인간 내피 기능의 비 침습적 평가는 유동 매개 팽창 기술에 의해 결정될 수있다. 연구 수천이 기술을 사용하고 있지만, 어떤 연구는 쥐에서 비 침습적이 기술을 수행하지 않았다. 다음 문서에서는 상완의 흐름 중재 팽창과 쥐의 표면 대퇴 동맥의 비 침습적 측정을 설명합니다.
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이 논문에서
요약
초록
벽 전단 속도의 증가에 대한 동맥 혈관 확장은 혈관 내피 기능을 나타냅니다. 인간의 경우, 내피 기능의 비침습적 측정은 일반적으로 상완 또는 표재성 대퇴 동맥에서 수행되는 흐름 매개 확장 기술을 사용하여 달성할 수 있습니다. 간단히 말해서, 초음파 프로브의 원위부에 위치한 혈압 커프가 수축기 이상의 압력으로 팽창되어 사지 허혈을 초래합니다. 5분 가림이 수축되면 커프가 수축되어 반응성 충혈이 발생하고 벽 전단 속도가 증가하여 혈관 확장 분자가 내피에서 방출되어 혈관 확장을 유도하도록 신호를 보냅니다. 인간에서 흐름 매개 팽창을 수행한 수천 건의 연구에도 불구하고 놀랍게도 살아있는 쥐에서 이 기술을 비침습적으로 수행한 연구는 없습니다. 최근 중개 연구로의 초점이 옮겨진 것을 고려할 때, 쥐와 다른 설치류의 흐름 매개 확장에 대한 비침습적 측정을 위한 지침을 수립하는 것은 매우 중요할 것입니다. 다음 기사에서는 쥐의 상완 및 표재성 대퇴 동맥에서 흐름 매개 확장의 비침습적 측정을 위한 프로토콜이 제시되는데, 이는 이러한 부위가 인간에서 가장 일반적으로 측정되기 때문입니다.
서론
혈관 내피 세포는 선 동맥의 내강을 휴대 단층과 혈관 기능의 중요한 레귤레이터이다. 혈관 직경의 조절 될 내피로부터 방출 수많은 분자가있다. 이러한 분자 중 질소 산화물 (NO), 자극에 반응하여 혈관 내피 세포로부터 방출 주 혈관 확장 분자 것으로 보인다 (예를 들어, 전단 응력 인슐린, 아세틸 또는 변경) 1. 혈관 내피 세포에서 NO는 NO 합성 효소 (eNOS의)를 내피없는 효소에 의해 생성되며, 이후 내피 세포 (2)로부터 방출된다. NO는 휴식과 증가 된 혈관 직경 3의 원인이되는 혈관 평활근에 확산하지 않습니다.
내피 기능 장애는 유동 매개 팽창 (FMD) 기술을 사용하여 인간 4,5- 비 침습적으로 평가할 수있다. FMD가 기능적 생물학적 검정 나타내는 것이 제안되었다 내피 - 유래인간 NO 생체 이용률이, 그리고 일반적으로 ~ 5 분 사지의 폐색 (6) 다음 반응 충혈에 대한 응답으로 상완 또는 표면 대퇴 동맥에서 평가되지 않습니다. 반응성 충혈는 NO (8)의 방출 신호, 내피 세포 (7)에 형질 도입하는 층류 전단력을 증가시킨다. 최근, NO 릴리스 개시 혈관 확장....
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프로토콜
모든 동물의 절차는 실험 동물 (14)의 관리 및 사용에 대한 가이드를 본와 유타 대학과 솔트 레이크 시티 재향 군인 의료 센터 동물 관리 및 사용에 의해 승인되었다.
1. 동물 준비
- 100 % 산소 3 %의 이소 플루 란을 포함 마취 유도 챔버에서 동물을 놓습니다. 그것은 외부 자극에 응답하지 않는 때까지 유도 챔버에서 동물을 둡니다.
- 유도 챔버에서 동물을 제거하고 심전도 (ECG) 전극이 장착 된 가열 시험 테이블에 놓습니다. 100 % 산소 3 % 이소 플루 란 마취를 유지한다. 상완 표재성 대퇴 동맥 FMD 동시에 수행 될 수 없다. 따라서, 각 측정을위한 준비 지침은 다음과 같습니다.
2. 상완 동맥 준비
- 동물 부정사의 위치를 왼쪽 상지와 각각의 하체를 억제수술 테이프로 시험 테이블에 imal.
