무선 원격 측정은 지난 10 년간 크게 개선했다; 작은 프로브 크기는 동물에 대한 이식이 적은 외상하게, 장기간 배터리 수명 비용을 감소시키는 데 도움이 독립적 텔레 주파수는 수신기 사이의 크로스 토크를 제거한다. 텔레 자유롭게 다른 기술 8,9에 필요한 구속, 인간의 상호 작용, 또는 마취제의 사용과 관련된 아티팩트없이 동물을 이동하는 생체 변수의 다양한 수집 최신식있어서 고려된다.
그러나, 그 기술의 단점들 중 일부는 장비 및 소프트웨어의 초기 비용과 연관된다. 송신기들은 손상 깨지기 쉽다, 배터리는 결국 전력 부족 않고 교체 될 필요가있다. 이 회사는 저렴한 비용으로 그 손상 프로브를 닦다 제공하지만, 비용은 여전히 실험실 금지 될 수 있습니다.또한,이 방법은 기술적으로 어려울 수 있으며, 실제로는 신뢰할 BP 측정을 달성하기 위해 요구된다. 마지막으로, 우리의 손에 약 5 %의 사망률 관련된 몇 가지 수술 후이있다. 이것은 극적으로 특정 치.......
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공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다.
감사의 글
이 작업은 미국 국립보건원(NIH/NHLBI)의 지원을 받았습니다. HL114869] 및 UTHSC에서 SM으로의 지원.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 소동물 마취 시스템 | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | 저유량 소동물 마취 시스템 | |
| 패드 워머 및 마우스 온도계 | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | ||
| 양안 현미경 | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | KSCXTS-1121 | 붐 스탠드 폴 및 상단 LED |
| 지혈 집게 | 집게 Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | INS750451 | 혈관 또는 태그 봉합사를 고정하는 데 사용됩니다. |
| Small metal Clips, 7mm, Stainless Steel | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | INS750344 | 피부 폐쇄에 사용됩니다 |
| Betadine 솔루션 | Purdue Products LP, Stamford, CT, USA | NDC-67618-150-01 | 10 % 포비돈 요오드 국소 용액 |
| Abott | Laboratories | 04930-04-10 | 조직 건조를 방지하는 데 필요합니다. |
| 절개/수술 부위의 털 제거에 필요한 | Nair | ||
| Braide 실크 봉합 | Teleflex Medical OEM, 코번트리, 코네티컷, 미국 | 크기 5.0, 6.0, 7.0 | |
| 에탄올 | 2716 | 70% 에탄올 소독용 | |
| 스프링 가위 | 미세 과학 도구 | 15000-10 | 경미한 해부 |
| 용 가위 (옆으로 기울어 짐) | 미세 과학 도구 | 14063-011 | No. 3 핸들 |
| 메스 블레이드 | 2976-0 | No. 10 | |
| 집게 (곡선) | 고정용 | Fine Science Tool | 11150-10 |
| 집게 (직선) | 조직 | ||
| 고정용 Fine Science Tool 11151-10바늘 홀더 | 봉합용 | Fine Science Tool | 12002-12 |
| Fine Needle nose Forceps | Fine Science Tool | ||
| Isoflurane | Henry Schein Animal Health, Melville, New York, USA | 일반 흡입 마취제 | |
| Sterilizer | Benchmark Scientific, 116 Corporate Blvd, South Plainfield, NJ, USA | B1000 | 살균 수술 도구 적외선 가열 거즈 패드를 사용하여 5-10 초 안에 |
| Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA | JJ8513 | 은 상처 청소, 준비, 문지르기 또는 드레싱에 사용합니다 | |
| Telemetry Device | Data Sciences International, St. Paul, MN, USA | DSI-PA-C10 | 은 자유롭게 움직이는 마우스의 혈압을 기록합니다 |
| . 텔레메트리 수신기 시스템 PC | Data Sciences International, St. Paul, MN, USA | ||
| Tubing | Instech Laboratories, Plymouth와 함께 사용 회의, PA USA | BTPE-90 | |
| 용기 캐뉼레이션 펜셉스, 13 cm, 0.5 mm OD | 세계 정밀 기기 | 503374 | 특수 베슬 캐뉼레이션 펜치 |
| 티슈 접착제 | 3M 동물 관리 제품, 미국 미네소타주 세인트폴 | NAC No.: 11380041 | 경미한 상처를 봉합하는 데 사용되며, 종종 봉합 및/또는 붕대가 필요하지 않습니다 |
| . 체중계 | BB300 | 정밀 분석 실험실 저울 |
참고문헌
- Danaei, G., et al. The preventable causes of death in the United States: comparative risk assessment of dietary, lifestyle, and metabolic risk factors. PLoS Med. 6 (4), e1000058(2009).
- Dornas, W. C., Silva, M. E. Animal models ....
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