비 투 열 방법을 통해 복 부 피하 지방 조직 생 검에 대 한 기술

요약

우리는 복 부 지방 조직 생 검 국 소 마 취 아래 수행 비 투 열 방법을 사용 하 여 표준화. 세 가지 경우의 과도 한 후 115 작업 (2.61%)에서 출혈 발생 했습니다. 우리는 복 부 지방 조직 수술 생 검 투 비 열 방법을 사용 하 여 적용할 수 있는 안전 하 게 건강 한 사람에 게 결론.

초록

지방 조직 생 검 조직 샘플을 분석, 시 대사 및 질병 메커니즘의 통찰력이 개요를 제공할 수 있습니다 제공 합니다. 복 부 지역에 피하 지방 조직 생 검, 연구자와 의사는 수술 또는 바늘 기반 기술을 사용 합니다. 그러나, 수술 피하 지방 biopsies 백색 지방 조직에 생물학적 지표의 복합성의 더 포괄적인 개요를 제공할 수 있는 조직 샘플을 제공할 수 있습니다. 일반적으로, 수술 지방 조직 생 검 투 열 치료 cauterizing 혈관 과도 한 출혈을 방지 하기 위해 포함 되어 있습니다. 그럼에도 불구 하 고, 플래시 화재와 조직, 피부 장애 등의 부작용 투 열 후 보고 되었습니다. 따라서, 우리는 표준화 비 투 열 방법을 사용 하 여 로컬 마 취 아래 수행 수술 복 부 지방 조직 생 검 목적입니다. 우리는 건강 한 남성 비 투 열 복 부 수술 생 검 메서드를 사용 하 여 115 피하 지방 조직 생 검 실시. 우리의 결과 115 작업 (2.61%)에서 출혈 과도 한 사후 작업의 세 가지 경우를 보여주었다. 결론적으로, 우리의 표준된 피하 복 부 지방 조직 수술 생 검 투 비 열 방법을 사용 하 여 최소한의 부작용으로 머리 맡에 건강 한 사람에 게 안전 하 게 적용할 수 있습니다.

서론

지방 조직 생 검 조직 샘플을 분석, 시 대사 및 질병 메커니즘의 통찰력이 개요를 제공할 수 있습니다 제공 합니다. 예를 들어, 그들은 유 방 암 종양 식별¹, 지방산 조성 시험²및 중요 한 대사와 호르몬 질병 경로³에 대 한 연구에 사용 됩니다. 복 부 지역에 피하 지방 조직 생 검, 연구자와 의사는 수술 또는 바늘 기반 기술을 사용 합니다. 그러나, 수술 피하 지방 생 검 조직 샘플 [예를 들어, 메신저 ribonucleic 산 (mRNA) 식, 조직학 분석, 등] 복잡 한 생물 학적 메커니즘의 포괄적인 개요를 제공할 수 있습니다 제공할 수 있는⁴ . 그들은 건강 한 성인⁴ 에서 이전에 사용 하 고 침대⁵에서 안전 하 게 수행할 수 있습니다.

생 검 바늘 기반 기술 조직의 무결성을 파괴 수 있습니다 강렬한 지방 흡입 필요 하 고 일반적으로 적은 양의 조직 (100-500mg)⁶을 검색 합니다. 이러한 조직 샘플 복잡 한 조사 연구에 적합 하지 않을 수 있습니다. 또한, 바늘 기반 기술에 비해, 수술 피하 지방 biopsies 제공할 수 있습니다 (예를 들어, B와 T 세포 신호); 여러 염증 성 지표의 더 완전 한 그림을 그릴 수 있습니다 조직 샘플 골격 규정; 세포질 통로; 지질, 탄수화물, 아미노산;의 대사 경로 그리고 산화 인 산화 통로⁴. 바늘-기반 기술 조직^{4,7,8 거리 영역에 대 한 약간의 정보를 제공 하면서 수술 한4, 보다 혈액 세포 오염에 대 한 높은 위험을 포함 하는 또한,} .

일반적으로, 수술 지방 조직 생 검 투 열 치료⁹과도 한 출혈 방지 하기 위해 혈관을 cauterizing에 대 한 포함 되어 있습니다. 투 열 또한 구울 조직 신생 및 사마귀 질환⁹에 의해 감염 되는 조직에 의해 영향을 파괴 하는 데 사용 됩니다. 이 기술은 특히 신경외과 눈 수술⁹에 적용 됩니다.

