방법 논문

신생아 쥐 새끼들까지 잔치에서 신경 발달 반사 테스트

DOI:

10.3791/55261

2017년 4월 24일

이 논문에서

요약

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행동 검사는 뇌 손상 다음과 같은 결과를 결정하기위한 황금 표준이며, 유아와 아동의 발달 장애의 존재를 식별 할 수 있습니다. 신경 발달 반사 신경이 이상의 초기 지표입니다. 신생아 설치류에서 쉽게 달성 발달 반사 검사의 호스트가 개발하고 여기에 설명했다.

초록

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신경 발달 반사 테스트는 일반적으로 신경계의 성숙을 평가하기 위해 임상에서 사용된다. 반사 신경 발달은 원시적 반사 칭한다. 그들은 민감하고 나중에 결과와 일치한다. 이상은 반사 신경 발달 장애 위험이 높은 유아의 예측 지표이다 반사의 부재, 지속성, 재현성, 또는 지연과 같이 설명한다. 인간의 유아에서 관찰 할 것 같은 뇌성 마비와 같은 신경 발달 장애의 동물 모델은 종종 비정상적인 발달 반사를 표시합니다. 설명 된 기술은 신생아 래트에서 반사 신경 발달의 다양한 평가. 신경 발달 반사 테스트는 연구자에게 같은 젊은 동물, 그렇지 않으면 사용할 수없는 시험 방법을 제공합니다. 여기에 제시된 방법론은 감지 조기 발병의 BR하는 방법으로 신생아 쥐의 발달 이정표를 검사에 수사관을 지원하는 것을 목표로아인 부상 및 / 또는 치료 적 개입의 효과를 결정. 여기에 제시된 방법은 연구자에 대한 일반적인 지침을 제공하는 것을 목표로하고있다.

서론

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신경 발달 반사 신경, 또는 발달 이정표는 인간의 신생아 및 유아에 사용되는 초기 평가의 하나입니다. 신경 반사 신경은 뇌간과 척수의 반사 신경을 보여 불수의 반복적 인 운동이다. 이주 수초 및 synaptogenesis 진화하는 것을 특징으로 높은 두피 네트워크의 성숙 자율 제어 및 피질 억제를 촉진한다. 중추 신경계의 진화의 정상적인 진행의 변화는 신경 발달 반사 지연이나 결석을 일으키는 비정상적인 대뇌 피질의 배선, 기능 및 수초의 결과로, 두뇌 발달을 방해 할 수 있습니다. 신경 발달 장애 위험이 높은 인간의 유아는 종종 비정상 초기 반사를 표시합니다. 이상은 나중에 반사의 인수없는 지연 장기간 존재하거나 재현로서 존재하고, 발달 장애 예측할 수있다. 1,2 따라서신경 발달 장애의 실험 모델에서 반사 지연을 모방하는 것이 중요하다.

설치류는 일반적으로 실험 모델로 사용된다. 쥐 새끼 그러므로 특정 복잡한 모터, 감각 및 / 또는인지 행동 업무를 수행하기에 너무 미성숙 태어 때 altricial, 그리고. 이와 관련하여, 그들의 발달 미숙은 모두 물리적 및 장기 개발에 관한 것이다. 쥐, thermoregulate 무능력과 털이 ....

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프로토콜

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앨버타 대학의 동물 관리 및 사용위원회, 건강 과학은 모든 동물 연구를 승인했다.

참고 :이 프로토콜은 다른 종과 균주에 적용 할 수 있지만,이 프로토콜은 긴 에반스 쥐를 대상으로합니다. 이러한 래트 다른 설치류 균주에 비해 우수한 성능 모터 시력을 보여왔다. 다음 타이밍 임신,식이 보충제, 모체 염증 및 신경 발달 반사 25, 26 프로토콜이다.

1. 실험 동물

  1. 쥐 동물 주택 시설에 도착하면, 그들의 새로운 환경에 적응 할 수 있도록 하루 이틀을위한 상호 작용 삼가. 적응 후 약 5 일 동안 매일 쥐를 처리하지, 또는 쥐 때 더 이상 스트레스의 조짐을 보이고. 인간에 의한 스트레스 테스트 결과와 르를 변경할 수 있습니다임신 손실 광고.
  2. 쥐가 익숙해지면, 번식이 시작됩니다. (오전 8시 - 오후 3시) 두 여성 및 2 층 사육 케이지 한 수컷 쥐 (H = 38cm, 1,800cm 2 면적) 밤새 놓는다. 이 케이지는 스트레스와 혼잡을 방지합니다. 아침에 전달 피펫을 사용하여, 식염수의 약 0.25 mL를 ....

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결과

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이 실험 설계의 타임 라인은 그림 2에 제시되어있다. 30 개 방법 및 결과는 이전에 발표되었다. 연구의 30 목적은 브로콜리 임신 동안 콩나물과 preweaning 기간식이 보충이 LPS 자궁 내 노출에 의해 유도 된 신경 발달 지연의 자손을 보호 여부를 평가하는 것이다. 타이밍 임신 래트 식염수 (대조군, 100 μL) 또는 12 시간마다 E19 및 E20에 LPS (200 ㎍ / kg은 멸균 생리 식염수에 희석 100 μL)을 복강 내 주사를 받았다. 임의로 선택된 임신 댐은 E14에서 PD21 건조 브로콜리 콩나물 하였다 (200 mg / 일)의식이 보충제를 받았다. LPS는 자손을 보호하기 위해 잠재적 인 치료 개입으로 주어졌다 산모의 염증과 브로콜리 콩나물을 모방하는 데 사용되었다........

