Method Article

이 필드 조건에서 종자 발아, 휴면 및 사망률을 평가하기위한 신뢰할 수있는 방법

DOI:

10.3791/54663

⸱

November 6th, 2016

 ,  ,  , 
1Department of Horticulture and Crop Science, Ohio State University, 2Department of Ecology and Evolutionary Biology, University of Kansas, 3Department of Biology, Washburn University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

여기에서 우리는 장사 표시 씨 스트립 및 테트라 졸륨 클로라이드 (TZ) 생존 능력 테스트를 사용하여 필드 조건에서 종자 생존, 발아 및 휴면을 평가하기위한 프로토콜을 제시한다.

Abstract

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우리는 Helianthus annuus를 예시 연구 종으로 사용하여 시간 경과에 따른 종자 은행 역학을 근사화하는 기술을 설명합니다. 투과성 폴리에스터 직물과 접착제 스트립을 접고 접착하여 씨앗과 식별 정보를 수용하는 구획 스트립을 구성하는 동시에 토양 침출수, 물, 미생물 및 주변 온도와 접촉할 수 있습니다. 스트립은 다양한 구획 수와 크기로 구성될 수 있으며 연구자는 단일 종, 다른 종 또는 다른 처리를 경험한 종자 내에서 다양한 유전자형을 수용할 수 있습니다. 개별 종자 패킷과 달리 스트립은 하나의 단위로 더 쉽게 검색할 수 있습니다. 복제 패킷이 스트립 내에 포함될 수 있지만, 다른 스트립이 블록으로 작동하거나 시간 경과에 따른 시드 동작을 관찰하기 위해 다른 시간에 검색할 수 있습니다. 우리는 고온 글루건을 사용하여 구획을 묘사하고 블록 및 제거 시간을 식별하는 시드와 태그를 삽입한 후 스트립을 밀봉했습니다. 그런 다음 종자 스트립을 원하는 깊이의 들판에 묻고 나중에 제거할 위치를 표시했습니다. 굴을 파는 동물 포식자는 토양 표면에 금속 메쉬 하드웨어 천을 덮어 효과적으로 배제했습니다. 매장을 위해 선택된 시간 간격이 지난 후, 스트립을 파내고 씨앗의 발아, 휴면 및 폐사율을 평가했습니다. 분명히 죽은 씨앗은 종종 눈으로 발아되지 않은 살아있는 씨앗과 구별 할 수 있지만, 휴면 씨앗은 종자 생존력에 대한 표준 테트라 졸륨 클로라이드 비색 테스트를 사용하여 결정적으로 확인되었습니다.

Introduction

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이 방법의 전체 목표는 안정적으로 현장 조건 하에서 시간이 지남에 따라 시드 생존율을 평가하는 것이다.

토양 종자 은행은 일시적으로 또는 몇 년 1,2 지속 수도 있고 토양 표면에, 표면 쓰레기 내에서, 또는 토양 프로필 내에서 분산 분산, 가능한 아직 발아 씨앗의 예약입니다. 여기에 제시된 것과 유사한 씨의 매장 방법은 수십 종을 사용하여 17 년간의 연구에 적용되었을 때, 가능한 씨앗 3 시험 종의 다양한에서 발견되었다. 종자 휴면 생존을 모종의 조건의 적절한 조합 4 발생할 때까지 발아 종자하는 블록이다. 휴면 출시에 대한 외부 트리거가 발아 수 있습니다 때까지 대기 남은 씨앗이 낮은 겨울 온도, 양분 제한, 또는 계절 가뭄 등의 가혹한 조건을 살아남을 허용 할 수 있습니다. 휴면 출시에 대한 트리거는 f를 왼쪽으로 확장 감기, 화합물에 노출 다를 수 있습니다분노, 또는 동물 위산 5 마모 또는 연락처를 통해 종피의 물리적 공격. 발아 큐는 장군 또는 특정 종 수 종종 과거의 자연 선택의 결과 바와 같이, 부적응 종자 발아는 부적절한 시간에 발생하고, 씨앗이나 모종 사망 또는 불량 묘목의 성장을 초래할 수있는 것입니다. 휴면이 휴면 해제 (예를 들어....

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Protocol

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1. 여러 종 (種) 또는 단일 종의 제어 십자가에서 종자를 수집

참고 : 산모 (시드 일으키기) 부모 야생, 하이브리드, 작물 유형을 사용하여 종 Helianthus의 annuus (해바라기)에서 15 크로스 타입에서이 예를 사용 씨앗을.

  1. 성장시기의 끝에, 라벨 가방 성숙한 씨앗 머리를 수집합니다. 표준 형식 (즉, 산모 X의 아버지)에서 부모의 십자가 형으로 표시 봉투에 왕겨와 장소 씨앗에서 청소 씨.
  2. 동일한 부모의 크로스 유형의 같은 수의 씨앗 같은 양을 사용하여 큰 봉투에 함께 벌크 씨. 예를 들어, 같은 어머니와 아버지의 부모와 함께 10 크로스 타입 100 씨앗. 식별 (크로스 타입) 정보 봉투 레이블. 이 대형 봉투 2 장에 매장 스트립 작성에 사용 시드 주인입니다.
모자 부모
아버지의 부모 야생 : WxW F 1 : WX....

