이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.

방법 논문

비 금지 EEG Radiotelemetry : 경막 외 및 깊은 뇌내 정위 EEG 전극 위치

19.5K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/54216

⸱

2016년 6월 25일

이 논문에서

요약

비 구속 된 EEG radiotelemetry 자유롭게 이동 설치류에서 생체 장기 뇌파를 기록하기위한 유용한 방법 론적 접근이다. 상세한 프로토콜은 CNS의 리듬 성 CNS와 관련된 행동 단계 안정적인 기록을 얻기 위해 다양한 뇌 영역에 정위 경막 깊은 뇌내 전극 배치를 설명한다.

초록

이식 뇌파 radiotelemetry는 신경 및 신경 퇴행성 질환과 간질의 형질 전환 마우스 모델의 신경 학적 특성에 중앙 관련이있다. 이 강력한 기술은 기본적인 병태 생리 학적 메카니즘에 유용한 통찰을 제공 할뿐만 예., CNS 관련 질환의 병인, 또한 새로운 병진 즉. 치료 방법의 개발을 용이하게한다. 재킷이나 닿는 시스템에 사용되는 기록 시스템의 사용은 반 억제 캐릭터에 자신의 비 생리적 억제에서 고통을 경쟁 기술 반면, radiotelemetric 뇌파 기록은 이러한 단점을 극복. 기술적으로, 이식 뇌파 radiotelemetry 다양한 생리 학적 및 병태 생리 학적 조건 하에서 경막 외 깊은, 뇌내 뇌파의 정확하고 매우 민감한 측정 할 수 있습니다. 첫째, 우리는 곧장 앞으로의 상세한 프로토콜 성공적인 제시높은 품질의 electrocorticograms 결과 경막 외 (표면) 뇌파 기록에 대한 신속하고 효율적인 기술. 둘째, 우리는 해마 (electrohippocampogram)에서, 예를 들면 깊은, 뇌내 EEG 전극을 이식하는 방법을 보여줍니다. 두 방법 모두의 경우, 컴퓨터 화 된 3D 정위 전극 주입 시스템이 사용된다. 무선 주파수 송신기 자체는 마우스 및 래트 모두 피하 파우치에 주입된다. 특별한주의는 또한 실험 동물의 수술 주변과 수술 후 치료를 사전에 지불해야합니다. 마우스 및 래트 적합한 수술 마취 제제뿐만 아니라 수술 후 통증 치료 및 관리를 상세히 설명한다.

서론

Radiotelemetry 특히 EEG, ECG, EMG, 혈압, 몸체 중심부 온도 또는 활성 측정 1-7의 환경에서, 다양한 크기의 의식 무제한 동물의 행동 및 생리 다양한 파라미터를 측정하기위한 가장 중요한 방법 론적 접근이다. 이론적으로, 모든 화학 종은 고양이, 개, 돼지, 영장류 -3,8-로 마우스 및 래트와 같은 설치류에서 기관 이식의 radiotelemetry EEG를 사용하여 분석 될 수있다. 심지어 물고기, 파충류와 양서류는 radiotelemetric 조사 9 될 수 있습니다. 지난 20 년 동안 이식 뇌파 radiotelemetry는 이러한 간질, 수면 장애, 신경 퇴행성 질환 및 신경 정신 질환 7,10-12 인간 질병의 다양한 형질 전환 동물 모델의 특성에 가치있는 것으로 입증되었습니다. 과거에는 생쥐 biopotentials 쥐 포함한 생리 데이터를 수집하는 다양한 방법 론적 접근 DESC왔다ribed. 재킷 레코더 시스템, 물리적 억제 방법, 비 이식 radiotransmitters와 닿는 시스템에서 착용은 지난 13, 14의 주요 관심을 받았다. 요즘, radiotelemetric 주입을위한 다양한 시스템이 시판되고있다. 그러나, 문학 화면은 자체 제작 radiot....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

윤리 정책 : 모든 동물 실험은 지역 및 기관 동물 관리 협의회 (본 대학교, BfArM, LANUV, 독일)의 지침에 따라 수행 하였다. 또한, 모든 동물 실험은 우수한 입법 예에 따라 실시 하였다. 11 월 24 일 1986 년 (6백9분의 86 / EEC) 또는 개별 지역 또는 국가 법률의 유럽 공동체위원회 지침. 특별한 노력이 사용 동물 및 이들의 고통 수를 최소화한다.

