우리는 깨끗하고 정확한 물 샘플링을 위한 간단하고 비침습적이며 신뢰할 수 있는 방법인 VacuSIP를 소개합니다. 이 시스템은 미립자 및 용해된 화합물의 제거 및 배설을 깨끗하게 측정하기 위해 저서 현탁액 공급기가 현장에서 흡입 및 내쉬는 물을 동시에 수집하기 위해 개발 및 평가되었습니다.
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이 논문에서
요약
초록
저서 서스펜션 피더는 해양 생태계의 기능에 필수적인 역할을 합니다. 많은 양의 물을 여과하고, 플랑크톤과 찌꺼기를 제거하고, 미립자 및 용해된 화합물을 배설함으로써 저서-원양 결합을 위한 중요한 매개체 역할을 합니다. 현탁 피더(예: 스폰지, 아시디안, 다모류, 이매패류)에 의해 제거 및 배설되는 화합물을 정확하게 측정하는 것은 이들의 생리학, 신진대사 및 섭식 생태학에 매우 중요하며, 이러한 유기체에 의해 매개되는 영양 플럭스의 생태학적 관련성을 결정하는 데 필수적입니다. 그러나 현탁액 공급기가 자연에서 미립자 및 용존 화합물을 처리하는 속도의 평가는 현재 사용 가능한 방법론의 한계에 의해 제한됩니다. 우리의 목표는 저서 서스펜션 피더의 현류 조리개와 같은 특정 지점에서 깨끗하고 제어된 물 샘플링을 현장에서 수행할 수 있는 간단하고 신뢰할 수 있으며 방해가 되지 않는 방법을 개발하는 것이었습니다. 우리의 방법은 맞춤형 매니퓰레이터 장치에 설치되고 샘플링된 유기체의 호기 구멍 내부에 조심스럽게 배치된 미세한 튜브를 사용하여 연구된 유기체의 흡입 및 내쉬는 물을 동시에 샘플링할 수 있습니다. 각 튜브의 말단 끝에 부착된 주사기 바늘로 수집 용기의 격막을 뚫으면 외부 압력이 샘플링된 물을 샘플링 튜브를 통해 용기로 천천히 밀어 넣을 수 있습니다. 느리고 제어된 샘플링 속도를 통해 물에 내재된 고르지 못한 부분을 통합하는 동시에 오염 없는 샘플링을 보장할 수 있습니다. 당사는 다양한 미립자 및 용존 화합물의 분석을 위한 가장 적합한 여과 장치, 수집 용기 및 저장 절차에 대한 권장 사항을 제공합니다. VacuSIP 시스템은 자연 조건에서 방해받지 않는 현탁 피더 대사를 정량화할 수 있는 신뢰할 수 있는 방법을 제공하며, 저렴하고 배우기 쉽고 다양한 생태계에서 필터 피더의 생리학 및 기능적 역할을 평가하기 위해 적용할 수 있습니다.
서론
저서 서스펜션 피더는 해양 생태계 (1)의 기능에 중요한 역할을한다. 물 2,3 대량 필터링함으로써, 그들은 제거하고 미립자 (플랑크톤과 암설) 및 (내부 및 참조) 용해 화합물 (1)을 배설 및 저서 - 원양 커플 링 4,5 영양 순환 6,7의 중요한 에이전트입니다. 정확하게 미립자 및 용해 화합물을 제거하고 (예 : 스폰지, 해초 강, 다모류 및 이매패 류 등) 저서 서스펜션 피더에 의해 배설을 측정하는 그들의 생리, 대사, 및 공급 생태를 이해하는 것이 필수적입니다. 함께 속도 측정을 펌핑하여, 또한 이러한 유기체 수질뿐 아니라 생태계 규모 과정에서 자신의 생태 영향에 의해 매개되는 영양소 플럭스의 정량화 할 수있다.
