방법 논문

준비 및 평가 99m Bioorthogonal 화학을 사용하여 사전이 타겟팅에 대한 세자리 킬레이트를 Tc를 표지

DOI:

10.3791/55188

⸱

2017년 2월 4일

 ,  ,  ,  , 
1Department of Chemistry and Chemical Biology, McMaster University

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

여기에서는 사전 표적화 및 생체 직교 화학을 위한 트라이덴테이트 99mTc(I) 킬레이트-테트라진 유도체의 방사성 표지 및 생체 내 테스트를 위한 프로토콜에 대해 설명합니다.

초록

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

생물직교화학과 결합된 사전 표적화는 새로운 방사성 의약품을 만드는 효과적인 방법으로 부상하고 있습니다. 사용 가능한 방법 중 생체 분자에 연결된 방사성 표지된 테트라진과 트랜스 시클로옥텐(TCO) 사이의 역전자 수요 Diels-Alder(IEDDA) 순환첨가는 특정 생물학적 표적을 이미징하는 데 매우 효과적인 생체 직교 접근 방식임이 입증되었습니다. 테크네튬-99m이 핵 진단에서 가장 널리 사용되는 동위원소로 남아 있음에도 불구하고 99mTc 표지 테트라진을 제조하는 방법은 부족합니다. 본 명세서에서는 트라이덴테이트-킬레이트-테트라진 유도체 계열 및 이들의 Tc(I) 복합체의 제조를 보고합니다. 지금까지 알려지지 않은 이러한 화합물은 31%에서 83%의 방사성 화학적 수율로 마이크로파 보조 방법을 사용하여 99mTc로 방사성 표지되었습니다. 이 제품은 식염수 및 PBS에서 안정적이며 in vitro에서 TCO 유도체와 빠르게 반응합니다. 이들의 생체 내 사전 표적화 능력은 활성 뼈 대사 또는 손상 부위에 국한되는 TCO-비스포스포네이트(TCO-BP) 유도체를 사용하여 입증되었습니다. 쥐 연구에서 99mTc-테트라진은 무릎과 어깨 관절에서 높은 활성 농도를 보였는데, 이는 TCO-BP가 없는 상태에서 실험을 수행했을 때는 관찰되지 않았습니다. 비표적 장기 및 약동학의 전반적인 흡수는 링커의 특성과 킬레이트의 극성에 따라 크게 달랐습니다.

서론

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

99m Tc를 전 세계적으로 올해 1, 2, 3 당 실시 만 50 이미징 절차에 진단 핵 의학에서 사용되는 지배적 인 방사성 동위 원소, 남아있다. 임상 적으로 사용되는 99m Tc를 제의 대부분은 관류 형 방사성 의약품이다. 99m Tc를가 표적화 구조물에 라이 게이션을 통해 특정 바이오 마커에 결합하도록 지시하는 능동적 표적 화합물의 제한된 수있다. 타겟 99m Tc를 방사성 의약품의 생성은 종종 관심의 바이오 마커에 결합하는 표적 분자의 능력 99m Tc를 리간드 복합체의 영향에 의해 방해하거나 동위 원소 반감기 고 분자량 생체 분자와 함께 사용하도록 충분히 길게하지 않다 이러한 항체. 이미지가 담배 마는 비 대상에서 삭제하는 생체 분자의 순서를 인수하기 전에 후자는 일반적으로 몇 일이 필요합니다 단말. 사전 타겟팅은 이러한 문제를 극복하기위한 대안적인 접근 방식을 제공합니다.

bioorthogonal 화학 결합 사전 타겟팅 모두 형광 무선 촬상

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

동물 실험은 동물 관리에 캐나다위원회 (CCAC) 지침에 따라 맥 매스터 대학의 동물 연구 윤리위원회의 승인을했다.

99m Tc를 가진 Tz 일 - 세자리 리간드 1. 방사성 표지

주의 : 다음 절차 방사성 화합물의 사용을 요구한다. 작업은 안전 및 폐기 규정을 준수하여 허가 된 실험실에서 수행해야합니다. 전자 레인지 반응은 특히 화학 합성을 위해 설계된 전자 레인지에 수행되어야한다.

