Method Article

공기 방울 조작 플랫폼에서 멀티 염기 다형성의 비주얼 색도계 감지

DOI:

10.3791/54424

⸱

September 27th, 2016

 ,  ,  ,  , 
1Department of Mechanical Engineering, National Taiwan University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 작품은 공기 방울 조작 플랫폼에서 다중 염기 다형성을 검출 할 수있는 간단하고 시각적 인 방법을 제시한다. 액적 조작 및 다 염기 다형성의 검출을 포함하는 제안 된 방법은 전체 실험을 통해 고급 장비의 도움없이 23 ° C 부근 수행 될 수있다.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

다 염기 다형성 (MNP)를 검출하는 간단하고 시각적있어서 열린면에 공기 방울 조작 플랫폼에서 행 하였다. 비색 DNA 검출이 접근 방식은 금 나노 입자 프로브 (AuNP 프로브)의 하이브리드 매개 성장을 기반으로했다. AuNP의 성장의 크기와 구성은, 프로브와 하이브리드 DNA 샘플의 수에 의해 지배된다. 나노 입자의 형상 및 크기 - 특정 의존의 광학 특성에 기초하여, 프로브에 샘플 DNA 절편의 미스 매칭 수를 판별 할 수있다. 시험은 각각 시약 및 샘플 DNA를 함유하는 물방울을 통해 수행하고,가요 성 PDMS 계 소수성 멤브레인의 제어 공기 흡입 반송 및 공압 플랫폼에서 혼합 하였다. 물방울은 어떤 측면 EFF와 높은 생체 적합성 인 제안 공압 플랫폼에 오픈 표면에 동시에 정확하게 전달 될 수있다액적 내부 DNA 샘플 요법. 두 방식들을 제안 결합 다중 염기 다형성 공기 방울 조작 플랫폼 시야에서 검출 될 수있다; 추가 장비가 필요하지 않습니다. 최종 결과에 플랫폼에 방울을 설치에서 절차는 기존의 방법보다 훨씬 적은보다 5 분 걸립니다. 또한,이 결합 MNP 검출 방식은 매크로 시스템에 비해 현저하게 작다 각 연산에 ​​10 μL의 샘플 용적이 필요하다.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

DNA 서열에서 단일 염기쌍 차이 인 단일 염기 다형성 (SNP)는 가장 흔한 유전 적 변이의 하나이다. 현재 연구의 SNP는 질병 위험, 약제의 효능 및 유전자 기능에 영향을주지하여 개인의 부작용과 연관되어 있음을보고한다. 1, 최근의 연구는 2 차원 또는 다중 점 돌연변이 (멀티 염기 다형성) 특정 질환 및 개별 원인 밝혀 질병의 효과의 차이. 3,4- 염기 다형성의 검출은 질환의 사전 선별 때문에 필수적이다. 서열 - 특이 적 올리고 뉴클레오티드의 신속한 검출을위한 간단하고 효율적인 방법은 매우 지난 20 년에 개발되었다. 등 프로브 고정화, 형광 라벨, 겔 전기 영동을 포함한 절차를 일반적으로 DNA 돌연변이를 식별 포함하는 1,5 현재 접근, 6,7 그러나 이러한 방법은 일반적으로 expen 긴 분석 과정을 필요로시브 장비, 잘 훈련 된 기술자, 샘플 및 시약의 중요한 소비.

체적 고유의 물리 화학적 성질에 대한 표면적의 비율이 큰 나노 입자와 특정 바이오 마커에 대한 고감도 저렴 검출 플랫폼으로서 적합한 물질이다. 금 나노 입자 (AuNP)는 널리 올리고 뉴클레오티드 프로브를 수정할 때문에 큰 능력의 DNA의 검출을 위해 사용된다. 8-10 SNP 검출 기술도 AuNP을 사용하여 개발 하였다. 11-13 본 연구에서 우리는을 검출하는 신규 한 측색 방법을 채용 다 염기 다형성 (MNP) AuNP 프로브 DNA 혼성화 - 매개 성장으로. (14)이 간단하고 빠른 프로빙 방법이 이론에 기초하는 접합 단일 가닥 DNA (ssDNA를) 또는 이중 가닥 DNA (dsDNA)의 가변 길이 AuNP의 성장의 크기 및 형상에 영향을 AuNP (도 1 참조). 15 DNA 검출이 방법을시약의 작은 소비, 작은 분석 기간 (몇 분), 임상 진단 및 국내 의료 검진에 대한 전향 적으로 적용 열 제어없이 간단한 절차를 제공합니다.

