마우스의 심장 판막 질환의 종합 표현형 특성에 대한 심 초음파 접근 및 프로토콜

요약

이 프로토콜은 마우스의 심장 및 심장 판막 기능의 포괄적인 표현형을 위한 심초음파 접근 방식에 대한 자세한 설명을 제공합니다.

초록

이 원고와 함께 제공되는 비디오의 목적은 설치류의 심장 판막 기능을 이미징하는 데 사용되는 방법과 접근 방식에 대한 개요를 제공하는 것이며, 적절한 마취 방법, 사용된 심초음파 창, 이미지 획득을 위한 이미징 평면 및 프로브 방향, 데이터 분석 방법, 심장 및 판막 기능 평가를 위한 새로운 기술의 한계에 대한 자세한 설명이 있습니다. 중요한 것은 전임상 동물 모델에서 판막 질환의 발병에 대한 통찰력을 얻기 위해 활용할 수 있는 심장 및 심장 판막 영상에 대한 몇 가지 미래 연구 분야를 강조한다는 것입니다. 우리는 생쥐의 심장 및 심장 판막 기능을 평가하기 위한 체계적인 접근 방식을 사용하면 보다 강력하고 재현 가능한 데이터를 얻을 수 있을 뿐만 아니라 유전적으로 변형된 및/또는 생리학적으로 스트레스를 받은 생쥐에서 이전에 과소평가된 표현형을 쉽게 발견할 수 있다고 제안합니다.

서론

노화는 심장 혈관 석회화 ¹ 점진적 증가와 연관되어있다. 혈역학 적으로 유의 한 대동맥 판막 협착 (65) ² 세 이상 인구의 3 %에 영향을 미치는, 심지어 중간 대동맥 판막 협착 (3~4m / s의 피크 속도)을 가진 환자는 40 % 미만의 5 년 무 사건 생존율이 ^3. 현재,이 대동맥 판막의 석회화의 진행을 느리게 할 효과적인 치료법은 없으며, 수술 대동맥 판막 치환술 고급 대동맥 판막 협착증 ⁴ 사용할 수있는 유일한 치료입니다.

개시 및 대동맥 판막의 석회화의 진행에 기여하는 메커니즘의 깊은 이해를 확보하기위한 연구는 대동맥 판막 협착 ^{(5), (6)을} 관리하는 약물과 비 수술 방법으로 이동에서 중요한 첫 번째 단계입니다. 유전학적인LY-변경 마우스는 다양한 질병에 기여 이제 대동맥 판막 협착 ^{6, 7, 8의} 생물학을 이해하기위한 역학적 연구의 최전선에 오는 메커니즘에 대한 우리의 이해를 개발에 중요한 역할을했다. 같은 다른 심혈 관계 질환과는 달리 죽상 동맥 경화증과 심장 장애 혈관과 심실 기능을 평가하기위한 표준 프로토콜이 잘 확립-이 생쥐의 심장 판막 기능의 생체 표현형과 관련된 고유 한 문제가 대부분입니다. 최근 리뷰 많은 이미징 및 설치류 ^{9, 10, 11} 밸브 기능을 평가하는 데 사용 침습적 양식의 장점과 단점에 대한 철저한 토론을 제공하고 있지만, 지금까지, 우리는 COMPRE을 제공하는 출판물을 인식하지 못합니다를 면밀히는 단계별 생쥐의 표현형의 심장 판막 기능을위한 프로토콜을.

이 논문의 목적은 쥐 심장 판막 기능 표현형 방법 및 프로토콜을 설명한다. 모든 방법과 절차는 메이요 클리닉 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다. 이 프로토콜의 핵심 요소는 마취 깊이 심장 기능의 평가 및 심장 판막 기능의 평가를 포함한다. 우리는이 보고서는 심장 판막 질환의 분야에서 연구를 추구에 관심 수사관을 안내하는 역할을하지 않지만이 빠르게 성장하는 분야에서 데이터의 재현성 및 유효성을 보장하기 위해 프로토콜 표준화에 관련된 국내 및 국제 대화를 시작하기를 바랍니다. 중요한 것은, 고해상도 초음파 시스템을 이용하여 성공적으로 이미징 (일반적으로 초음파 검사에 사용되는 용어) 초음파의 원리 작동 지식 프린 기본적인 이해를 필요심장 생리학 및 초음파 검사와 유의 한 경험 레는 설치류에서 심장 기능의 정확하고 시간을 효율적으로 평가를 허용합니다.