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Results

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다양한 어머니의 혈통과 작물 대립 유전자 비율 (표 1)와 크로스 유형 %가, 발아 발아에서 제거 날짜에 걸쳐 차이, 죽은 씨앗 (그림. 2, 3). 세 번째 제거 (봄)에 의해 발아 모든 씨앗이 진정으로 휴면 것으로 밝혀졌다 동안 발아 씨앗 TZ 테스트를 사용하여, 우리는 두 번째 제거 (이른 봄) (표 2)에서 일부 진정으로 휴면 씨앗을 발견했다.

일반적으로, 낮은 작물 대립 유전자의 비율은 늦은 (그림. 2)에 부적응 발아를 감소시켰다. 이른 봄 제거에서 모든 크로스 유형의 높은 발아을했지만, 그 비율 죽은 발아 (그림. 3)에서 달랐다. 산모 .......

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Discussion

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여기에서 우리는 현장에서 미리 선택된 기간에 종자 발아, 휴면 및 다양한 종자 주식의 사망률을 관찰 시드 매장 스트립을 사용하는 방법을 제시한다. 각각의 패킷은 개별 패킷의 생성을 통해 스트립 실 구조 (1)의 속도에 놓여보다는 스트립을 사용하는 장점; 및 (2)를 용이하게하고, 패킷을 생략 또는 실수를 제거하는 위험이없이 하나의 동작으로 복수의 구획을 제거하는 속도. 토양이 어려운 현장 조건이 차가운 경우 여기에 제시된 예에서 제거 날짜 두 겨울 개월 동안 있었다,이 방법은 노동과 인적 오류의 가능성을 모두 줄일 수 있습니다. 시드 스트립은 연구자 분야에서 인간의 실수에 의해 변경 될 수없는 방식으로 실험실에서 구획되지 위치를 랜덤하게함으로써 실험 물류를 돕기. 제거 시간의 선택을 통해 그 우리가 있었던 예측 자연 발아 시간의 폭을 포위종자 은행에 대한 추론을 할 역학 - 우리의 예 잠재력을 하이브리드 종자는 종자 은행의 지속과 미래 인구에 공헌 할 수. 이 방법의 하나의 제한은 구획 사이 시드 일부 마이그레이션 씨앗의 크기.......

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Disclosures

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저자는 공개할 것이 없습니다.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 작업은 미국 농무부 산하 국립식량농업연구소(National Institute of Food and Agriculture)의 A. Snow, K. Mercer, H. Alexander에게 Biotech Risk Assessment Grant Program 경쟁 대상 번호 2006-39454-17438의 지원을 받았습니다. 이 방법을 사용한 실험은 캔자스 생물 조사국(Kansas Biological Survey)과 캔자스 대학(University of Kansas)의 연구 단위인 캔자스 대학교 필드 스테이션(University of Kansas Field Station)에서 수행되었으며 이에 의해 지원되었습니다. 저자는 이 원고의 이전 버전에 대한 유용한 검토를 해준 P. Jourdan과 E. Regnier에게 감사를 표합니다. 또한 이 작업은 University of Kansas Field Station, Ohio State University(OSU)의 Waterman Farm, OSU의 USDA 관상용 식물 생식질 센터, OSU 원예 및 작물 과학과의 종자 생물학 실험실, 특히 E. Renze, S. Stieve, A. Evans, 기술 지원을 위한 E. Grassbaugh.

....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
작은 동전 봉투모든
큰 동전 봉투모든
미세한 그물 폴리 에스테르 모기장 모든
고온 접착제 총모든
고온 접착제 스틱 리필모든
산업용 영구 마커
플라스틱 정원 라벨모든
가위모든
삽모든
금속 메쉬 단단한 천모든
측량사의 깃발, 여러 색상모든
젖은 신문모든
쿨러모든
블로터 페이퍼모든
페트리 접시모든
온도, 제어 된 성장 챔버모든
면도날
페트리 접시
모든 테트라 졸륨 클로라이드
물모든
열 인큐베이터Any
, , , , 모든 , , 모든 ,

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Walck, J. L., Baskin, J. M., Baskin, C. C., Hidayati, S. N. Defining transient and persistent seed banks in species with pronounced seasonal dormancy and germination patterns. Seed Sci Res. 15 (3), 189-196 (2005).
  2. Alexander, H. A., Schrag, A. M.

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Tags

Seed GerminationSeed DormancySeed MortalityField ConditionsTetrazolium ChlorideSeed ViabilitySeed Bank DynamicsHelianthus AnnuusSeed Strip MethodBurial Trials

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