실험실 쥐에 대한인지 심화로 리모콘 교육 소개

요약

실험용 마우스를 위한 새로운 정제 전략의 개발은 3R 원칙을 이행하는 데 기여하는 도전적인 작업입니다. 이 프로토콜은 실험실 쥐를 위한 인지 강화 프로그램으로 클리커 훈련을 소개합니다.

초록

실험실 동물 과학에서 새로운 개선 전략을 수립하는 것은 지침 2010/63/EU의 요구 사항을 충족하는 데 있어 핵심 목표입니다. 이전 연구에서는 부드러운 취급 프로토콜이 실험실 쥐의 웰빙에 미치는 지대한 영향을 확인했습니다. 생쥐 사육에 클리커 훈련을 도입함으로써 생쥐의 우호적인 치료를 촉진할 뿐만 아니라 생쥐가 인지적 풍부함을 경험할 수 있도록 합니다. 클리커 훈련은 조건화된 2차 강화제인 클리커의 "딸깍" 소리를 사용하는 긍정적 강화 훈련의 한 형태로, 강화된 행동과 다가오는 보상 사이의 시간 다리 역할을 합니다. 각 성별의 12마리의 BALB/c 근친 마우스 코호트를 대상으로 클리커 훈련 프로토콜을 효과적으로 구현하는 것은 복잡하지 않은 것으로 판명되었습니다. 생쥐는 클리커 훈련 프로토콜의 과제에 도전했을 때 다소 빨리 배웠고, 거의 모든 훈련된 생쥐는 주어진 도전을 극복했습니다(암컷 생쥐의 경우 100%, 수컷 생쥐의 경우 83%). 이 연구는 생쥐에 대한 클리커 훈련이 불안 관련 행동(예: 배변, 발성, 배뇨) 감소 및 우울증과 유사한 행동(예: 떠다니는 것)의 감소로 나타난 바와 같이 인간-생쥐 상호 작용 중 생쥐의 두려움 감소와 밀접한 상관관계가 있음을 확인했습니다. 실험용 쥐를 기르는 일상 생활에 쉽게 통합될 수 있는 신뢰할 수 있는 프로토콜을 개발함으로써, 쥐의 평생 복지 경험을 실질적으로 향상시킬 수 있습니다.

서론

실험실 쥐에 대한 새로운 정제 전략의 개발은 실험실 동물 과학 ⁽¹⁾ 상기 3RS의 이행 (교체, 감소 및 정제)에 기여하는 어려운 작업입니다. 정제 분야의 개선은 추가적인 실험을 위해 사용되는 동물의 수백만의 복지에 기여할 수있다. 따라서, 집중 연구 분야에서 필요하다. 이것은 또한 유럽 연합 (EU)의 지침 63분의 2,010의 정의 된 목표이다. 지침 63분의 2,010 / EU는 실험 동물의 수명 경험을 강화해야한다는 지적과 (제 3.7) ² "시설이 습관화 및 교육 동물에 적합한 프로그램, 절차 및 프로젝트의 길이를 설정해야한다"고.

그들이 보관하고 실험을 위해 사육되는 동안 실험 동물은 많은 스트레스 상황을 경험할 수 있습니다. 노동 사이 보통 상호atory 마우스와 책임있는 사람들은 오히려 제한됩니다. 따라서, 신뢰 관계가 발전 할 수 없습니다. 이 동물들 ^{3, 4, 5, 6의} 동작 생리학, 따라서 복지에 해로운 취....

프로토콜

윤리 정책 : 마우스와 실험 절차의 처리는 국가 유럽, 및 동물 보호를위한 제도적 지침에 따라 실시 하였다.

참고 :이 프로토콜은 주말 (토요일과 일요일)에 휴식과, 개입 5 일 (월요일 ~ 금요일)을 포함한다. 프로토콜은 쉽게 특정 요구를 만족하도록 구성 될 수있다.

1. 두 번째 보강제로서 적절한 보상을 결정

참고 : 진공 포장 된 식품 또는 식품 안전 기준을 충족 동물 사료로 사용 식품 보상. 예를 들어, 견과류, 초콜릿, 젤리 곰, 또는 말린 과일의 종류가 적합하다.