프로토콜

1. 재료 및 장비 (표 1 및 그림 1) 준비

1. 초음파 기계를 켭니다. 동물 ID, 날짜 및 시간 (직렬 이미징 실험) 및 기타 관련 정보를 입력합니다.
2. 고주파수 초음파 변환기 ~ 20g 또는 20g ~보다 생쥐는 30 메가 헤르츠 이하의 촬상 마우스 40 MHz의 사용.
3. 심전도에 플랫폼을 연결합니다 (ECG)는 특정 양식에 대한 영상의 ECG 게이팅을 모니터링.
   주 : 비판적 이것도 마취 적절한 깊이의 여러 지표 중 하나로서 사용될 수있다 심박수 (HR)의 순간 계산을 허용한다.
4. 37 ° C에 플랫폼을 사전 가열한다.
   주 : 모든 시판 초음파 시스템은 B 모드, M 모드, 도플러 초음파 검사를위한 화상 취득 제어 및 학습 관리 제어를 제공하는 제어 패널이있다. 심장 심장 측정 공구가 자동 측정을위한 기기에 포함심장과 판막 기능의 일반적인 심 초음파 매개 변수 및 계산.

2. 마취의 이미징 및 유도를위한 마우스를 준비합니다

1. 부드럽게 꼬리로 마우스를 선택하고 단단히 목의 목덜미에 동물을 개최합니다.
2. 코 콘에 동물의 코를 안내합니다. 1 %의 이소 플루 란 마취 흐름을 시작합니다. 동물이 가스에 노출 된 3 ~ 5 초 이내에 진정되어 있는지 확인합니다.
3. 신속하고 정확하게은 앞발과 뒷발이 플랫폼의 ECG 센서에 놓여있는 것을 확인하는 앙와위에서 플랫폼에 동물을 배치합니다.
4. 조심스럽게 가볍게 노즈콘 장치에있어서 헤드를 고정 꼬리 안정화 접착 테이프를 적용하는 접착 테이프를 적용 사지에 접착 테이프로 고정 동물. 두 뒷다리와 앞발은 생리 학적 이미징 시스템으로 안정적이고 명확한 ECG 신호 획득을 보장하기 위해 평평해야합니다.
5. 인사를 확인합니다. 이는 심상 사용하십니까ECG 기능을 갖춘 외부 ECG 장치와 카 플랫폼입니다. 기준 HR 700 BPM 600 사이에 있는지 확인하십시오. 인사가 어떤 상황에서도 450 BPM 이하로 떨어지지 않도록하십시오.
   주 : 절차 동안, HR 약간 마취로 인해 감소 할 수 있지만, 대부분의 경우 500 BPM 이상이어야한다.
6. 따라서 작은 단위 (~ 0.1 % 씩 증가마다 15 초 마취의 안정 상태에 도달 할 때까지)에 의해 마취의 흐름을 조절합니다.
   주 : 마취 안정 상태는 전술 한 심장 파라미터가 유지된다 (단계 2.5 참조), 동물이 명백히 다양한 촬상 윈도우 프로브의 위치에서 자극에 반응하지 않는 조건이다. 중요한 것은,이 마우스에서 현저 cardiodepression 결과, 수술 적 단계의 마취 아니다. 연장 이미징 세션의 경우, 건조를 방지하기 위해 눈에 수의사 연고의 적용을 권장합니다.
7. 직장 온도계를 사용하여 체온을 확인한다. 36.5 ° C와 38 ° C 사이의 온도를 유지합니다.
   참고 : 적절한 환경 제어 방 및 가열 플랫폼, 체온 (직장 측정은) 결과적으로, 시간이 지남에 심장 혈관 혈류 역학에 영향을 미치는 교란 요인이 아닌, 전체 과정 동안 일정하게 유지합니다.
8. 잔털과 함께 사용하도록 설계된 전기 이발기를 사용하여 가슴으로부터 모발을 면도. 젖은 종이 타월로 깨끗이 가슴을 닦습니다. 동물은 이미징을위한 준비가되어 있습니다.
   주 : 모발의 화학적 제거는 또한 수행 될 수 있지만, 그들은 장기 실험에서 시간에 비해 상당한 피부 자극을 일으킬 수 있으므로, 이러한 화합물의 사용을 피한다. 또한, 해당 어플리케이션과 같은 화학적 기반 제모 제품의 제거는 2-3 분 (~ 10 내지 20 %의)으로 마취 노출 기간을 연장 할 수있다. 피부 준비 완료 마취의 유도에서 총 시간보다 3 분 소요됩니다.