- 상지의 하부 약간 플랫폼 상기 (~ 0.2-0.5 cm의)을 상승되도록 상기 동물의 우측 상지 억제.
- 머리를 제거하기 위해 동물의 우측 상지에 제모 제 (예 : 나이 르)을 적용합니다.
- 팔꿈치에 오른쪽 상단 사지 말단에 폐색 커프 (직경 표준 혈....
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결과
흐름 매개 팽창 8의 Wistar 래트의 상완 피상적 대퇴 동맥에서 수행 하였다. 래트의 위치는도 1에 도시된다.
피상적 인 대퇴 동맥의 대표 초음파 영상은 그림 2에 표시됩니다.
도 1 쥐 초음파 측위.
상완 (A)의 측정 및 표면 대퇴 (B) 동맥 FMD에 대한 쥐의 위치. 초음파 프로브와 상완 (C)의 측정 및 표면 대퇴 (D) 동맥 FMD에 대한 폐쇄 커프의 위치.
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토론
본 연구에서는 FMD의 비 침습 측정은 상완과 쥐의 표면 대퇴 동맥에서 입증되었다. 5 분 폐색 기간 다음 인간 (6)와 마찬가지로, 혈액의 속도 (즉, 반응성 충혈)하여 동맥의 연속적인 혈관 확장의 결과 동맥 벽 전단 속도의 증가가 급격히 증가 하였다. FMD는 상완 피상적 대퇴 동맥 모두에서 관찰되었다. 또한, 동맥 사이의 FMD에 강한 관계가 있었다. 최대 전단 속도는 표면 대퇴 동맥에 이상 이었지만, FMD는 전단 속도가 혈관 사이에 강한 관계를 유지 피크 정규화. 함께,이 결과는 FMD의 비 침습성 측정을 성공적으로 래트에서 수행 될 수 있음을 나타낸다.
FMD의 측정은 두 개의 서로 다른 혈관에서 수행되었지만 기준선으로부터의 변화 퍼센트로 표현 될 때, FMD의 크기는 유사 하였다. Howeve베이스 라인에서 절대 변화로 표현 때 동맥이 피상적 인 대퇴 동맥보다 ~ 25 % 더 큰 휴식의 직경이 같은 R, FMD는 상완 동맥에서 높았다. 이러한 .......
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감사의 글
모든 동물 이미징은 유타 대학교의 소동물 이미징 핵심 시설에서 수행되었습니다.
이 연구는 미국 국립보건원(National Institutes of Health)의 보조금(R21 AG043952, R01 AG040297, K01 AG046326, K02 AG045339 및 R01 DK100505)의 보조금으로 부분적으로 자금을 지원받았습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Vevo 2100 고해상도 마이크로 초음파 이미징 시스템 | VisualSonics, 토론토, 온타리오, CAN | ||
| MicroScan 초고주파 선형 어레이 트랜스듀서 - MS-700 30-70 MHz | VisualSonics, 토론토, 온타리오, CAN | ||
| Vevo 이미징 스테이션 | VisualSonics, 토론토, 온타리오, CAN | ||
| 써마소닉 젤 워머 | Parker Laboratories, Fairfield, NJ, USA | 82-03 | 옵션 |
| Signacreme 전극 크림 | Parker Laboratories, Fairfield, NJ, USA | 17-05 | |
| Transpore 수술 테이프 | 3M, Maplewood, MN, USA | 1527-1 | |
| 탈모 크림 (e.g., Nair) | 일반 공급 | ||
| 면봉 | 일반 공급 | ||
| 표준 혈관 폐색기, 10 mm 루멘 직경 | 하버드 장치, Holliston, MA, USA | 62-0115 | |
| 10 ml 주사기와 Luer-Lok 팁 | 일반 공급 | 폐색 커프 장치에 사용 | |
| 종이 클립 | 일반 공급 | 폐색 커프 장치에 사용 | |
| 피하 바늘 – 18 게이지 | 일반 공급 | 폐색 커프 장치에 사용 | |
| 중간 바인더 클립 | 일반 공급 | 폐색 커프 장치에 사용 |
참고문헌
- Smits, P., et al. Endothelial release of nitric oxide contributes to the vasodilator effect of adenosine in humans. Circulation. 92, 2135-2141 (1995).
- Forstermann, U., et al. Nitric oxide synthase isozy....
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