투 열 요법의 과도 한 사용은 괴 사 성 조직, 감염을 일으키는 원인이 되 고 치유 과정¹⁰지연의 형성으로 이어질 수 있습니다. 실제로, 플래시 화재 등 조직 병 변 피부 부작용 투 열⁹를 다음 보고 되었습니다. 또한, 우려 참가자/환자와 운영 직원⁹에 의해 흡입 수 있습니다 수술 환경에 투 열에 의해 발표 외과 연기의 독성에 대해 제기 되고있다. 실제로, 투 열 요법의 사용 흡연 6 담배¹¹ 에 의해 생산에 동일 수술 실에서 어 독성을 일으킬 수 있습니다 그리고 비록 수술 일반적으로 좋은 환기 시스템, 오염 수 마지막 적어도 20 분¹² . 그러나, 환자는 편도 선 수술 수술 사업, 투 열 메서드는 표시¹³ 비-중요 한, 수술 후 통증 및 출혈¹⁴ 클래식 결 찰 hemostasis 방법 보다 덜. 전반적으로, 수술 후 통증에 차이 및 건강 한 개인에서 지방 조직 생 검 후 요금을 거의 출혈 증거 존재 합니다. 투 열 요법의 부작용 및 증거의 부족을 감안할 때, 지방 조직 생 검에 대 한 비 투 열 방법의 표준화가 보증 된다. 따라서,이 연구의 목표는 복 부 피하 지방 조직 생 검, 건강 한 남자의 비 투 열 메서드를 사용 하는 국 소 마 취 아래 수행에 대 한 수술 기법을 표준화 했다. 또한, 우리는 조직 컬렉션 mRNA 표정 및 단백질 농도 결정 하 고 조직학 분석을 수행 하는 절차를 설명 합니다.

프로토콜

연구 헬싱키의 선언에 의해 설정 된 표준 규격에 맞 췄 고 티 살 리의 대학, 운동 과학, Βiοethics 위원회에 의해 승인 되었다.

1. 수술 장비 및 소모품의 준비

1. 4 륜 수술 메이 요 서에 소독된 수술 필드 위치.
2. 4 륜 수술 메이 요 서에는 다음 소모품 및 수술 장비 위치:
   바로 운영가 위 (15 cm)의 한 쌍
   한 메스 (번호 11)
   한 메스 핸들
   곡선된가 위 (14 cm)의 한 쌍
   한 모기 겸 자
   Kocher 핀셋 한 켤레
   한 외과 족집게
   Povidone-요오드 (에 대 한 살 균 거 즈)
   한 봉합 (4.0)
   직선 위 (11 cm)의 한 쌍
   한 바늘 홀더 (15 cm)
   5 살 균 gauzes
   한 접착제 멸 균 거 즈
   소독된 바늘으로 한 10 mL 주사기
   2 %xylocaine (아드레날린)의 10 mL
   하나 소독된 외과 장갑의 쌍
3. 별도 벤치에 다음 자료 위치:
   두 microcentrifuge 튜브
   10% 포 르 말린의 5 mL를 포함 하는 1 개의 관
   -190 ° c.에 액체 질소의 50-100 mL를 포함 하는 하나의 작은 컨테이너

2. 참가자의 준비

1. 참가자 따라 생 검 절차 전에는 8 h 빠른 ¹⁵.
2. 있고 참가자 자제 운동, 과도 한 스트레스, 알코올, 그리고 액티브 간접 흡연 72 h 이전 생 ^{16 , 17}.

3. 피하 지방 조직 생 검을 수행

1. 부정사 위치에 수술 침대에 참가자를 위치.
2. 절 개 povidone-요오드를 사용 하 여 영역을 소독.
3. 천천히 그리고 꾸준히 2 %xylocaine (아드레날린)의 10 mL를 주사 취 역할을 선택한 지역에 ¹⁸.
4. 절 개 영역을 제외한 참가자의 시체를 충당 하기 위해 지역 무 균 수술 필드 위치.
5. 적어도 3-5 분 나중에, 로컬 마 취의 영역에 핀셋의 쌍을 가진 압력을 적용 하 고 그 느낌 그 취를 달성을 보장 하기 위해 모든 고통을 ¹⁹ 참가자에 게 물어.
6. 11 호 메스 메스 핸들 연결.
7. 배꼽의 오른쪽 또는 왼쪽에 3-5 cm, 길이 2-2.5 cm의 절 개를 만듭니다.
8. 스트레이트 15 cm가 위를 운영 한 켤레와 피하 조직을 제거.
9. 지방 조직 밝혀 일단 한 쌍의 족집게와 곡선된 14 cm가 포착.
10. 잘라 약 1g의 지방 조직 제거.
11. 조직 제거, 다음 놓고 살 균 gauzes hemostasis 달성 하기 위해 절 개.
12. Hemostasis 확인 될 때 캡처 14 cm 바늘 4.0 봉합 및 피부 외과 핀셋의 쌍을 가진 피하 조직 표시 될 때까지.
13. 피하 조직으로 이동 하는 피부 및 피하는 밀접 하 게 정렬 하는 동안 피부에 봉합 바늘을 삽입.
14. 봉합 바늘, 피하 조직까지 피부 외부 구동으로 연속 지그재그 기법을 따라. 피부 절 개를 닫힐 때까지 계속.
15. 외부 봉합 넥타이.
16. 절 개 식 염 수의 영역을 청소 하 고 접착제 메 마른 거 즈로 그것을 커버.