제거 및 생산 입자의 속도와 용해 닷컴을 측정하는 적절한 방법을 선택서스펜션 필터 피더에 의해 파운드는 먹이 활동 (8)에 관한 신뢰할 수있는 데이터를 얻기 위해 매우 중요하다. Riisgård 등 부적절한 방법 바이어스 결과가 지적한 바와 같이, 실험 조건을 왜곡 섭취와 특정 물질의 배설의 잘못된 추정을 생산,이 미생물에 의해 처리 된 영양 플럭스의 잘못된 정량화 될 수 있습니다.
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프로토콜
1. 준비 단계 및 청소 절차
- 세척제
- 항상 보호 장비, 실험실 코트, 장갑을 착용 할 것. 먼지와 연기없는 깨끗한 공간에서 이러한 준비 단계를 수행합니다.
- 신선한, 높은 품질, 두 번 증류수로 5 ~ 10 % 염산 (HCL) 솔루션을 준비합니다.
- 5 %를 음이온 및 비 이온 계면 활성제 용액의 높은 가용성 기본 혼합 조제 신선한 고품질 이중 증류수 (자재 목록 참조).
- 청소의 모든 솔루션을 보관, 산 용기를 세척 하였다.
- 준비 단계 및 (실험실) 청소 절차
주 : 인 화합물 관심없는 경우, 염산 세척 고품질 인산 (H 3 PO 4) 세척 (8 % H 3 PO 4 최종 농도)에 의해 대체 될 수있다.- 항상 보호 장비, 실험실 코트, 장갑을 착용 할 것.
- 빨래고순도의 물 충분한 량 (인라인 스테인리스 Swinney 필터 홀더를 제외) 샘플링 장치. 밤새 5 ~ 10 % HCl 용액에 몸을 담근 장치를 둡니다. 고품질 증류수 충분한 양 장치를 다시 씻어.
- ....
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결과
해수 수집 방법의 최적화
컬렉터 튜브 및 청소 절차의 선택
VacuSIP 호환 수집 용기 샘플링 주사기 바늘 관통에 의해 개시 될 수있는 격벽을 가져야한다. 그들은 높은 수중 압력 (수심 작업 일반적인 스쿠버에서 2-3 바)를 견딜 수 있어야하며 진공을 유지해야한다. 대부분 (전부는 아니지만 브랜드) 휘발성 유기물의 분석을 위해 EPA의 승인을 유리 병의 이러한 기준을 충족. DOC와 DON 분석을 위해 승인 된 사전 청소 유리 병도 사용할 수 있습니다. 수집 및 분석 영양 및 청소 절차를 최적화하는 이러한 병의 적합성을 테스트하기 위해, 높은 품질의 증류수가 산 청소 폴리 .......
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토론
준비 단계
DOM 및 영양 분석을 위해 수집 튜브
수집 용기 용해 마이크로 성분과 상호 작용할 수 있고, 샘플러 벽 성장 30-34, DOM 영양 컬렉션 상이한 바이알 테스트 한 세균에 대한 기판 일 수 있기 때문이다. 샘플 신속 (30) 냉동하지 않는 경우 유리 병은 최대 두 배 실리카의 초기 농도를 증가시킬 수 있기 때문에 붕 규산염은 실리카 정량화 33, 35 사용하지 않는 것이 좋습니다. 우리의 결과는 미리 청소 EPA 유리 병을 사용하면 특히 암모늄을위한, DOC, DON, 무기 영양소에 대한 낮은 농도의 공백을 초래 것을 보여줍니다.
DOC 여과 및 저장
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공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다.
감사의 글
우리는 현장에서 자신의 도움을 MANEL 리바 감사합니다. 우리는 우리의 연구 및 샘플링 권한 그들의 지원을위한 "파크 천연 델 Montgrì, 레 레스 메디아 나는 엘 Baix 테르"에 감사하고 있습니다. 수중 매니퓰레이터는 Ayelet Dadon-Pilosof에 의해 설계된 씨 Pilosof에 의해 제작 하였다. 이 작품은 스페인 정부 프로젝트 CSI-산호 [RC 및 MR에 허가 번호 CGL2013-43106-R]에 의해 TM에 "Ministerio 드 EDUCACION, Cultura y를 Deporte (MECD)"에서 FPU의 교제에 의해 지원되었다. 이 G. 야헬에 카탈로니아 정부 [허가 번호 2014SGR1029]와 ISF 부여 13분의 1,280 및 BSF 보조금 2,012,089에 의해 자금 해양 생지 화학의 기여와 글로벌 변화 연구 그룹입니다.