  1. 의 합성 99m Tc를 (CO) 3 (H 2 O) 3] + 19 20
    1. 마이크로파 바이알에 결합 8 mg의 K 2 BH 3 CO 2, 15 mg의 나트륨 2 CO 3, 20 mg의 나트륨이 B 4 O 7 · 10H 2

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

리간드는 시판되는 테트라 22 23 생성물의 결합에 의해 다음 간단한 환원성 아 민화 전략 (도 2)를 통해 다른 링커 및 킬레이트 제를 사용하여 합성 하였다. 방사성 표지는 모든 화합물에 대한 방법과 동일한 방법을 사용하여 수행 재현성이었다. 83 % (1) 45 % (2) 31 % 공정은 테크네튬 방사성 표지 화합물 1-5는 높은 방사 화학적 수율 적당한 수득 하였다 99m 그러자, 리간드, 반응 시간 및 온도의 양 pH를 변화시켜 최적화시켰다 (3) 42 % (4), 및 54 % (5). 증발기를 이용하여 미 반응 리간드 증발로부터.......

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

다양한 극성의 테트라 링크 세자리 킬레이트의 컬렉션을 준비하고, 생체 내에서 TCO 유도체와 IEDDA 반응에서 자신의 99m Tc를 단지의 유틸리티를 평가 하였다. 효과적이고 재현 99m Tc를 라벨링 방법은 리간드 농도가 라벨링 단계 (화합물 2-5) T- 부틸 기의 탈 보호 하였다 10-3 M.이었다 다섯 테트라 - 킬레이트 위해 개발되었다. 리간드의 농도는 높은 방사 화학적 수율을 향상시키고, 테트라 (21)의 열화를 최소화 반응 시간을 감소시키기 위해 사용되었다. 생성물을 분리하고 모두 갖는> 99 %의 방사 화학적 순도 1.48 MBq의 / μg의 ~ 높은 특정 활성을, 표지 된 리간드와 31-83%에서부터 방사 화학적 수율을 초래 HPLC에 의한 방사 불순물로부터 분리 하였다. 모든 화합물은 PBS 0을 함유하는 안정한 것으로 나타났다.최대 6 시.......

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

저자는 경쟁하는 금전적 이해관계가 없음을 선언합니다.

감사의 글

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 연구는 캐나다 자연과학 및 공학 연구 위원회(NSERC), 온타리오 암 연구소(OICR, #P.SI.015.8) 및 캐나다 암 학회(CCS, #703857)의 연구 보조금 지원을 받았습니다. 저자는 원고 준비에 도움을 준 Denis Snider 박사의 공헌을 인정합니다.

....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
아르곤 가스Alphagaz------
Na2CO3EMD Millipore106395
---Na2B4O7· 10H2O아나케미아S9640---
KNaC4H4O6· 4H2OAnachemia217255---
Technelite 99mTc 발전기Lantheus 의료 영상---99mTcO4-
0.9% 식염수Lantheus 의료 영상---발전기 용출
1 M HClLab Chem------
MeOHCaledon------
ACNCaledon---HPLC 등급
Millipore H2OThermo Fisher ScientificBarnstead Nanopure---
DCMCaledon------
TFACaledon------
PBSThermo Fisher Scientific10010023pH 7.4 1x
BSASigma AldrichA7906---
Tween80Sigma AldrichP8047---
IsofluraneCDMV108737 공급업체: Fresenius Kabi Animal Health
HPLCWaters1525 바이너리 펌프, 2998 광다이오드 어레이 검출기, E-SAT/IN, Bioscan Flowcount PMT 검출기(항목 # 15590)---
화합물 2-4 Phenomenex의 분석 및 정제를 위한 HPLC 컬럼00G-4435-E0쌍둥이자리® 5 &마이크로; 남 C18 110  Å,
화합물 1 및 5 Waters의 분석 및 정제를 위한nbsp;186003115XBridge BEH C18 Column, 130 Å, 5 & 마이크로; m, 4.6mm x 100mm
마이크로파 반응기 바이오타주 개시제 8---
Biotage V10 증발기Biotage 시리얼 # V1041---
Dose calibratorCapintec, Inc. CRC-25R---
감마 카운터Perkin ElmerWizard 1470 자동 감마 카운터---
동물 방 스케일 Mettler ToledoXP105 Delta Range---
마이크로파 바이알 바이오타주 3556290.5-2 mL 
LC 컬럼 250 x 4.6mm HPLC 컬럼&

참고문헌

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jurisson, S. S., Lydon, J. D. Potential Technetium Small Molecule Radiopharmaceuticals. Chem. Rev. 99 (9), 2205-2218 (1999).
  2. Kluba, C. A., Mindt, T. L. Click-to-chelate: Development of Technetium and Rhenium-Tricarbonyl Labeled Radiopharmaceuticals. Molecules

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

이 JoVE 논문의 텍스트 또는 그림 재사용 허가 요청

허가 요청

태그

99mHPLCTCO BP

관련 논문