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토론

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신경 발달 플렉스 시험 명백한 병리학 분명없는 상황 의미 일 수있다 비정상적인 피질 개발과 성숙의 예측 계수이다. 신경 발달 테스트하는 동안,이 새끼가 매일 같은 시간에 조사되어 있는지 확인하는 것이 중요합니다. 쥐는 야행성 및 테스트가 하루 중 다른 시간에 수행되는 경우 때문에, 자신의 일주기 리듬 성능을 변경할 수 있습니다. 시끄러운 소리가 새끼에 스트레스를 추가 할 수있는 34 테스트는 조용한 방에 완료되어야한다. 35 새끼 반송 인간 처리 및 신규 설정 새끼에 응력을 유도 할 수 있기 때문에, 새로운 환경에 적응하기 위해 최소 1 시간을 필요로한다. 35 개 새끼도 가열 램프 아래 또는 가열 패드 위에 직접 테스트 할 필요가있다. 새끼 더 젊은 덜 수 그들은 thermoregulate 할 수 있습니다. 이러한 이유로, 36, 15 새끼 주어진다의 각각.......

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공개 사항

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저자가 공개하는 게 없다.

감사의 글

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저자는 NeuroDevNet (우수 국가 센터)를 포함하는 우리의 자금 조달 기관을 감사드립니다의 알바 재단, 여성과 어린이 건강 연구소, 알버타 대학.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Breeding
Transfer 피펫Fisherbrand12-711-9AM질 세척에 사용됩니다.
멸균 식염수호스피라(Sterile Sagine Hospira7983254질 세척 중에 세포를 모으는 데 사용되는 용액입니다.
400 &마이크로; L 마이크로 원심분리기 튜브Fisherbrand05-408-120식염수를 담는 데 사용됩니다.
광학 현미경Leica LeicaATC 2000식염수 관찰용. 실험실에서 사용되는 모든 광학 현미경이 될 수 있습니다.
슬라이드Fisherbrand12-552-5식염수를 슬라이드에 놓습니다. 실험실에서 사용하는 모든 슬라이드가 될 수 있습니다.
커버슬립Fisherbrand12-545-F슬라이드를 커버슬립합니다. 실험실에서 사용되는 모든 커버슬립을 사용할 수 있습니다.
다이어트  Supplementation
Broccoli Sprouts seedsMumm's Sprouting Seeds브로콜리 새싹 씨앗은 실험실에서 주문하고 재배합니다.
조리대 씨앗 스플래터 박스멈의 싹이 트는 씨앗상자는 수확하기 전에 씨앗을 발아시키고 성장시키는 데 사용됩니다.
250mL 비커비커는 씨앗을 담그는 데 사용됩니다. 맞는 모든 크기의 비커를 사용할 수 있습니다.
모계 염증
지방당(LPS)SigmaL3129모체 염증을 모방하는 데 사용되는 내독소.
1 mL 주사기BD 주사기309659임신한 쥐를 주사하는 데 사용됩니다.
게이지 (30 g x 1/2)BD PrecisionGlide Needle305106통증과 불편함을 피하기 위해 가장 작은 바늘을 사용하십시오.
멸균 식염수(0.9% 염화나트륨, USP)호스피라식염수는 LPS를 용해하는 데 사용됩니다.
Weights
Scale덴버 악기. 실험실에서 사용되는 소수점 이하 2자리의 모든 척도가 될 수 있습니다.
Neurodevelopmental Reflexes
Thin Blunt Rod클립이나 이쑤시개가 될 수 있습니다. 이것은 앞다리와 뒷다리를 잡기 위한 것입니다.
원형 여과지Whatman1001 15015cm 직경의 종이는 보행 분석에 사용됩니다.
타이머Fisher Scientific06-662-51바로잡기와 보행에 할당된 시간을 측정합니다.
무딘 표면테이블의 가장자리가 될 수 있습니다. 이것은 뒷다리 배치 및 절벽 회피를 위한 것입니다.
폼 랜딩강아지가 가속 교정을 수행할 때.
비디오 레코더SonyVCT-D580RM테스트 된 모든 반사 신경을 기록합니다. 청각적 놀라움을 위해 1/1,000fps
히트 lamp 또는 패드검사를 받는 강아지의 체온을 유지하기 위해.
) 무게를 기록하기 위한 것입니다: 벨로 녹음할 수 있어야 합니다

참고문헌

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  1. Farber, J. M., Shapiro, B. K., Palmer, F. B., Capute, A. J. The diagnostic value of the neurodevelopmental examination. Clin Pediatr (Phila. 24 (7), 367-372 (1985).
  2. Zafeiriou, D. I. Primitive reflexes and postural reactions in the neurodevelopmental examination).

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재인쇄 및 허가

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