DNA의 감도, 검출 한계 및 특이성을 개선하기 위하여 실험 프로토콜을 대규모 장치의 적은 부분을 필요 전통적인 실험 프로토콜 진화 16 그러한 마이크로 유체 시스템 및 단순화 된 상기 DNA 서열을 검출하는 방법에는 여러 미세 유체 시스템은 개발되어왔다 바이오 센서. 마이크로 유체 시스템의 DNA 검출 방법은 여전히 이종 SNP를 식별하는 하나의 판독을 위해, 그러나, 신호 증폭 및 형광 판독기 같은 PCR (중합 효소 연쇄 반응)과 같은 후속 처리의 계기 장치를 필요로한다. (17, 18)를 간단한 개발 이후의 처리없이 플랫폼 직접 멀티 염기 다형성의 결과를 판독매우 바람직하다. 비교 잘 사용에, 종래의 미세 유체 시스템을 폐쇄, 미세 유체 장치가 유망 같은 명확한 광경, 샘플에 액세스 할 수있는 쉬운 방법, 직접 환경 접근성과 더 용이하게 형성 캐비테이션 또는 계면 방해의 여러 장점을 제공하는 오픈 표면 채널. 19 우리의 이전 작품은이있는,이 플랫폼, 방울 동시에 수송과 흡입력을 이용하여 구동 에너지로부터 간섭을받지 않고 조작 할 수 있습니다에 오픈 표면의 물방울 조작 (그림 2 참조). (20)에 대한 간단한 공압 플랫폼을 도입 생물 및 화학 분야에서 큰 잠재력. 이 공기 플랫폼 따라서 AuNP 프로브 DNA 혼성화 매개 성장의 개념을 사용하여 비색 방법과 조합 MNP 감지 DNA 샘플의 조작을 수행하는 데에 이용 하였다.

이 논문에 제시된 프로토콜 설명오픈 표면에 공기 방울 조작 플랫폼에서 다중 염기 다형성의 단순한 시각적 감지. 이 작품은 멀티 염기 다형성 (polymorphism)이 육안으로 감지 할 것을 확인; 제안 된 공기 플랫폼은 생물학적, 화학적 응용 프로그램에 적합합니다.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

MNP을 감지하는 방법으로서

참고 :이 섹션은 금 나노 입자의 하이브리드 매개 성장에 따라 MNP를 감지하는 절차를 설명합니다.