_title "> 3. 심장 초음파 이미지를 획득의 기본 원칙과 지침을 따르십시오

주 : B 모드 / 2-D, M 모드, 도플러 (스펙트럼 펄스 파 도플러 및 컬러 플로우 도플러 영상) : 화상 취득에 사용 된 세 초음파 양식이있다. 흉골과 혀끝의 창 (그림 2) : 심장과 심장 밸브의 이미지를 수집하는 데 사용되는 두 가지 기본 변환기 위치가 있습니다.

1. 각 트랜스 듀서 위치에서 수동으로 회전 변환기를 angulating하여 길고 짧은 축에 심장 상대의 여러 단층 이미지를 얻을 수 있습니다.
   주 : 만곡 가슴 벽에 고정 된 점으로부터 트랜스 듀서의 좌우 이동을 지칭하면서 회전이 선회 또는 흉벽에 고정 된 위치에서 트랜스 듀서를 왜곡을 말한다. 모든 초음파 트랜스 듀서는 홈 (노치), 외부 리브 또는 버튼 형태의 이미지 인덱스 마커를 갖는다.
2. 확인하는 초음파 시그NAL 따라 트랜스 듀서의 위치를 ​​조정함으로써 목표 구조에 수직이다.
3. 흐름에 송신 초음파 빔을 평행하게 정렬하여 컬러 플로우 피크 속도 신호를 최적화한다. 초음파 빔과 유량 사이의 각도는 60 ° 미만이어야한다.
4. 조작부 컨트롤을 사용하여 이미지 품질을 최적화한다. 단지 질의의 영역은, 화상 표시를 기입한다.
   참고 : 트랜스 듀서 및 플랫폼 위치의 미세 조정은 거의 항상 선명한 이미지를 얻을 필요합니다. 심지어 내부 해부학에 최적의 조건, 호흡 운동, 가슴 벽 해부학 (예를 들어, 작은 리브 간격) 및 변경시 (고유의 질병 유발 모두) 음향 창을 제한하고 영상 획득이 매우 도전 할 수 있습니다.
5. M 모드 및 2-D / B 모드에서 좌심실 치수를 측정 할 때, 대부분의 에코 연속 선으로 측정 캘리퍼를 배치했다.
6. 컬러 도플러 부문를 조정패널에서 발견 된 섹터 제어를 조정함으로써 질의의 영역 D 샘플 볼륨.
   주 : 도플러 연구에서 컬러 코딩 방식은 속도와 혈류량의 방향성을 나타낸다. 빨간색 도플러 신호 변환기 향하여 층류 혈류량을 나타낸다. 파란색 도플러 신호는 멀리 트랜스 듀서에서 층류를 나타냅니다. A "모자이크"컬러 패턴 (일반적으로 판막 협착 또는 판막 폐쇄 부전 발생) 난류 또는 비 층류 혈류의 영역을 나타냅니다.
7. 5 개의 스트립들 (100 프레임) 실시간 B- 모드의 최소 기록 / 2D 오프라인 분석을 위해 각각의 촬상 창 반향.
   참고 : 시판 에코 기계 프레임 또는 시네 루프 크기가 ​​미리 설정된 수를 캡처 영상 획득 설정을 갖는다. 이상 시네 루프를 취득 할 수 있도록 화상 취득 설정이 수정 될 수있다. 고품질의 이미지를 획득 풍부한 경험과 실험이 필요하다. Investig의 ators 많은 전망과 음향 창에서 이미지를 얻기 변환기 배치 및 플랫폼 각도의 오른쪽 조합을 찾아야합니다.

대동맥 밸브 4. 평가 (AV) 기능

주 : 대동맥 판막 기능의 평가는 밸브의 질적 평가 (예를 들면, 인식 교두 두께 증가로 인해 판막 석회화에 에코 및 존재 또는 컬러 도플러를 이용한 역류 제트의 유무) 및 밸브 기능의 정량적 측정을 포함한다 (예를 들어, 피크 transvalvular 속도 및 끝 이격 거리).

