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방법 논문

마우스의 최소 침습 가로 대동맥 수축

20.9K 조회수

DOI:

10.3791/55293

2017년 3월 14일

이 논문에서

요약

기관 삽관과 인공 호흡기의 사용을 제거하면서 최소 침습 가로 대동맥 수축 (MTAC)는 일반 가로 대동맥 수축 (TAC)의 본질을 절약합니다. 그것은 특히 병진 연구에서 좌심실 과부하에 높은 처리량 연구를위한 매우 바람직한 방법으로 증명한다.

초록

최소 침습 가로 대동맥 수축 (MTAC)는 표준 오픈 가슴을 가로 대동맥 수축 (TAC)보다 마우스의 가로 대동맥의 수축을위한 더 바람직한 방법입니다. 횡 대동맥 협착이 좌심실 높은 압력을 유도하는 고기능 방법이지만 인한 기관 내 삽관과 인공 호흡기의 사용에 더 어렵고 긴 절차이다. TAC는 새로운 방법, MTAC로도 자주 덜 존속 없다, 둘 환기 설치와 갈비와 늑간 근육이나 기관 삽관의 절단을 필요로한다. 흉강에 액세스 할 수 개흉술에 반대 MTAC에서, 대동맥 궁은 ​​앞쪽 목의 중간 선 절개를 통해 도달한다. 갑상선은 흉골 노치를 나타 내기 위해 다시 당겨진다. 흉골이어서 제 리브 수준까지 절단하고, 대동맥 궁는 결합 조직 및 흉선을 분리하는 것만으로 도달된다. 에서거기에, 봉합 아치를 감싸 및 스페이서와 연결 한 후 흉골 절단 및 피부 닫을 수 있습니다 할 수 있습니다. MTAC 좌심실 고혈압을 유도하는 매우 빠르고 덜 침습적 방법은 높은 처리량 연구 가능성을 가능하게한다. 수축의 성공은 대동맥의 흐름 속도를 결정하기 위해 고주파 트랜스 흉부 심장 초음파, 특히 컬러 도플러 및 펄스 파 도플러를 이용한 검증 좌우 될 수 있고 우측 경동맥 동맥 혈관의 치수 및 좌심실 기능 및 형태. 성공적인 수축은 또한 간질과 혈관 주위 섬유화와 심장 근육 세포의 비대와 같은 중요한 조직 병리학 적 변화를 트리거합니다. 여기서, MTAC의 과정 경동맥에서 얻어진 유량 변화가 심장 초음파, 총 형태학 및 심장 조직 학적 변화를 관찰 할 수있는 방법을 보여주는 설명한다.

서론

이 문서의 전체 목적은 쥐 대동맥 협착 (TAC)가 간단하고 편리한 수술을 생성하도록 변형 될 수있는 방법을 횡 보여주는 것이다. TAC는 제 1991 (1)에 도입되고 조작 게놈 2, 3, 4, 5, 6, 특히 소 동물에 좌심실과 심부전 비대증으로 이어지는 세포 및 분자 경로를 연구하는 분자 생물학을 활성화시켰다. 원하는 압력 과부하를 제조에서 효능에도 불구하고,이 기술은 궁극적 절차를 수행 및 낮은 생존율로 어려움에 의해 제한된다. TAC 전도성 외과 기관 내 삽관, 개흉술을 수행하고 폐 붕괴 일을 방지하기 위해 인공 호흡기를 사용할 수 있어야한다.

콘텐츠 "> 종종 간단하고 덜 침습적 방법이 요구된다. 결과적으로, 최소 침습 횡 대동맥 협착 (MTAC)는 3을 고안 하였다. 그 결과 (즉, 좌심실 비대)는 동일하지만, 절차는 상당히 더 적은 수의 장치를....

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프로토콜

이 프로토콜은 홍콩 대학의 교육 및 연구 (CULATR)에서 라이브 동물의 사용에 대한위원회의 가이드 라인을 따른다.

1. 작업 현장 준비

  1. 75 % 이소 프로필 알코올로 사업장 소독. 마음의 변화와 피사체 동물의 호흡 속도를 피하기 위해 37 ° C까지 가열 패드 온도를 조정합니다.
  2. 30 분 동안 또는 다른 적절한 방법으로 121 ° C에서 중력 변위 멸균기에서 멸균 수술 도구를 사용합니다.
  3. 도 1에 도시 된 바와 같이 결찰 조직 분리 및 권취 장치로 사용하기위한 도구를 만들기 위해 4 개의 30 게이지 바늘과 바늘 홀더 곡선을 2 - 가라. 수술에 사용되는면 도포에 지금은 곡선 바늘을 탑재합니다.
  4. 이는 니들 홀더 90º 27 게이지 바늘과 곡선 블런트. 결찰 단계에서 0.4-mm 스페이서를 만들기 위해 하드 표면을 문질러 끝을 부드럽게.