  1. 프로브 DNA 농도 100 μM에서 (5'-티올 GAGCTGGTGGCGTAGGCAAG-3 ') 솔루션을 준비합니다.
  2. 프로브 DNA 변성 AuNP (AuNP 프로브) 입자를 준비합니다. (21)
    참고 : 여기에 사용되는 볼륨이 프로브 DNA 변성 AuNP (AuNP 프로브) 입자의 요구 사항에 따라 달라집니다. 이 실험의 수를 실시 할에 따라서 달라집니다. 우리는 일반적으로 스페어로 초과 AuNP 프로브 입자를 준비합니다. 이 단계에 사용 된 볼륨 조절하고 유연하다.
    1. 농도 1 OD / ㎖에서 금 나노 입자 용액 (13 내지 17 ㎚)에 (100 μM, 단계 1.1에서 준비를) 프로브 DNA를 추가합니다.
    2. 도데 실 황산나트륨의 최종 농도를 가지고 NAC (12 H 25 SO 4, SDS) 및 인산염 완충액 (PBS) 0.01 % 및 0.01 M, respectivel 행와이.
    3. 20 분 후, 염화나트륨 (2 M)과 PBS (0.01 M) 0.01 % SDS로 유지하면서 용액에 0.05 M의 염화나트륨의 농도를 가지고, 20 분 동안 배양한다.
    4. 1 M 20 분 간격의 최종 농도 0.1 M의 단위 염화나트륨 농도를 증가시킨다.
    5. 23 ° C에서 와류 믹서에 진탕 밤새 품어. 진동 속도만큼 DNA 샘플과 AuNP 프로브 혼성 해짐에 따라 실험에 영향을주지 않습니다.
    6. 30 초 동안 7,000 XG에서 금 나노 입자를 원심 분리기와 뜨는을 제거합니다.
  3. 25 nM의 (AuNP 프로브 용액)의 농도에서 탈 이온수 (DI 수)로 AuNP 프로브 입자를 추가한다.
  4. 타겟 DNA 샘플을 준비한다 ( '3 개의 염기쌍 미스 매치 : 5'-CTTGCCTAC TTT ACCAGCTC-3'5'-CTTGCCTACGCCACCAGCTC -3- 완전히 상보 여섯 염기쌍 불일치를 : 5'-CTTGCCT TTTTTT CCAGCTC-3 ')의 농도로0.06, 0.11, 0.17, 각각 0.20, 0.30, 0.50 μM.
  5. 염화나트륨 (14 μM)와 DNA 샘플 (350 μL)에 AuNP 프로브 솔루션 (6 μL, 25 nm의)를 추가합니다.
  6. DNA 혼성화 5 분 동안 23 ℃에서 와동 혼합기 DNA 샘플과 AuNP 프로브 혼합물을 흔들어.
  7. AuNP 성장을위한 솔루션 (DNA 샘플과 AuNP 프로브의 혼합물)에 NH 2 OH (6 μL, 400 밀리미터) 및 HAuCl 4 (6 μL, 25.4 mm)를 추가합니다. AuNP의 성장은 종료 약 30 초 소요됩니다. 착색의 꾸준한 변화 이상의 1 시간을 유지합니다.
    주의 : HAuCl 4 피부에 접촉했을 때 심각한 독성 효과를 얻을 수 있습니다. 사용하기 전에 물질 안전 보건 자료 (MSDS)를 참조하십시오. 장갑을 착용하고 HAuCl 4 사용할 때 연기 찬장을 사용하십시오.

공기 방울 조작 플랫폼 2. 제작

참고 : P 다음 PDMS 기반 방울 조작 플랫폼은 두 개의 구성 요소를 포함수퍼 소수성 표면과 공기 채널 층 (5 ㎜)와 DMS 막 (100 μm의). 멤스 공정없이 일반적인 가공 공정의 제작이 미세 유체 성분의 조형하는 금형 PDMS 주조 및 복제하기 위해 컴퓨터 수치 제어 (CNC) 마이크로 포함 디바이스, 레이저 미세 가공을 제조하는데 사용 하였다 수퍼 소수성 표면 (도 3 참조).

  1. 마이크로 구조체와 PMMA 계 마스터 주형 (도 3 참조)를 생성하기 위해 드릴 비트 (0.5 mm)를 구비 한 CNC 기계를 사용한다. 드릴 비트 7mm / sec의 이송 속도와 회전을 26000 rpm의 속도를 사용한다. PMMA를 스크랩을 제거하고 상기 마스터 주형의 표면을 세정하기 위해 송풍기 및 DI 물을 사용한다.
  2. PDMS의 기반과 비 10 경화제의 혼합물을 준비한다 : 1. 모든 기포가 제거되고 30 분 동안 또는까지 건조기 내부의 혼합물을 탈기.
  3. 일에 PDMS를 부어즉 마스터 몰드와 공기 챔버의 역 마이크로 구조 (PDMS 막)와 공기 채널 (PDMS 층)을 얻기 위해 오븐에서 60 ℃에서 3 시간에 대한 PDMS 굽는다.
  4. (손으로) 마스터 금형에서 PDMS 층을 제거합니다. 공기 흡입 입구의 PDMS 층에 구멍을 펀치.
  5. 산소 플라즈마 처리 시스템의 챔버로 PDMS 막의 상기 PDMS 층 및 유리 기판을 넣어. 산소 플라즈마 처리 후, 10 분 동안 핫 플레이트 (90 ° C)에서 함께 PDMS 막의 상기 PDMS 층과 유리 기판을 접합.
  6. 레이저 절삭 기계 (PDMS 막면을 위로)에 복합 칩을 넣어. 초 소수성 영역 (15mm × 12mm)를 정의 할 .DWG 파일을 가져옵니다. 그림 3을 참조하십시오. 직접 PDMS 막 (전력 12 W, 스캔 속도 106.68 mm / 초)에 초 소수성 영역을 생성하기 위해 CO 2 - 레이저 기계와 PDMS 멤브레인을 새기다.
  7. 씻어 DI 물과 초 소수성 표면을 청소표면에서 떨어져 탄화 잔기.
  8. 솔레노이드 밸브를 통해 공기 흡입구 및 진공 펌프에 연결 (도 4 참조). 디지털 I / O의 USB 모듈과 컴퓨터와 제어 솔레노이드 밸브를 연결합니다.