1. 이미지를 B 모드 화상 취득을 선택하여 대동맥판 시작.
2. 안전하게 플랫폼과 멀리 조사에서 직면하고 머리에 고정 동물로, 왼쪽 테이블에 15 ~ 20 °를 기울이십시오. 이 흉벽에 가까운 전방 및 좌측 심장을 가져올 것이다. ㄱ에서 직접 변환기에 초음파 젤의 충분한 양을 적용하거나nimal의 가슴.
3. 뒤쪽을 가리키는 트랜스 듀서 (그림 2)의 이미지 인덱스 마커와 마음의 긴 축과 약 90 ° 수직 parasternally 변환기를, 배치합니다. 는 AV가보기에 올 때까지 2D / B 모드에있는 동안, 트랜스 듀서 cephalad를 밀어 넣습니다. 이 판막의 "단축"이다.
   참고 : 정상 대동맥 판막은 수축기 동안 널리 열고 혈액에는 역류 다시 좌심실로이 없도록 이완기 동안 적절하게 닫습니다 세 얇은 교두가 있습니다. 교두 매우 빠르게 이동 매우 얇고, 종종 시각적으로 어려울 수있다.
4. caudad 이미지 인덱스 마커 포인트까지 트랜스 듀서를 시계 방향으로 돌립니다. 대동맥 루트, 대동맥 판막, 좌심실 유출 관, 승모판 막, 좌심방, 이미지 디스플레이의 우심실 유출의 일부를 관찰한다.
   참고 :이 AV의 "흉골 장축"이다. 소노 그래퍼해야이후 M 모드 이미징 및 분석 (아래 참조)을 허용합니다 B 모드 이미지에서 심장주기에 걸쳐 볼이 대동맥 판막 교두가 있음을 확인.
5. 이보기에서 대동맥 근부를 평가합니다. 대동맥 루트 이미지가 대동맥 근부의 가장 큰 치수를 포함 할 수 있도록 조심스럽게 앞뒤로 쓸어. 컴퓨터에 내장 된 측정 도구와 관련된 전자 캘리퍼스를 사용하여 대동맥 최대 안테 - 후방 치수를 측정한다.
6. 긴 축에서 대동맥 판막을 찾습니다. 만 대동맥판 제어판의 화상 폭 버튼을 조절함으로써 이미지 디스플레이되도록 이미지 폭을 줄인다. 정확하게 대동맥 판막 첨단 분리를 평가하기 위해 대동맥 밸브의 끝을 교차 심문의 M 모드 라인을 배치합니다.
7. 대동맥 판막의 M 모드 표시에서, 지표 성과와 관련된 전자 캘리퍼스를 사용하여 교두 이격 거리 (수축기의 상자 형 모양)을 측정기계에 포함 장담 도구입니다.
   참고 : M-촬상 모드의 가장 큰 장점은 대동맥 판막 기능의 평가에 필수적인 매우 높은 시간 해상도이다. 는 AV의 M 모드 이미지는 단기 및 장축 뷰 모두에서 취득 할 수 있지만, 촬상 평면 용이의 선단의 방향과 위치를 식별 할 소노 수 있기 때문에 상기 흉골 장축 뷰는 일반적으로 바람직 수축기 교두.
8. 여전히 대동맥 판막의 흉골 장축 관점에서, 제어 패널의 컬러 도플러 제어 키를 누른 상태. 대동맥 밸브의 영역에 컬러 도플러을 적용합니다.
   주 : 수축기 대동맥 밸브를 통해 좌심실에서 정상 흐름 트랜스 듀서 측으로하고 따라서 적색 인코딩된다.
9. 대동맥 판막 폐쇄 부전의 유무를 문서화하십시오.
   주 : 대동맥 폐쇄 부전이 이완기 동안 발생 멀리 transduc에서 지시하는 비정상적인 흐름이다어; 따라서, 청색 인코딩된다.
10. 펄스 파 도플러 제어 키를 누릅니다. 조작부에있는 트랙볼을 이용하여 초음파 빔과 혈류량과의 각도가 기울어 미만 60 ° 인 것을 확인한 바로 대동맥판 위에 근위 대동맥에서, 펄스 파형의 샘플 볼륨을 배치 플랫폼 및 / 또는 트랜스 듀서. 가능하다면, 흉골 노치 창 대동맥판 걸쳐 최고 속도를 획득.
11. 시스템 (도 3c 및도 3f)에 내장 된 측정 도구와 관련된 전자 캘리퍼스를 사용하여 스펙트럼 표시에서 최고 속도를 측정.
    주 : 모자이크 컬러 비 층류 패턴을 포함 할 가능성이 높은 유동 속도를 나타낸다.