4. 조직의

1. 3 개의 조각으로 수집 된 지방 조직을 구분: 150, 350, 및 500 mg.
2. Microcentrifuge 튜브 샘플 조직 150와 350 mg 조각 위치.
3. -80에서 냉장고에 최종 증 착까지-190 ° C에 액체 질소로 작은 용기에 담가 두 microcentrifuge 튜브 ° C.
   참고: 사전에 사용 하 여 무 균 바늘-190에서 액체 질소에 microcentrifuge 튜브의 침수 동안 컵 오류를 방지 하려면 microcentrifuge 튜브에 작은 구멍을 찌를 ° c.
4. 담가 샘플 조직 500mg 조각-조직학 분석을 위해 사용 될-10% 포 르 말린의 5 mL를 포함 하는 튜브에.
   주: 수술 중 과도 한 출혈의 경우에만 모기 겸 자 사용. 이러한 경우 하 선 고 hemostasis 달성 될 때까지 닫습니다 모기 집게와 선박 포착.

결과

참가자의 특성은 표 1에 제공 됩니다. 스티치 절 개의 영역에서 다음 8-12 일 이내 떨어졌다. 우리는 건강 한 성인 남성 비 투 열 복 부 수술 생 검 방법을 사용 하 여 115 피하 지방 조직 biopsies의 총 완료 (나이: 35.2 ± 6.9 년; 신체 질량 지 수: 27.3 ± 4.4; 및 체 지방 비율: 27.0 ± 9.0%). 세 가지 경우에서 관찰 되었다 과도 한 출혈 후 생 검 (보급: 2.61%)는 수술 후 2 일. 3 개인 과도 한 출혈을 경험 했다 아무 부작용 경험 들 보다 더 오래 된 [t₍₁₁₃₎=-2.115, p = 0.037], 그리고 다른 차이 (즉, 몸 대량 색인 및 신체 지방 비율) (p를 관찰 했다 > 0.05) 두 그룹 사이의. 마지막으로, 각 작업 후 3 개월 우리의 참가자의 아무도 어떤 부작용 (를 포함 하 여 피부 상처) 보고.

토론

이 연구의 목적은 복 부 피하 지방 조직 생 검, 건강 한 남성에서 비 투 열 방법으로 국 소 마 취 아래 수행에 대 한 수술 기법을 표준화 했다. 투 열은 일반적으로 수술 실;에 사용 그러나, 가능한 부작용 (즉, 플래시 화재 및 환경 독성)⁹ 와¹⁰ 치유 지연이 발생할 수 있습니다. 투 열 요법의 이러한 원치 않는 효과 운영 직원과 환자/참가자에 대 한 건강 위험을 생성할 수 있습니다. 따라서, 피하 지방 조직 생 검에 대 한 수술 비 투 열 방법 보증 된다.

우리 참가자 중 3 2 일 수술 후 출혈 과도 한 관찰 합니다. 이 세 개인 보고 절 개의 지역에 통증. 이러한 경우 치료에 피부 절 개의 지역 재개 했다, 어떤 과잉 혈액 제거 및 식 염 수와 위에서 설명한 동일한 기술을 사용 하 여 닫힌 지역의 청소 했다. 아니 합병증, 그 후 보고 되었다 그리고 연속적인 일에 관찰...

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
소독된 수술 분야	Hartmann	23516-00
스테인레스 스틸 악기 스탠드 (외과용 Mayo)	Medical Device Depot Inc.	32000
작동 가위 스트레이트 15cm	Karl Storz	791903
메스 No 11	Swann-Morton	203	Bipolar, 카탈로그 번호
429011 Scarpel 핸들 No 3	Karl Storz	488090
가위는 곡선형 14cm	Karl Storz	511514, 752918
모기 집게	Karl Storz	535012
Tweezers Kocher	Karl Storz	530416	Bipolar, 카탈로그 번호 830316
수술용 핀셋	Karl Storz	793216	Bipolar, 카탈로그 번호 831016
Povidone-iodine	다양한	비적용 봉
합사 4.0 Vicryl	Johnsons	V4970H
가위 스트레이트 11cm	Karl Storz	512511 DS
바늘 홀더 15cm	Karl Storz	515515	바이폴라, 카탈로그 번호 213015
멸균 거즈	Hartmann	3021
Α 고착 멸균 거즈	Digas 의료 장비	2889
10 mL 주사기와 소독 바늘	알파 의료 솔루션	10310-55-0010
2%-xylocaine (아드레날린 없음)	다양한	적용 불가
멸균 수술 장갑	Sempermed	10001
Eppendorf 튜브	Kartell	16283
10% 포르말린	알파 의료 솔루션	11016-30-2909
튜브 120 mL	디가스 의료 장비	9025
액체 질소 -190°C; C	Revival	해당 없음