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재료
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| GorillaPod, 오리지널 | Joby | GP000001 | 유연한 휴대용 삼각대 |
| 플랜지리스 페룰 | IDEX 건강 및 과학 | P-200X | 1/16" 블루/pk |
| 남성 너트 | IDEX 건강 & 과학 | P-205X | 1/16" 그린/10 PK |
| 여성에서 여성으로 Luer | IDEX 건강 & 과학 | P-658 | |
| 암-수 Luer | IDEX 건강 & 과학 | P-655 | |
| Peek 튜빙 (254 &마이크로; m ID) | IDEX 건강 및 과학 | 1531 | 1/16" 외경 x 0.01 ID x 5 피트 길이. 대체 ID를 사용할 수 있습니다. |
| 2액형 수지 에폭시 | IVEGOR | 9257 | 사용 전에 2액형 수지를 잘 혼합 |
| (TOC) EPA 바이알 | Cole -Parmer | 03756-20 | 40ml 유리 바이알. Thomas Scientific에서 제조했습니다(참조 번호 9711F09). |
| HDPE 바이알 | Wheaton | 986701 (E78620) | 20ml 고밀도 폴리에틸렌 바이알 |
| Vacuette Z 첨가제 없음 | Greiner bio-one | 455001 | 제조업체에 의한 사전 진공 |
| 셉텀 샘플 병 | 토마스 사이언티픽 | 1755C01 | 250 ml 유리병 |
| Septum Cap 1 | Wheaton | W240844SP (E7865R) | 22-400 |
| Septum Cap 2 | Wheaton | W240846 (1078-5553) | 24-400 유리병 및 병용. 또한 Thermo Scientific National에서 제조합니다(ref. 03-377-42). |
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| 링 TCLP 유리 필터 | Pall | 516-9126 | 바인더가 없는 유리 섬유 필터, 13 직경의 mm, 기공 크기 0.7 &마이크로; m |
| 폴리카보네이트 필터 홀더 | Cole -Parmer | 17295 | 13 mm 직경의 |
| Isopore 멤브레인 필터 | Millipore | GTTP01300 | 13 직경의 mm, 기공 크기 0.2 &마이크로; m |
| Contrad 70 솔루션 | Decon Labs | 1002 | 음이온 및 비이온 계면활성제 용액의 고용해성 기본 혼합물 |
| 멸균 주사기 필터 | VWR International Eurolab S.L. | 514-0061P | 25 직경의 mm, 기공 크기 0.2 &마이크로; m |
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| IcoGammaPlus | 5160 | 0.7 mm x 30 mm | |
| Cryovials Nalgene | Nalgene | V5007(Cat. No.5000-0020) | 2 ml |
| 크라이오박스 카톤 | 루비라보르 | M-600 | 145x145x55 mm p/마이크로튜브 1.5 ml |
| Orthophosphoric Acid | Sigma | 79617 또는 대안적으로 초순수 염산을 사용, 최종 콘서테이션 0.1% | |
| Paraformaldehyde | Sigma | P6148 | 500 g |
| 글루타알데히드 | Merck | 8,206,031,000 | 25%, 1 L |
| 핸드 진공 펌프 | Bü 알클 | 5620-2181 또는 표준 실험실 진공 펌프 |
참고문헌
- Gili, J. M., Coma, R. Benthic suspension feeders: their paramount role in littoral marine food webs. Trends. Ecol. Evol. 13 (8), 316-321 (1998).
- Reiswig, H. In situ pumping activities of tropical Demospongiae. Mar. Bio. 9, 38-50 (1971).
- McMurray,....
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