승모판 막 5. 평가 (MV) 기능

참고 : 승모판 막 기능의 평가는 밸브의 질적 평가를 (예를 들면, 당 포함때문에 판막 석회화, 존재 또는 컬러 도플러를 이용하여 역류 제트) 및 밸브 기능의 양적 조치의 부재로 수신 된 첨단 두께 증가 에코.

1. B-모드에서 혀끝의 위치에 트랜스 듀서를 놓습니다. 이 마우스 (도 2C)의 머리 방향으로 기울어 지도록 배치 변환기. 이미지 디스플레이에 우심실 (RV), 좌심실 (LV), 우심방 (RA) 및 좌심방 (LA)를 관찰한다. 동물가 LV 내로 개방으로 승모판를 시각화하는 "헤드 - 다운"위치에 있도록 수동 약간 기울 플랫폼.
   주 : 꼭대기 4 챔버보기는 승모판 막과 삼첨판 밸브 물론 승모판 막륜의 조직 속도를 통해 혈액 검사 속도를위한 최적이다. 이것은 또한 RV 및 심실 중격의 움직임 크기를 평가하는 좋은 도면이다.
2. 꼭대기 4 챔버보기에서 이미지 폭을 줄여 초점 승모판을 가지고.승모판의 전단지는 두 개의 얇은, 모바일 필라멘트 열고 각 심장주기 동안 폐쇄로 나타나는지 관찰한다.
   참고 : "정상"마우스의 승모판 막 전단지 영상이 생리 HR (즉,> 450 BPM)에서 수행되는 경우 시각화하기 어려울 수 있습니다.
3. 전단지의 두께를 평가하기 위해 승모판 막에 걸쳐 M 모드 커서를 놓습니다.
   참고 :이 초음파 빔 (그림 4)에 수직 일 때 앞쪽에 전단지가 가장 수축기으로 시각화된다.
4. 꼭대기 4 챔버보기를 사용하여, 이완기 승모판을 통해 이미지에 좌심방의 흐름을 컬러 도플러를 적용합니다. 승모판 막 폐쇄 부전에 대한 관찰한다.
   주 : 유동은 트랜스 듀서 향하는 따라서 적색 인코딩된다. 역류 흐름은 블루 코드와 수축기 (그림 5) 동안 발생한다.
5. 혀끝의 긴 축보기를 사용하여 펄스 파 모드로 전환합니다. 의 팁으로 도플러 샘플 볼륨 이동승모판 막 전단지. 승모판 유입 스펙트럼 표시의 2 개의 피크를 참고. 전단지 잘 - 가시화되지 않으면 밝은 적색 컬러 모자이크 패턴 영역을 식별하고 그 때의 샘플 량을 배치 컬러 도플러를 사용한다.
   참고 : 승모판 흐름의 스펙트럼 디스플레이는 느린 홈런 (<450 BPM)에서 두 개의 봉우리가 있습니다. 정상 홈런에서 (> 450 BPM)의 early- (E)와 후기 작성은 (A) 흐름은 융합된다. 승모판 전체 흐름의 도플러 스펙트럼 디스플레이 좌심실 확장기 함수의 평가에 사용된다 (단계 7.5 참조).

마우스 오른쪽 단추로 양면 심장 밸브 기능 6. 평가

참고 : 삼첨판과 폐동맥 밸브는 오른쪽 양면 심장 판막을 포함한다. 폐동맥 밸브는 흉골 장기 및 단기 축 모두보기에 가시화 될 수있는 동안 삼첨판은 쉽게, 혀끝의 긴 축보기에 가시화 될 수있다.