2. 동물 준비

  1. 음의 꼬리 핀치 반사와 마취 확인 100 ㎎ / ㎏ + 10 ㎎ / ㎏ IP : 체중과 관련하여 적절한 케타민과 자일 라진의 혼합물 2 개월, 남성, 22~25g C57BL / 6N 마우스를 마취 . ....

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결과

MTAC는 적시에 좌심실에서 중요한 고혈압의 유도 할 수 있습니다.

폴리 우레탄 튜브 대신에 구부러져 열리는 4 30 게이지 바늘 -도 1에 도시 된 바와 같이, 절차는 기본 도구의 제조는이 요구를 간단하고 최소한이다. 수술 자체는 TAC에 비하여, 용이하게 수행 될 수 있기 때문에, 또한 덜 복잡하다. 갑상선이 수축되면, 흉골 절단하고, 흉선은보기를 취소 이동합니다. 대동맥 궁은 결찰 과정 (그림 2)에 대한 즉시 배치 가능합니다.

MTAC 확실하게 결찰 된 생쥐의 좌심실 압력 과부하를 생산하고 있습니다. 수축 된 횡 대동맥 명확 w로,도 3c에서 관찰 될 <.......

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토론

록맨 연구팀은 심장에 압력 과부하를 연구하는 방법으로 대동맥 밴딩을위한 첫 번째 방법을 고안했다. 이 활성화 연구는 고혈압과 심장 장애 1의 세포 및 분자 결과를 발견하기 시작합니다. 개선 된 방법, 침습적 횡 대동맥 협착 (MTAC)은 종래의 횡 대동맥 협착 (9)의 단점없이 좌심실 압력 과부하 및 심부전의 유도에 대한 의무, 시간에 따른 방법을 제공한다. TAC에 비하여 절차 자체에 훨씬 더 쉽게 증가 생존율로 수행 될 수있다. 이 방법의 주요 장점은 대동맥 협착 실험의 성능을 제공하지만, 동일하거나 더 나은 결과가 유의하게 적은 기기, 외과 기술, 및 동작 시간 때문이다.

TAC 절차에 오픈 가슴 방법은 g을 사용하지reater 액세스 및 심장과 혈관의 전체를 더 잘 볼 수 있습니다. 잠재적 인 장점은 쉽게 우심실 압력 과부하 대동맥 궁 밴딩이 완료되는 것과 동시에 허혈성 조건 관상 동.......

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공개 사항

저자는 경쟁하는 금전적 이해관계가 없음을 선언합니다.

감사의 글

우리는 베보 2100 초음파 시스템의 제공을 위해 홍콩 폴리 테크닉 대학교의 생명 과학 (ULS)의 대학 연구 시설을 인정하고 싶습니다. 교육 및 촉진을위한 생명 공학, 홍콩 폴리 테크닉 대학의 학제 부문에서 박사 Chunyi 원 총리 특별 감사. 이 작품은 홍콩 정부 RGC 부여 GRF 17127215, 764812 빌리 KC 차우에 HKU6이 / CRF는 / 11G에 의해 지원되었다.

....

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재료

6/0 Dafilon
이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
1 인치 30 게이지 바늘BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. 305128절차와 같이 곡선 그림 1
27 Gauge NeedleBD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. 301629위해 무뚝뚝하고 매끄럽게 만드십시오
.C0933066
6/0 SilkamB. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany.C0762067
멸균 장갑A.R. Medicom, Inc (아시아), 홍콩.
Cotton ApplicatorMannings, 쿼리 베이, 홍콩.Local Shopping Center
Depilatory CreamVeet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong KongLocal Shopping Center
Lexer-Baby ScissorFST, 브리티시 컬럼비아 V7H 0A6, 캐나다.14078-10
Curved Iris ForcepFST, 브리티시 컬럼비아 V7H 0A6, 캐나다.11065-07
Micro Olsen-Hegar 바늘 홀더WPI, Sarasota, FL 34240, USA. 501989
Stereo MicrioscopeWPI, Sarasota, FL 34240, USA. PZMIII-BS
strong>GenTeal Eye GelNovartis, East Hanover, NJ 07936, USA. 지역 약국
Heating PadKent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA. DCT-20
수술용 테이프Laboratory Animal Unit
케타민 및 XylazineLaboratory Animal Unit
BetadineLaboratory Animal Unit
BuprenorphineLaboratory Animal UnitstrongBuprenorphine/strongLaboratory Animal Unit)
스페이서B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany를 <

참고문헌

  1. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
  2. de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic co....

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재인쇄 및 허가

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