이 프로토콜은 마우스의 심장 및 심장 판막 기능의 포괄적인 표현형을 위한 심초음파 접근 방식에 대한 자세한 설명을 제공합니다.
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이 논문에서
요약
초록
이 원고와 함께 제공되는 비디오의 목적은 설치류의 심장 판막 기능을 이미징하는 데 사용되는 방법과 접근 방식에 대한 개요를 제공하는 것이며, 적절한 마취 방법, 사용된 심초음파 창, 이미지 획득을 위한 이미징 평면 및 프로브 방향, 데이터 분석 방법, 심장 및 판막 기능 평가를 위한 새로운 기술의 한계에 대한 자세한 설명이 있습니다. 중요한 것은 전임상 동물 모델에서 판막 질환의 발병에 대한 통찰력을 얻기 위해 활용할 수 있는 심장 및 심장 판막 영상에 대한 몇 가지 미래 연구 분야를 강조한다는 것입니다. 우리는 생쥐의 심장 및 심장 판막 기능을 평가하기 위한 체계적인 접근 방식을 사용하면 보다 강력하고 재현 가능한 데이터를 얻을 수 있을 뿐만 아니라 유전적으로 변형된 및/또는 생리학적으로 스트레스를 받은 생쥐에서 이전에 과소평가된 표현형을 쉽게 발견할 수 있다고 제안합니다.
서론
노화는 심장 혈관 석회화 1 점진적 증가와 연관되어있다. 혈역학 적으로 유의 한 대동맥 판막 협착 (65) 2 세 이상 인구의 3 %에 영향을 미치는, 심지어 중간 대동맥 판막 협착 (3~4m / s의 피크 속도)을 가진 환자는 40 % 미만의 5 년 무 사건 생존율이 3. 현재,이 대동맥 판막의 석회화의 진행을 느리게 할 효과적인 치료법은 없으며, 수술 대동맥 판막 치환술 고급 대동맥 판막 협착증 4 사용할 수있는 유일한 치료입니다.
개시 및 대동맥 판막의 석회화의 진행에 기여하는 메커니즘의 깊은 이해를 확보하기위한 연구는 대동맥 판막 협착 (5), (6)을 관리하는 약물과 비 수술 방법으로 이동에서 중요한 첫 번째 단계입니다. 유전학적인LY-변경 마우스는 다양한 질병에 기여 이제 대동맥 판막 협착 6, 7, ....
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프로토콜
1. 재료 및 장비 (표 1 및 그림 1) 준비
- 초음파 기계를 켭니다. 동물 ID, 날짜 및 시간 (직렬 이미징 실험) 및 기타 관련 정보를 입력합니다.
- 고주파수 초음파 변환기 ~ 20g 또는 20g ~보다 생쥐는 30 메가 헤르츠 이하의 촬상 마우스 40 MHz의 사용.
- 심전도에 플랫폼을 연결합니다 (ECG)는 특정 양식에 대한 영상의 ECG 게이팅을 모니터링.
주 : 비판적 이것도 마취 적절한 깊이의 여러 지표 중 하나로서 사용될 수있다 심박수 (HR)의 순간 계산을 허용한다. - 37 ° C에 플랫폼을 사전 가열한다.
주 : 모든 시판 초음파 시스템은 B 모드, M 모드, 도플러 초음파 검사를위한 화상 취득 제어 및 학습 관리 제어를 제공하는 제어 패널이있다. 심장 심장 측정 공구가 자동 측정을위한 기기에 포함심장과 판막 기능의 일반적인 심 초음파 매개 변수 및 계산.
2. 마취의 이미징 및 유도를위한 마우스를 준비합니다
- 부드럽게 꼬리로 마우스를 선택하고 단단히 목의 목덜미에 동물을 개최합니다.
- 코 콘에 동물의 코를 안내합니다. 1 %의 이소 플루 란 마취 흐름을 시작합니다. 동물이 가스에 노....
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결과
통상적 동물 심장 초음파 영상으로부터 얻어진 이미지의 예는이 원고에 포함된다. 동물의 가슴에 트랜스 듀서의 배치를 보여 독자에게 변환기 바와 같은 이미지를 얻기 위해 배치되는 위치에 대한 명확한 이해를 제공하기 위해 제공된다. 초음파 실험실 셋업의 사진은 적당한 장치, 특히 사용되는 초음파 변환기 마취의 방법의 중요성을 강조하기 위해 포함된다. 2 차원 / B 모드, M 모드, 그리고 정상 및 비정상 밸브, 좌우 심실과 대동맥 근부의 색상과 도플러 표시가 제대로 표시되어 있습니다. 스트레인 속도 이미징 일상적으로 실행되지 않지만, 예를 들어도 포함된다.
승모판 막 폐쇄 부전증은 S 동안 밸브를 가로 질러 높은 보통 비 층류 혈류 속도 (모자이크 착색)을 특징으로ystole (그림 5). 심전도 추적의 QRS 컴플렉스 후에 발생 M.......
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토론
마취의 유도
적절한 유도 및 마취의 유지 보수는 쥐의 심장 판막의 변화의 정확한 평가와 심장 기능에 중요합니다. 이소 플루 란과 깊은 마취 다음이 마취의 비교적 긴 워시 아웃 시간에 의해 유도 마취의 급속한 유도 감안할 때, 우리는 유도를위한 독립형 마취 실을 사용하지 마십시오. 위의 세부 사항에서 언급 한 바와 같이 대신, 동물은 마취의 비교적 낮은 농도에서 마취의 신속하고 제어 유도을 허용 마취 콘에 직접 안내한다.
마우스의 대부분의 균주 충분히 미만 1.5 % 이소 플루 란으로 마취를 유지. 심장 기능에 이소 플루 란의 누적 효과는 밀접 그러나 모니터링해야하고, 마취제의 농도의 작은 감소는 시간에 요구 될 수있다. 역으로, 마취제의 농도 조금씩은 북동 수있다eded. 조심스럽게 (마취의 불충분 한 깊이의 암시) 및 증가 또는 HR 감소 움직임에 대한 동물을 모니터링; 이 마취의 깊이의 신속하고 .......
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공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다.
감사의 글
이 작업은 NIH 보조금 HL111121(JDM) 및 TR000954(JDM)의 지원을 받았습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 고해상도 초음파 기계 | VisualSonics, Fujifilm | Vevo 2100 | |
| 이소플루란 디퓨저(1 L/min 100% O2 | VisualSonics, 소형 | N/A | |
| MicroScan, VisualSonics, Fujifilm | MS 550D, MS 400 | ||
| Animal platform | VisualSonics, Fujifilm | 11503 | |
| 고급 생리학적 모니터링 장치 | VisualSonics, Fujifilm | N/A | |
| Isoflurane | Terrell | NDC 66794-019-10 | |
| 이소플루란 디퓨저 및 100% O2에 연결된 노즈 콘 및 튜빙 | 내 엔지니어링 | - | |
| 헤어 면도기 | Andis Super AGR+ 수의사 팩 클리퍼 | AD65340 | |
| 초음파 젤 | Parker Laboratories | REF 01-08 | |
| 전극 젤 | Parker Laboratories | REF 15-25 | |
| 접착 테이프 | Fisher Laboratories | 1590120B | |
| 종이 타월 |
참고문헌
- Ngo, D. T., et al. Determinants of occurrence of aortic sclerosis in an aging population. JACC Cardiovasc Imaging. 2, 919-927 (2009).
- Nkomo, V. T. Epidemiology and prevention of valvular heart diseases and infective endocarditis in Africa. ....
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재인쇄 및 허가