1. 혀끝의 긴 축보기에서, 기울이거나 트랜스 듀서 팁을 U 포인트우심실 이미지 디스플레이의 중앙에 요동 노래. 단 우심실이 화상 표시부에 표시되도록 이미지 폭을 줄인다.
2. 같은 이미지면에서, 우심방과 우심실 및 개폐 각 심장주기의 과정을 통해 가까운 사이에 얇은, 모바일 필라멘트를 나타나는 삼첨판 막 전단지를 시각화.
3. 삼첨판의 영역에서 컬러 도플러을 적용합니다. 삼첨판 막 폐쇄 부전에 대한합니다.
   노트 : 정상 유량 이완기 발생은 트랜스 듀서에 관한 것이다, 따라서 적색 인코딩된다. 이상 역류 흐름은 수축기 멀리 트랜스 듀서에 관한 것이다, 따라서 청색 부호화 일어난다. 역류 제트의 피크 속도 우심실 수축기 혈압을 측정하기 위해 사용된다.
4. 대동맥 판막의 수준에서 흉골 짧은 축 위치 트랜스 듀서를 이동. 대동맥 판막 위 오른쪽 심실 OUTF 있습니다낮은 기관은 폐동맥 밸브, 근위 주 폐동맥, 오른쪽과 왼쪽 폐 동맥 (그림 6).
5. 수정 된 흉골 긴 축 위치로 변환기를 시계 방향으로 돌립니다. 그리고, 폐동맥 밸브의 짧은 축보기를 얻기 위해 약간 위쪽으로 기울어 변환기.
6. 이러한 관점에서, 폐동맥 밸브 교두 (도 7)의 이격 거리를 평가하는 M 모드 촬상을 적용한다.
7. 판막 폐쇄 부전 (이완기 동안 모자이크 패턴, 고속 제트) 및 협착 (수축기 모자이크 패턴, 고속 제트)에 대해 평가하는 폐동맥 밸브의 영역에서 컬러 도플러을 적용합니다.
8. 펄스 파 컨트롤 키를 누르고 그냥 폐동맥 밸브 후 샘플 볼륨을 배치합니다.
   주 : 흐름의 도플러 스펙트럼 디스플레이 분석 폐동맥압 (도 8)를 추정하는데 사용된다.

심장 기능 7. 평가

참고 : 심장 기능의 평가는 좌심실 수축력의 질적 평가를 포함한다 (예를 들어, 구혈률, 지역 벽 운동 이상 및 벽의 지각 두께의 시각 추정)과 좌심실의 정량적 측정 기능 (예를 들어, 구혈률, 좌심실 질량, 좌심실 이완기 기능, 심근 성능 지표).

1. 유두 근육의 수준에서 흉골 짧은 축 위치 변환기와, 2D / B 모드에서 LV의 짧은 축보기를 구합니다. 정점에베이스에서 LV를 스캔 아래로 변환기를 위로 이동합니다. 벽 운동 이상에 대한 관찰한다.
2. 좌심실의 흉골 짧은 축 관점에서, 상기 제어 패널에있는 M 모드 버튼을 누른다. 트랙볼을 사용 유두근과 obtai 수준에서 좌심실 캐비티의 중심에 M 모드 커서를n은 M 모드 이미지.
3. 전방 벽과 후방 벽 사이의 거리가 최대이며, 모두 전방 및 후방 벽의 안쪽 운동이 최대 (그림 9)는 최종 수축기에 최종 이완기,의 좌심실 공동 치수를 측정한다.
4. 최종 이완기 및 최종 수축기의 전방 및 후방 벽 두께를 측정한다.
   참고 : 유두 근육이 올바른 이미지 평면을 보장하기 위해 필수적인 랜드 마크 있지만, 어떤 측정에 포함하지 않도록주의.
5. 꼭대기 창으로 트랜스 듀서를 이동합니다. 단계 5.1를 참조하십시오. 꼭대기 장축보기 승모판 걸쳐 혈류 파 펄스 도플러를 사용하여 좌심실 확장기 함수를 평가한다.
6. 승모판의 전단지의 끝에서 샘플 볼륨을 놓습니다. 승모판 걸쳐 펄스 파 속도의 도플러 스펙트럼 표시에서 피크 승모판 유입 속도를 측정.
7. LV의 infl 사이의 샘플 볼륨의 위치를흐름 및 유출. 승모판 및 대동맥 판막 폐쇄와 개방 신호를합니다. isovolumic 휴식 시간, isovolumic 수축 시간, 좌심실 구출 시간 (그림 10)을 측정한다.
8. 혀끝의 긴 축보기에서 승모판 륜의 조직 도플러 영상 (TDI)을 수행합니다. TDI 컨트롤 키를 누르고 승모판 륜의 내측 측면에서 샘플 볼륨을 배치합니다. 샘플 볼륨이 승모판 전단지에 잠식하지 않도록해야합니다. 0.21 mm 및 0.27 mm 사이의 도플러 샘플 볼륨 크기를 유지합니다. 승모판 고리 (그림 11)의 초기 이완기 속도 (E ')을 측정한다.