공압식 플랫폼에 MNP의 검출 3. 운영

주 :이 부분은 공기 방울 조작 플랫폼 비색 및 급속 MNP를 식별하는 동작을 설명한다 (도 5 참조). 모든 단계가 23 ° C (주위 온도)에서 장소와 상대 습도 85 %를 가져 가라.

  1. 공기 방울 조작 플랫폼의 초 소수성 영역 (10 μL, 0.5 μM)을 대상 DNA 샘플 방울을 배치합니다.
  2. 공기 방울 조작 플랫폼의 초 소수성 영역의 AuNP 프로브 방울을 (10 μL, 25 nm의) 배치합니다.
  3. 솔레노이드 밸브 및 SI로 PDMS 막의 편향을 일으키는 공기 흡입을 제어mple 프로그램 (예를 들어, LabVIEW는). 물방울이 서로 충돌하여 유착되도록 PDMS 막에 (각각 표적 DNA와 프로브 AuNP 함유) 물방울의 이동 경로를 따라 각 공기 실의 공기 흡입을 제공한다. -80 kPa의 (게이지 압력)의 진공 펌프의 작동 압력을 사용합니다.
    1. 또한, 수동으로 한 방울 완전히 혼합으로 공기 흡입을 제어 할 수 있습니다. 손으로 연결하거나 시험의 초기 단계에서 튜브 진공 펌프 및 공기 챔버의 입구를 분리합니다.
  4. 솔레노이드 밸브의 제어 시스템을 사용하여 3 분 동안 혼합 효율을 향상시키기 위해 앞뒤로 합체 액적 롤의 공기 흡입을 제어한다. 타겟 DNA와 AuNP 프로브는 잘 혼합하여 3 분 이내에 혼성화된다. 각각의 구동 주파수 및 5 Hz에서 -80 kPa의 (게이지 압력)의 작동 압력을 사용한다.
  5. NH 2 OH (2 μL, 400 mM)을하고 HAuCl를 함유하는 액 적을 배치공기 방울 조작 플랫폼의 소수성 영역 4 (2 μL, 25.4 mm)이다.
  6. 방울이 서로 병합 충돌 있도록 공기 흡입구 (-80 kPa의 게이지 압력)을 제어한다. 이어서 전후로 합체 액적 롤 1 분간 혼합 효율을 향상시킬 수 있도록 상기 공기 흡입관 (5 Hz에서 -80 kPa의 게이지 압력)을 제어한다.
  7. 측정 및 육안 합체 방울의 색을 기록한다.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

본 연구에서는 세 개의 DNA 샘플을 AuNP 프로브의 DNA 혼성화 매개 성장을 통해 검출하는 간단하고 신규 한 방법을 사용하여 시험 하였다. 프로브 DNA와 삼가지 DNA 샘플의 순서는, 특히, cDNA를 프로토콜의 1 단계에 나와있는, TMDNA (세 염기쌍 일치하지 않는 DNA) 및 SixMDNA (여섯 기본 쌍 일치하지 않는 DNA)을 (완전히 보완 DNA를 조사하기 위해). 여기서 테스트 DNA 샘플을 프로브에 불일치가 DNA 샘플의 중간 세그먼트 모두이다.도 6은 다양한 농도의 DNA 시료에 대한 성장 AuNP 용액의 색을 나타낸다. 완벽하게 일치하는 DNA (CDNA)의 경우, 솔루션의 색상은 DNA 농도 증가와 함께 투명 한 후 인디고에 분홍색에서 다양합니다. TMDNA 들어, 용액의 색이 진한 보라색 핑크로 진행하고 인디고 및 SixMDNA 들면 색 DNA 농도가 증가함에 따라 짙은 분홍색으...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 프로토콜에서는 간단한 비색 방법은 MNP는 0.11-0.50 μM에서의 microcentrifuge 튜브 범위의 농도에서 구현 될 수 감지. 또한, 제안 된 MNP 검출 방법은 DNA 스크리닝 및 기타 생물 의학 응용에 대한 높은 가능성을 가지고 공기 방울 조작 플랫폼에서 수행된다. 실제로, 샘플 DNA 농도의 검출 범위는 운영 플랫폼의 혼합 효율에 의존한다. 합체 물방울이 완전히 혼합되도록하려면,이 프로토콜의 중요한 단계는 합체 방울의 크기에 따라 공기 흡입 (압력 및 주파수)의 컨트롤입니다. 완전히 상보적인 DNA 샘플과 일치 샘플 DNA 간의 혼성화 친화력의 차이가 긴 DNA 서열 단편에 대해 육안으로 구별하는 것은 곤란하다. 이러한 검출 기술의 한계 때문에, 샘플 DNA 단편의 길이이다. 긴 DN과 샘플시퀀스 크기 또는 성장 AuNP의 형태는 다양 불일치를 포함하는 다양한 DNA 샘플의 것과 유사하다. 프로브에 DNA 샘플의 불일치는이 프로토콜의 중간 부분에 나타납니다. 동일한 길이와 샘플 DNA의 homomeric...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