1. 실험 동물

  1. 실험 동물 종의 선택
    1. 즉, 설치류에 radiotelemetric 연구를 수행합니다., 마우스 및 특정 인간의 질병 7,9,45,46 관련 동성, 동형과 예측의 요구 사항을 충족 쥐.
      참고 : 사용 가능한 기타 마우스와 쥐의 변종 기본 생리 및 병리 생리 학적 characterist에서 차이가 심각 할 수 있습니다ICS 47-49.
    2. 고려 또는 이전 이후의 전기 생리 예를 들어 실험, 마취, 수면 건축과 발작 감수성 50, 51의 적용 용량에 반응을 수행하기 마우스 / 쥐 균주의 생리 학적 및 병태 생리 학적 특성을 평가한다.
    3. 연구 설계의 성별 특정 특성을합니다. ....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

이 섹션은 표면과 깊은, 뇌내 뇌파 기록에서 얻은 예를 보여줍니다. 처음은 생리 학적 조건에서 기준 기록은 이전의 예를 들면 다음과 이후의 기록, 약물 치료에 필수적임을 명시해야합니다. 이러한 기준 기록은 다른 행동 상태 또는 절전 / 일주기의 리듬과 뇌의 리듬의 기능적 상호 의존에 대한 중요한 정보를 제공 할 수있다. 여기, 우리는 proconvul​​sive / psychoenergetic 약물의 급성 투여 기록 발작 활동의 예를 보여줍니다. 위에서 설명한 바와 같이, 뇌파 radiotelemetry에서 응용 프로그램의 일반적인 필드는 간질 연구이다. 간질 모델은 급성 및 만성 약리 모델뿐만 아니라 간질의 유전자 (유전자 변형) 모델을 포함한다. 여기에서 우리는 R / S-바클로 펜 20 ㎎ / ㎏과 bicucullinemet의 IP 관리에 의해 유도 된 비 경련성 부재와 같은 발작의 급성 모델을 보여10 ㎎ / ㎏에서 hobromi.......

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

이 실험 동물 행동 1,3들의 전체 레퍼토리를 수행 할 수 있도록 비 억제 기법으로 이식 EEG의 radiotelemetry 중앙 관련성이다. 원격 측정 방식은 자연 EEG 녹음되지만, T-미로, 방사형 미로, 물 미로, 수면 부족 작업 또는 때마다 뇌파 기록이 필요하거나 도움이 같은인지 적 작업과 주기성 분석 설정, 아래도 녹음뿐만 아니라 수 있습니다 이것은 주요 관심사이다 복잡한인지 또는 모터 활동 중.

이 프로토콜은 마우스 및 쥐와 이식 EEG의 무선 주파수 송신기에 연결에서 경막 외 표면과 깊은 뇌내 EEG 전극 이식에 대해 설명합니다. 절차에서 중요한 단계는 수술 전, 즉 문제, 종 및 변형, 주택 조건, 마취 및 통증 관리의 선택을 포함한다. 중요한 문헌 화면 후자 (CO)와 같은 교란 요소를 제공 할 수 있다고 밝혀ntribute 다양한 연구 방법의 결과를 발산합니다. 예를 들면, 실험 화학 종, 예를 들어 쥐에.......

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

저자는 공개할 것이 없습니다.

감사의 글

저자는 동물 사육 및 동물 건강 관리에 도움을 준 Christina Ginkel 박사(독일 신경퇴행성 질환 센터, DZNE), Michaela Möhring 박사(DZNE) 및 Robert Stark 박사(DZNE)에게 감사의 뜻을 전합니다. 이 연구는 독일 본에 소재한 연방의약품의료기기연구소(Bundesinstitut für Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM)의 재정 지원을 받았습니다.