8. 최종 단계

1. 획득 한 이미지를 검토합니다. 필요한 모든 이미지가 얻어진 것을 확인 하였다.
2. 마우스의 가슴에서 초과 초음파 젤을 제거하고 부드럽게 장소에서 동물을 고정하는 테이프를 제거합니다. 마취의 전원을 끕니다.
3. 흡수성 종이 타월에 동물을 배치(흡입 할 수 있습니다 또는 복구 중에기도를 차단할 수 없습니다 침구,). 흉골 드러 누움이 달성 될 때까지 동물을 관찰한다. 마취가 적절하게 관리되는 경우, 복구는 30 ~ 60 초 이내에 발생한다.

결과

통상적 동물 심장 초음파 영상으로부터 얻어진 이미지의 예는이 원고에 포함된다. 동물의 가슴에 트랜스 듀서의 배치를 보여 독자에게 변환기 바와 같은 이미지를 얻기 위해 배치되는 위치에 대한 명확한 이해를 제공하기 위해 제공된다. 초음파 실험실 셋업의 사진은 적당한 장치, 특히 사용되는 초음파 변환기 마취의 방법의 중요성을 강조하기 위해 포함된다. 2 차원 / B 모드, M 모드, 그리고 정상 및 비정상 밸브, 좌우 심실과 대동맥 근부의 색상과 도플러 표시가 제대로 표시되어 있습니다. 스트레인 속도 이미징 일상적으로 실행되지 않지만, 예를 들어도 포함된다.

승모판 막 폐쇄 부전증은 S 동안 밸브를 가로 질러 높은 보통 비 층류 혈류 속도 (모자이크 착색)을 특징으로ystole (그림 5). 심전도 추적의 QRS 컴플렉스 후에 발생 M...

토론

마취의 유도

적절한 유도 및 마취의 유지 보수는 쥐의 심장 판막의 변화의 정확한 평가와 심장 기능에 중요합니다. 이소 플루 란과 깊은 마취 다음이 마취의 비교적 긴 워시 아웃 시간에 의해 유도 마취의 급속한 유도 감안할 때, 우리는 유도를위한 독립형 마취 실을 사용하지 마십시오. 위의 세부 사항에서 언급 한 바와 같이 대신, 동물은 마취의 비교적 낮은 농도에서 마취의 신속하고 제어 유도을 허용 마취 콘에 직접 안내한다.

마우스의 대부분의 균주 충분히 미만 1.5 % 이소 플루 란으로 마취를 유지. 심장 기능에 이소 플루 란의 누적 효과는 밀접 그러나 모니터링해야하고, 마취제의 농도의 작은 감소는 시간에 요구 될 수있다. 역으로, 마취제의 농도 조금씩은 북동 수있다eded. 조심스럽게 (마취의 불충분 한 깊이의 암시) 및 증가 또는 HR 감소 움직임에 대한 동물을 모니터링; 이 마취의 깊이의 신속하고 ...

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
고해상도 초음파 기계	VisualSonics, Fujifilm	Vevo 2100
이소플루란 디퓨저(1 L/min 100% O2	VisualSonics, 소형	N/A
	MicroScan, VisualSonics, Fujifilm	MS 550D, MS 400
Animal platform	VisualSonics, Fujifilm	11503
고급 생리학적 모니터링 장치	VisualSonics, Fujifilm	N/A
Isoflurane	Terrell	NDC 66794-019-10
이소플루란 디퓨저 및 100% O2에 연결된 노즈 콘 및 튜빙	내 엔지니어링	-
헤어 면도기	Andis Super AGR+ 수의사 팩 클리퍼	AD65340
초음파 젤	Parker Laboratories	REF 01-08
전극 젤	Parker Laboratories	REF 15-25
접착 테이프	Fisher Laboratories	1590120B
종이 타월