저자는 경쟁하는 금전적 이해관계가 없음을 선언합니다.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

대만 과학기술부는 MOST-103-2221-E-002 -097 -MY3 계약에 따라 이 연구에 대한 재정적 지원을 제공했습니다.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
PDMS다우 코닝SYLGARD 184
벤치탑 조각사Roland DGEGX-400
레이저 절단기Universal Laser Systems, Inc.VLS 3.50
산소 플라즈마 처리 시스템펨토 사이언스 주식회사 한국CUTE-MPR
솔레노이드 밸브가정용
진공 펌프ULVAC KIKO, Inc.DA-30D
13-nm AuNP 솔루션TAN Bead Inc., 대만NG-13
DNA (5'-말단 라벨링 티올 포함)MDBio, Inc., 대만
인산염 완충 식염수(PBS)UniRegion  생명 공학,. 대만PBS001-1L
나트륨 도데 실 설페이트 (SDS)JT 베이커4095-04
하이드 록실 아민 용액 (NH 2 < / sub >OH)시그마 -알드리치467804
클로로 오우산 (HAuCl 4< / sub >)시그마 -알드리치G4022
염화나트륨 (NaCl)
와류 믹서Digisystem 실험실 기기 Inc.VM-2000
원심분리기Hermle Labortechnik GmbH.Z 216 MK