1. 다른 음식 보상 홈 케이지로 (그림 1) (0.5 cm ³ 개)와 작은 페트리 접시를 삽입합니다.
2. 10 분 후, 먹다 남은 음식을 확인합니다.
3. 모든 보상은 10 분 후에 먹을 경우 선호도를 추정 할 수있을 때까지의 시간 간격을 단축.
4. 날 (4, 5) (예 Thursday를 금요일), 보상에 새장의 모든 마우스의 허식을 설정하는 홈 케이지에 대한 선호 ( "승자") 보상의 소량을 추가합니다.
5. 마우스가 마우스 터널에 길들여 있지 않은 경우 (최소 2 일 주말에 예를 들면 교육, 시작하기 전에) 케이지에 터널을 ....

결과

가장 중요한 단계의 첫번째와 하나가 적절한 음식 보상의 결정이었다. 따라서, 마우스는 페트리 접시 (도 1)에 너트 당 용액, 잼, 초콜릿의 다른 종류의 여러 가지 제안 하였다. 우리의 경험에서, 마우스는 화이트 초콜릿에 대한 분명한 선호도를 보였다. 따라서, 우리는 더 교육 프로세스에 화이트 초콜릿을 사용했다.

실제 훈련은 각 성별의 12 BALB / C 근친 마우스의 코호트로 구현되었다. 모든 마우스는 교육에 높은 관심이 있었다. 트레이닝의 성공 평가를 위해, 우리가 원하는 동작의 적절한 성능을 위해 선택 (도 4)의 "목표 스틱 다음". 훈련 된 쥐 - 모든 여성 쥐와 수컷 쥐 - 다음 대상 스틱의 83 %의 대다수 (그림 8). 여성 마우스는 높.......

토론

각각의 섹스 (12) BALB / C 근친 마우스의 코호트와 리모콘 훈련 프로토콜의 효과적인 구현은 복잡하지 않은 것으로 판명. 이전 연구는 여러 종과 식자 교육의 효과를 확인했다, 우리는 마우스에이 확장. 쥐 실험 동물 중 가장 낮은 개발 포유류로, 자신의 능력은 종종 과소 평가된다. 따라서, 상기 데이터의 가장 놀라운 양태는 훈련 성공 거의 모든 마우스에 의해 달성 될 수있다.

이 프로토콜 내에서 하나의 중요한 단계는 표시된 동작 및 보강재 사이의 연결을 구축하기에 매우 중요하다 제 보강제의 타이밍이다. 마우스는 매우 교반 한, 그들이 주변 빠르게 뛰어하면서 정확한 성능을 표시하기 위해 약간 어렵다. 더 많은 경험 트레이너, 빠른 훈련 성공을 달성 할 수있다. 우리는 심지어 미경 기차, 마우스가 아주 빨리 배운 것을 관찰ERS. 심지어 작은 실수가 리모콘 트레이닝 프로토콜의 과정에서 보상 될 수있다. 오류의 일반적인 소스는 잘못된 행동과 클릭 한 후 음식 보상에 대한 관심.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
오픈 하우징용 뚜껑	Tecniplast	GM500LID117
SealSAfe Plus 오픈 하우징용 상단	Tecniplast	GM500400SU
Type II 긴, 필터 탑 케이지	Tecniplast	GM500PFSPC
Aspen 침구 재료	랩 & Vet Service GmbH	H0234-300	환경 농축
레드 폴리카보네이트 마우스 하우스	Tecniplast	ACRE011	환경 농축
티슈 페이퍼	Tork, SCA Hygiene Products GmbH	290179	환경 농축
식품 - ssniff M-H Extrudat	ssniff	V1126-000	ad libitum
Target Stick with Clicker	Trixie	2282
PVC 튜브(터널)	Thyssen Krupp	RTPVCU04003005
White Chocolate/ white chocolate cream			Company는 상관없습니다, 선호하는 유기농 품질의
펜치	FineScienceTools	예: 11150-10	또는 초콜릿을 고정하는 다른 도구
Prism 버전 6.0 Windows	GraphPad 소프트웨어