심장 수술 후 혈청 샘플의 영향을 건강한 자원 봉사자와 그들의 철새 잠재력에서 내피 전구 세포의 분리

Christoph Emontzpohl; David Simons; Sandra Kraemer; Andreas Goetzenich; Gernot Marx; Jürgen Bernhagen; Christian Stoppe

doi:10.3791/55192

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방법 논문

심장 수술 후 혈청 샘플의 영향을 건강한 자원 봉사자와 그들의 철새 잠재력에서 내피 전구 세포의 분리

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DOI:

10.3791/55192

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2017년 2월 14일

Christoph Emontzpohl¹^,² , David Simons³ , Sandra Kraemer⁴ , Andreas Goetzenich⁴ , Gernot Marx¹ , Jürgen Bernhagen⁵^,⁶ , Christian Stoppe¹

¹Department of Intensive Care Medicine, University Hospital Aachen, ²Institute of Biochemistry and Molecular Biology, University Hospital Aachen, ³Department of Radiology, German Cancer Research Center, ⁴Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery, University Hospital Aachen, ⁵Department of Vascular Biology, Institute for Stroke and Dementia Research (ISD), Klinikum der Universität München, ⁶Deutsches Zentrum für Herz-/Kreislaufkrankheiten (DZHK), Munich Heart Alliance

이 논문에서

요약

내피 전구 세포 (내피 전구 세포는) 결정적으로 허혈성 조직의 혈관 신생에 관여한다. 이 방법은 말초 혈액에서 인간 내피 전구 세포의 분리뿐만 아니라, 심장 수술 환자의 혈청 샘플에 대한 그들의 이동성 전위의 식별을 설명한다.

초록

내피 전구 세포 (내피 전구 세포)은 저산소증과 같은 병리 적 조건에서 골수로부터 모집 결정적 허혈성 조직의 혈관 신생에 관여한다. 내피 전구 세포의 기원, 분류 및 특성은 복잡; 에도 불구하고, 내피 전구 세포의 두 눈에 띄는 하위 유형이 설립되었습니다 소위 "초"내피 전구 세포는 늦게-가지 내피 전구 세포 (후기 내피 전구 세포) (이후로-초기 내피 전구 세포 함). 이들은 생물학적 특성에 의해뿐만 아니라, 체외 배양시 그 모양에 따라 분류 할 수있다. "초기"내피 전구 세포는 EC-특정 미디어의 말초 혈액 유래 단핵구 세포의 배양 후보다 일주일에 표시되지만, 늦은 가지 내피 전구 세포 2 ~ 3 주 후에 찾을 수 있습니다. 늦게 가지 내피 전구 세포는 "초기"내피 전구 세포가 Endogen 사 등 다양한 혈관 신생 인자를 표현하는 반면, 직접 주로 성숙 내피 세포로 분화 할 수있는 능력을 통해, 혈관 신생에 관여하는 것으로 인정 받고 있습니다OU에화물이 분비 방식으로 혈관 신생을 촉진합니다. 심근 허혈 / 재관류 (I / R) 동안, 다양한 요소가 혈관 형성의 영역에 내피 전구 세포의 원점 복귀를 제어 할 수 있습니다.

대 식세포 이동 억제 인자 (MIF)은 케 모킨과 같은 염증성 사이토킨 및 보편적으로 발현하고 최근 생리적 농도 ¹ 내피 전구 세포 이주 같은 주요 조절 기능하도록 설명 하였다. 흥미롭게 MIF는 세포 풀에 저장되고 신속하게 여러 자극 후의 혈류 내로 (예를 들면, 심근 경색)을 해제 할 수있다.
이 프로토콜은 혈청 샘플에 대한 시험 관내 마이그레이션 분석에 사용 피브로넥틴 - 코팅 된 플레이트에 내피 성장 인자가 포함 된 배지에서 이후의 문화와 CD34 양성 선택에 따라 성인의 말초 혈액에서 초기 내피 전구 세포의 신뢰성 분리 및 배양하는 방법을 설명합니다 심장 수술 환자. 또한,다른 잘 알려진 혈관 신생 촉진 사이토 카인에 비해 내피 전구 세포의 화학 주성에 MIF의 철새 영향이 설명된다.

서론

내피 전구 세포 (내피 전구 세포)는 인간의 혈액 순환 ^및이 내피 세포로 분화 할 수있는 능력을 가지고있다. 이들은 혈관 형성에 참여하고 다양한 방법으로 ^{^{^3,4-}} 염증 및 허혈 / 재관류 (I / R) 손상에 의한 피해를 최소화 할 수있다. 예를 들어, 내피 전구 세포는 카탈라아제, 글루타티온 과산화 망간 슈퍼 옥사이드 dismutases (MnSOD) ^5와 같은 세포 내 항산화 효소의 높은 수준을 보여줍니다. 산화 적 스트레스에 대한 높은 저항은 내피 전구 세포가 허혈 손상 ⁶ 후 상승 된 활성 산소 종 (ROS)와 미세 환경에서 작동 할 수 있습니다. 이전의 ^연구는 또한 내피 전구 세포의 개수는 혈관 내피 전구 세포 수리하고 순환 수가 감소는 심혈 관계 사건 ^(7)의 발생을 예측하는 것이 상관 될 수 있음을 지적클래스 = "외부 참조"> 8. 그러나, EPC 명확한 정의은 아직 발견하지 못했다. 지금까지가 내피 전구 세포에 대한 특정한 세포 표면 마커 또는 일관성 표현형이 없으며 이들....