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chorley, B. N., et al. Discovery and verification of functional single nucleotide polymorphisms in regulatory genomic regions: current and developing technologies. Mutat. Res. Rev. Mutat. 659 (1), 147-157 (2008).
  2. Hinds, D. A., et al. Whole-genome patterns of common DNA variation in three human populations. Science. 307 (5712), 1072-1079 (2005).
  3. Rosenfeld, J. A., Malhotra, A. K., Lencz, T. Novel multi-nucleotide polymorphisms in the human genome characterized by whole genome and exome sequencing. Nucleic Acids Res. , 408(2010).
  4. Whelan, S., Goldman, N. Estimating the frequency of events that cause multiple-nucleotide changes. Genetics. 167 (4), 2027-2043 (2004).
  5. Saiki, R. K., Walsh, P. S., Levenson, C. H., Erlich, H. A. Genetic analysis of amplified DNA with immobilized sequence-specific oligonucleotide probes. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 86 (16), 6230-6234 (1989).
  6. Kim, S., Misra, A. SNP genotyping: technologies and biomedical applications. Annu. Rev. Biomed. Eng. 9, 289-320 (2007).
  7. Kwok, P. Y., Chen, X. Detection of single nucleotide polymorphisms. Curr. Issues Mol. Biol. 5, 43-60 (2003).
  8. Elghanian, R., Storhoff, J. J., Mucic, R. C., Letsinger, R. L., Mirkin, C. A. Selective colorimetric detection of polynucleotides based on the distance-dependent optical properties of gold nanoparticles. Science. 277 (5329), 1078-1081 (1997).
  9. Lee, J. S., Han, M. S., Mirkin, C. A. Colorimetric Detection of Mercuric Ion (Hg2+) in Aqueous Media using DNA-Functionalized Gold Nanoparticles. Angew. Chem. 119 (22), 4171-4174 (2007).
  10. Storhoff, J. J., et al. Gold nanoparticle-based detection of genomic DNA targets on microarrays using a novel optical detection system. Biosens. Bioelectron. 19 (8), 875-883 (2004).
  11. Bao, Y. P., et al. SNP identification in unamplified human genomic DNA with gold nanoparticle probes. Nucleic Acids Res. 33 (2), 15-15 (2005).
  12. Chen, Y. T., Hsu, C. L., Hou, S. Y. Detection of single-nucleotide polymorphisms using gold nanoparticles and single-strand-specific nucleases. Anal. Biochem. 375 (2), 299-305 (2008).
  13. Li, H., Rothberg, L. Colorimetric detection of DNA sequences based on electrostatic interactions with unmodified gold nanoparticles. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101 (39), 14036-14039 (2004).
  14. Fang, W. F., Chen, W. J., Yang, J. T. Colorimetric determination of DNA concentration and mismatches using hybridization-mediated growth of gold nanoparticle probes. Sensor. Actuat. B Chem. 192, 77-82 (2014).
  15. Wang, Z., Zhang, J., Ekman, J. M., Kenis, P. J., Lu, Y. DNA-mediated control of metal nanoparticle shape: one-pot synthesis and cellular uptake of highly stable and functional gold nanoflowers. Nano Lett. 10 (5), 1886-1891 (2010).
  16. Chen, L., Manz, A., Day, P. J. Total nucleic acid analysis integrated on microfluidic devices. Lab Chip. 7 (11), 1413-1423 (2007).
  17. Lien, K. Y., Liu, C. J., Lin, Y. C., Kuo, P. L., Lee, G. B. Extraction of genomic DNA and detection of single nucleotide polymorphism genotyping utilizing an integrated magnetic bead-based microfluidic platform. Microfluid. Nanofluid. 6 (4), 539-555 (2009).
  18. Ng, J. K. K., Feng, H. H., Liu, W. T. Rapid discrimination of single-nucleotide mismatches using a microfluidic device with monolayered beads. Anal. Chim. Acta. 582 (2), 295-303 (2007).
  19. Xing, S., Harake, R. S., Pan, T. Droplet-driven transports on superhydrophobic-patterned surface microfluidics. Lab Chip. 11 (21), 3642-3648 (2011).
  20. Huang, C. J., Fang, W. F., Ke, M. S., Chou, H. Y. E., Yang, J. T. A biocompatible open-surface droplet manipulation platform for detection of multi-nucleotide polymorphism. Lab Chip. 14 (12), 2057-2062 (2014).
  21. Mirkin, C. A., Letsinger, R. L., Mucic, R. C., Storhoff, J. J. A DNA-based method for rationally assembling nanoparticles into macroscopic materials. Nature. 382 (6592), 607-609 (1996).
  22. Ichimura, K., Oh, S. K., Nakagawa, M. Light-driven motion of liquids on a photo-responsive surface. Science. 288 (5471), 1624-1626 (2000).
  23. Jones, T. B., Gunji, M., Washizu, M., Feldman, M. J. Dielectrophoretic liquid actuation and nanodroplet formation. J. Appl. Phys. 89 (2), 1441-1448 (2001).
  24. Lee, J., Kim, C. J. C. Surface-tension-driven microactuation based on continuous electrowetting. J. Microelectromech. S. 9 (2), 171-180 (2000).
  25. Daniel, S., Chaudhury, M. K., De Gennes, P. G. Vibration-actuated drop motion on surfaces for batch microfluidic processes. Langmuir. 21 (9), 4240-4248 (2005).
  26. Darhuber, A. A., Valentino, J. P., Davis, J. M., Troian, S. M., Wagner, S. Microfluidic actuation by modulation of surface stresses. Appl. Phys. Lett. 82 (4), 657-659 (2003).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Multi nucleotide Polymorphism DetectionPneumatic Droplet ManipulationGold Nanoparticle ProbesColorimetric DNA DetectionDNA Hybridization GrowthPDMS based PlatformOpen Surface DropletsNaked Eye DetectionMicroliter Sample VolumeGenetic Mutation Screening

Related Articles