....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Carprofen (Rimadyl VET - InjektionA2:D43slö PfizerPZN 011020820 ml
양안 수술용 확대 현미경 Zeiss Stemi 20000000001003877, 435540000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000
Bulldog serrefineF.S.T.18051-2828 mm
케이지 (Macrolon)Techniplast1264C, 1290D
콜드 라이트 소스Schott KL2500 LCD9.705  202Th.Geyer
코튼 팁 애플리케이터(멸균)Roth EH12.1
덱스판테놀 (Bepanthen Wund- und Heilsalbe)바이엘PZN: 1578818
드레이프 (멸균)HartmannPZN 0366787
70% 에탄올Carl Roth 9065.5
0.3%/3% 과산화수소 용액Sigma9532130% 재고 용액 
장갑 (멸균)Unigloves1570
치과 유리 아이오노머 시멘트KentDental / NORDENTA957 321
2 % 글루 타르 알데히드 용액SigmaG6257
Graefe 집게 곡선, 톱니 모양의F.S.T.11052-10
Halsey 마이크로 니들 홀더 - 텅스텐 카바이드FST12500-1212.5cm
열기반 수술 기구 살균기FS18000-50
가열 패드AEG HK5510520010myToolStore에서 주문 고속
치과 드릴AdeorSI-1708
아이리스 가위 초박형 F.S.T.14058-099 cm
흡입 마약 시스템(이소플루란)Harvard Apparatus GmbH34-1352, 10-1340, 34-0422, 34-1041, 34-0401, 34-1067, 72-3044, 34-0426, 34-0387, 34-0415, 69-0230
이소플루란백스터 250mlPZN 6497131
케타민화이자PZN 07506004
젖산 링거' S 용액 (멸균)BraunL7502
Lexar-Baby Scissors-straight, 10 cmF.S.T.14078-1010 cm
Nissl staining solutionArmin BaackBAA31712159
Non-absorbable 봉합사 재료 5-0/6-0 (sterile)SABANA (Sabafil)N-63123-45
Covidien (Sofsilk)S1172, S1173
Halsey 바늘 홀더F.S.T.12001-1313cm
패드 (sterile)ReWa Krankenhausbedarf2003/01
0.9% 식염수(NaCl, sterile)BraunPZN:8609255
손잡이가 있는 메스 블레이드(sterile)propraxis2029/10
Standard Pattern ForcepsF.S.T.11000-12, 11000-1412cm 및 14.5cm 길이
강철 및 텅스텐 전극 파릴렌 코팅 FHC Inc., 미국)UEWLGESEANND
입체 프레임Neurostar51730M은 Stoelting
(스테레오 드라이브-새로운 전동 입체)
테이프 (멸균)BSN medical GmbH & Co. KG626225
 DSI270-0042-001X무선 주파수 송신기 3.9 g, 
3.9 g, 1.9 ml, 입력 전압 범위 ± 2.5 mV,
채널 대역폭 (B) 1 - 200 Hz, 
공칭 샘플링 속도 (f) 1,000 Hz (f = 5B)
온도 작동 범위 34 - 41 > C
보증 배터리 수명 4개월
TL11M2-F20EET DSI270-0124-001X무선 주파수 송신기 
3.9 g, 1.9 ml, 입력 전압 범위 ± 1.25 mV,
채널 대역폭 (B) 1 - 50 Hz, 
공칭 샘플링 속도(f) 250Hz(f = 5B)
온도 작동 범위 34 - 41°C; C
보증 배터리 수명 1.5개월
조직 집게- 1x2 치아 12cmF.S.T.11021-1212cm 길이
텅스텐 카바이드 홍채 가위F.S.T.14558-1111.5cm
Vibroslicer 5000 MZ전자 현미경 과학5000-005
자일라진(Rompun)BayerPZN: 1320422
에서 주문Carl TA10ETA-F20

참고문헌

  1. Kramer, K., et al. The use of radiotelemetry in small laboratory animals: recent advances. Contemp Top Lab Anim Sci. 40, 8-16 (2001).
  2. Kramer, K., et al. The use of telemetry to record electrocardiogram and hea....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

태그

정위 고정 전극 배치경막외 EEG 기록뇌내 EEG 전극3D 정위 고정 시스템송신기 이식피하 포켓치과용 시멘트 고정경막외 참조 전극심부 뇌 전극